原代大鼠肝细胞分离与纯化方法

目的探讨改良、简化肝细胞的灌注、分离方法,以提高细胞产量,降低制作成本.方法对传统的两步原位胶原酶灌流法进行改进,改变灌注方式,分离的大鼠肝细胞采用三次低速离心,台盼兰染色检测活率,并与Percoll梯度离心纯化法进行比较.结果大鼠肝细胞经低速离心后,活率仅（48.38±6.97）%.三次离心后再经Percoll梯度离心纯化后活率为（92.63±2.50）%,纯度〉95%,纯化前后活率比较差异有显著性（P〈0.01）.结论该方法要求设备简单、容易操作,细胞产量、活率及纯度高.     

初治Ⅳ期乳腺癌患者外科治疗对生存影响的meta分析

目的探讨Ⅳ期乳腺癌患者原发肿瘤的切除是否可以改善其总体生存情况。方法全面检索PubMed、Medline、Cochrane Library、Embase、中国知网、万方、CBM、维普等数据库中关于Ⅳ期乳腺癌治疗的相关文献,由两名作者独立筛选文献并提取数据(包括总生存期和无进展生存期及肿瘤特征)后,采用RevMan 5.3及SPSS 21.0统计软件对数据进行meta分析。结果本研究共纳入21篇文献,其中回顾性队列研究17篇,随机对照试验研究4篇。共纳入5250例Ⅳ期乳腺癌患者,其中接受局部肿瘤手术切除+全身治疗2686例(手术组),仅接受全身治疗2564例(非手术组)。meta分析结果显示,手术组的总生存期明显优于非手术组[HR=0.64,95%CI(0.59,0.69),P<0.00001];亚组分析结果显示,非RCT研究中手术组的总生存期明显优于非手术组[HR=0.60,95%CI(0.55,0.65),P<0.00001],但RCT研究中未发现2组的总生存期比较差异有统计学意义[HR=0.89,95%CI(0.73,1.09),P=0.27]。2组间无进展生存期比较差异无统计学意义[HR=0.43,95%CI(0.17,1.11),P=0.08]。进一步对2组患者的临床病理特征进行了分析发现,与非手术组比较,手术组患者呈现的特点是更年轻(P<0.05),T2分期及以下、存在骨转移、ER阴性、接受放疗、转移数目<3枚患者的比例更高(P<0.05)。结论适当选择初治Ⅳ期乳腺癌患者采用局部切除手术可以改善其总体生存情况,应进行个体化治疗。     

山东产黄芪中黄芪多糖和黄芪甲苷的含量测定

目的:测定黄芪中黄芪多糖和黄芪甲苷的含量。方法:用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法和紫外分光光度法进行含量测定。结果:山东文登和新泰黄芪基地所产黄芪的黄芪多糖含量分别为8.62%和14.15%,黄芪甲苷含量分别为0.085%和0.081%。黄芪多糖和黄芪甲苷的平均回收率分别为98.66%和102.36%,相对标准偏差分别为2.89%和1.16%。结论:本文建立的方法准确可靠、灵敏度高、重现性好,可用于黄芪多糖和黄芪甲苷的含量测定。     

一罕见成骨不全Ⅳ型的基因诊断

目的对一疑似成骨不全Ⅳ型或其他类型的患儿实施基因诊断,以揭示患儿发病及频繁骨折的内在原因,为今后实施对症治疗和产前基因诊断创造必要的前提条件。方法对经症状、体征观察和X线检查初诊为成骨不全Ⅳ型或其他类型的患儿,在抽取外周血制备DNA模板后,采用PCR、DNA直接测序法,对患儿的COL1A1基因进行突变检测,然后对所发现的突变进行分析和鉴定。结果在COL1A1基因的编码区内发现一典型的错义突变(c.823G>C1/p.G275R),经查HGMD数据库证实为成骨不全Ⅳ型的致病性突变。结论先证者为一罕见的成骨不全Ⅳ型患儿,所发现的p.G275R突变为中国人群首次报道的病理性突变。     

HPLC-ELSD法对肺痨片中黄芪甲苷的含量测定

目的:研究测定黄芪甲苷的方法,以测定肺痨片中黄芪甲苷的含量,制定肺痨片质量标准。方法:采用HPLC-ELSD法测定肺痨片制剂中的黄芪甲苷。结果:黄芪甲苷在39.5~237.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,精密度高,稳定性好,平均回收率为99.6%。结论:所研究的方法能较好地测出肺痨片中黄芪甲苷的含量,并可用以控制肺痨片的质量。     

大鼠液压脑损伤后早期脑微血管基底膜成分改变及MMP-9表达的实验研究

目的研究大鼠液压脑损伤后早期脑微血管基底膜成分的改变及MMP-9的表达并探讨其临床意义。方法成年健康SD雄性大鼠64只，以侧位液压冲击法建立大鼠脑损伤模型（8只），随机平均分为正常对照组（8只）、假手术组（8只）及颅脑损伤后3h、6h、12h、24h、48h、72h亚组（每亚组8只）。应用光镜、透射电镜及免疫组化法观察大鼠脑损伤后不同时间点脑微血管结构、Ⅳ型胶原及MMP-9表达。结果颅脑损伤后脑微血管外细胞间质水肿，基底膜节段性溶解、缺损，有红细胞漏出；脑微血管基底膜Ⅳ型胶原明显减少；MMP-9的表达逐渐增强。结论液压脑损伤后脑微血管基底膜缺失是导致继发性脑水肿及脑缺血的主要病理基础，而脑微血管壁和管外间质MMP-9高表达可能是引起微血管损害的主要机制之一。     

血清抗肽酰基精氨酸脱亚胺酶4抗体与类风湿关节炎的相关性探讨

目的分析类风湿关节炎患者血清中抗肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)抗体水平,探讨其对类风湿关节炎的诊断和评估意义。方法采用酶联免疫吸附实验检测类风湿关节炎患者组(96例)、非类风湿关节炎患者组(170例)及健康对照组(45例)血清中抗PADI4抗体水平,分析该指标在三组间的差异及其与RA患者临床指标、相关实验室指标及肺间质纤维化、双手关节X线分期等指标的关系。结果①RA患者血清中抗PADI4抗体的平均浓度为10.91U.L-1,阳性率为42.7%,均高于非RA患者组和健康对照组(P<0.05)。②相关性分析显示抗PADI4抗体水平与抗CCP抗体、RF、AKA明显相关(P<0.05)。③抗PADI4抗体阳性组ESR、CRP、IgG、IgA、IgM、C3、C4水平、DAS28评分、肺间质改变发生率、X线Ⅲ～Ⅳ期改变均明显高于抗PADI4抗体阴性组(P<0.05)。④RA患者高活动组血清抗PADI4抗体水平与非(低)活动组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗PADI4抗体是一种新的对RA有诊断价值的血清学指标,并且与疾病活动及病情严重程度相关,可能有助于RF、抗CCP抗体、AKA阴性RA的诊断。     

全髋关节置换术治疗成人CroweⅣ型髋关节发育不良疗效分析

目的探讨人工全髋关节置换术治疗成人CroweⅣ型髋关节发育不良的临床效果。方法对14例（20髋）成人CroweⅣ型髋关节发育不良患者行人工全髋关节置换术,其中男4例,女10例,平均年龄45.6岁。患肢短缩平均（4.88±0.95）cm,以术前、术后Harris评分和放射学检查评价疗效。结果14例均得到随访,随访时间平均23个月（8个月-4年）。下肢延长平均（4.46±0.94）cm,术前Harris评分平均（37.50±6.96）分,术后（88.31±6.77）分（P〈0.05）。1例出现坐骨神经损伤,对症治疗5-6个月后完全恢复。结论人工全髋关节置换术治疗成人CroweⅣ型髋关节发育不良是安全、有效的手术方法。     

基于苯硼酸双羟基识别的竞争反应对黄芪甲苷的特异性检测研究

目的创新性地提出一种可高灵敏、高选择性定量检测中药材中黄芪甲苷的新方法。方法将氨基苯硼酸共价吸附到多孔硅胶中,制备得到苯硼酸功能化的分子印迹材料。该印迹材料中的双羟基基团能与黄芪甲苷分子结构中的双羟基发生特异性识别。采用紫外分光光度法为检测手段,以茜素红（ARS）为光度指示剂,利用ARS与黄芪甲苷之间的双羟基竞争反应,观察加入不同浓度的黄芪甲苷后所引起可见光区吸光度的变化,达到高灵敏定量分析黄芪甲苷的目的。结果在510 nm处,溶液吸光度响应值的变化与黄芪甲苷的浓度在1×10^-6-6.4×10^-4mol/L内呈现良好的线性关系,线性回归系数为0.9929,检出限为0.3×10^-6 mol/L。结论本方法结果可信,重复性较好,可用于中药材中黄芪甲苷的定量分析。