Anencephaly: MRI findings and pathogenetic theories

We describe the MRI appearances of an anencephalic newborn who survived for 13 h; particularities of this case are male gender and the absence of other associated malformations. Moreover, we discuss the pathogenetic theories of anencephaly, correlating MRI findings with embryological data. An exencephaly–anencephaly sequence due to amnion rupture is hypothesized.Presented as a poster at the 25th Congress of the European Society of Neuroradiology, Vienna, 7–11 September 1999.     

Intrauterine membranes: Sonographic findings and clinical significance

We have identified six cases of chorioamniotic separation, three diagnosed in the third trimester and three cases seen in early pregnancy, at or prior to 16 wk' gestation. The sonographic findings consist of a fine mobile echodense line separated from the chorion and uterine wall by a lucent space. The membrane may completely surround the fetus and may extend over the fetal surface of the placenta, in which case the chorion may be identified as a separate echo. Two patients with chorioamniotic separation in the third trimester had polyhydramnios. The infants had no manifestations of amniotic band syndrome. The membranes seen in four other conditions are described and compared with chorioamniotic separation.     

羊膜细胞移植对帕金森病鼠纹状体中多巴胺神经元的促再生作用

目的：探讨羊膜细胞移植治疗帕金森病（PD）的作用机制。方法：通过6－羟基多巴胺（6－OHAD）立体定向注射破坏－侧黑质,制成PD大鼠模型,然后将鼠成活羊膜细胞悬液植入受损侧纹状体,并与死羊膜细胞移植及生理盐水假移植对照,结果：活羊膜细胞移植可减少大鼠的异常旋转行为,尤其有意义的是在活羊膜细胞移植靶点周围出现了来源于宿主的酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经纤维,结论：活羊膜细胞移植能够增加PD鼠纹状体中多巴胺（DA）神经纤维的数目,到底是纹状体残存多巴胺神经元的再生,还是羊膜细胞分泌的营养因子激活了脑的内神经干细胞的生长还有待进一步研究。     

羊膜腔输液及羊水置换治疗妊娠晚期羊水过少临床研究

将126例妊娠晚期羊水过少患者随机分为两组,治疗组经腹羊膜腔穿刺输液或经宫颈羊膜腔输液(AI),并记录输液量及输液后羊膜腔容积与胎儿情况.对照组给予吸氧、输液等一般宫内复苏方法.结果显示,治疗组在B超引导下行AI,其中8例羊水粘稠者行羊水置换,症状改善97.06%;对照组症状改善仅10.34%,两组差异有显著性(P＜0.01).治疗组剖宫产率13.24%,新生儿窒息率14.71%;对照组分别为51.72%、46.55%,明显高于治疗组(P均＜0.01).对照组新生儿胎粪吸入6例,新生儿死亡2例,畸形儿4例,而治疗组无1例发生.两组产褥病率比较无显著性(P＞0.05).认为对妊娠末期羊水过少患者进行AI或羊水置换,降低了新生儿病率及剖宫产率,是减少围产期母婴病率的有效方法.     

体外人羊膜培养兔角膜缘上皮细胞的细胞形态与连接复合体形成的研究

目的观察体外人羊膜上培养出的兔角膜缘上皮细胞形态特征及与羊膜基底膜连接复合体的形成。方法将15只新西兰白兔角膜缘组织（2mm×2mm）,于37℃ 5％ CO2孵箱中用1．2U／ml裂解酶Ⅱ处理20min,之后在人羊膜上皮面先行浸液培养2周,后行气-液培养2周。于培养期间,每周定期进行透射电镜检查,以观察连接复合体的形成过程,培养至第4周后,采用AE5免疫组织化学、高碘酸．希夫、苏木精-伊红等染色方法鉴定分化的上皮细胞,鉴别杯状细胞,观察细胞的形态特征。结果兔角膜缘上皮细胞体外培养10—14d可充满人羊膜面,对AE5免疫组织化学方法染色分化出的上皮细胞均呈阳性而高碘酸．希夫染色均呈阴性。苏木精-伊红染色显示从兔角膜缘上皮细胞分化出的上皮细胞与正常兔角膜上皮细胞相比无明显差异;自培养至第14天均未见与羊膜基底膜的连接复合体形成;于第21天时仅观察到初始阶段的连接复合体,第28天时仍未见明显变化。结论于体外人羊膜上培养的兔角膜缘上皮细胞分化出的细胞是角膜上皮细胞,其形态与正常兔角膜上皮细胞相同,并与羊膜基底膜仅形成初始阶段的连接复合体。     

羊膜为载体的人角膜缘上皮细胞移植治疗大鼠角膜碱烧伤的研究

目的研究人角膜缘上皮细胞的生物学特性,探讨体外培养的人角膜缘上皮细胞移植进行眼表重建的临床应用价值及前景。方法体外培养人角膜缘上皮细胞,通过免疫荧光染色法和逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）法分析表型,Brdu掺入法检测慢周期（slow—cycling）细胞。建立大鼠角膜碱烧伤模型,随机分为单纯对照组、羊膜移植（AMT）组及羊膜为载体的角膜缘上皮细胞移植（LSAT）组,术后通过裂隙灯显微镜观察、角膜切片HE染色及免疫荧光染色等方法对各组大鼠眼表恢复情况进行评价。结果培养早期大多数角膜缘上皮细胞p63和K19染色阳性,仅少数细胞K3染色阳性;随培养时间的延长,K3阳性细胞增多,部分细胞同时表达p63和K3。RT—PCR示培养的角膜缘上皮细胞中p63和K12均有阳性表达,而角膜上皮细胞仅表达K12。Brdu掺入法检测到慢周期细胞。动物实验表明,LSAT可以显著减轻角膜病变,使角膜恢复完整性和透明性,眼表评分各项指标与AMT组和对照组比较差异均有统计学意义。LSAT组大鼠角膜切片染色示大部分上皮细胞抗人核和K3染色阳性。结论体外培养的人角膜缘上皮细胞中p63不仅表达于角膜缘干细胞,在短暂扩充细胞中也有一定量的表达;慢周期细胞的存在证实了培养的角膜缘上皮细胞中角膜缘干细胞的存在,p63和K19阳性、K3阴性的细胞为角膜缘干细胞;羊膜为载体的体外培养的人角膜缘上皮细胞移植可有效重建眼表,具有较高的临床应用价值与发展前景。     

体外定向诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

目的　探索体外定向诱导小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES)分化为表皮样干细胞的条件 ,为胚胎干细胞来源的表皮样干细胞的临床应用 ,及ES细胞的定向分化机制的研究奠定基础。　方法　采用与人羊膜共培养法对小鼠胚胎干细胞进行定向诱导。实验分 3组 :1 羊膜上皮面向上 ,铺布全孔底 ;2 羊膜上皮面向上 ,铺布半孔底 ;3 以不加羊膜组为对照。用流式细胞仪、免疫组织化学技术对分化后的细胞进行鉴定。　结果　共培养 3～ 4d后 ,在第 1、2实验组中的人羊膜上皮面上 ,小鼠ES细胞形成表皮样干细胞集落 ,表达高水平的表皮干细胞特异标志物整合素 β1 、CK19和CK15。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 、CK19和CK15阳性细胞比率均较对照组有显著差异 (P <0 0 1)。而在第 2实验组中无羊膜覆处 ,细胞贴壁生长 ,形成表皮样细胞单层 ,细胞呈多边形 ,排列紧密 ,表达整合素 β1 ,仅见少数CK19和CK15阳性细胞散布于表皮样细胞之间。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 阳性细胞率与对照组有显著差异 (P <0 0 1) ,而CK19和CK15阳性细胞率与对照组差异不明显。　结论　人羊膜可诱导小鼠胚胎干细胞向表皮样细胞定向分化 ,并提示生长在羊膜上皮面上的细胞克隆可能是表皮样干细胞 ,而贴壁生长的细胞可能是表皮样细     

羊膜联合自体角膜缘移植治疗复发性翼状胬肉

目的 :探讨羊膜联合自体角膜缘移植治疗复发性翼状胬肉或并睑球粘连的疗效。方法 :用甘油保存羊膜联合自体角膜缘移植治疗 2 0例、2 0眼复发性翼状胬肉。术后随访 6～ 18月。结果 :角膜上皮均于 10d内完全愈合 ,1例、1眼胬肉复发 ,复发率为 5 %。结论 :羊膜联合自体角膜缘移植术能有效治疗复发性翼状胬肉并睑球粘连     

羊膜移植术在严重眼部碱烧伤中的临床应用

目的 评价羊膜移植术治疗严重眼部碱烧伤的效果。方法 采用羊膜移植术治疗严重眼部碱烧伤23例29眼。结果 29眼中25眼重建成功，术后羊膜固定好，角膜局部炎症减轻，角结膜逐渐愈合。4眼术后4～10天内出现羊膜脱落、融解。结论 羊膜移植术可以使碱烧伤的角结膜创面迅速上皮化，控制角膜的进一步环死和融解，减少新生血管的形成，但对角膜水肿、浑浊严重的病例，羊膜移植术的效果欠佳。     

羊膜和牛胎膜在烧伤治疗中的应用

应用生物性敷料——羊膜和牛胎膜覆盖100例烧伤创面,86%有较好的止痛效果,95%局部渗出停止。羊膜和牛胎膜有抗感染,促进上皮生长,减少瘢痕形成等作用。同时介绍了羊膜的收集、处理、贮存与使用方法,并讨论了羊膜的生理特点。