基底细胞样乳腺癌的病理诊断

目的:探讨基底细胞样乳腺癌的病理形态特征,免疫表型、鉴别诊断及最新的研究进展。方法：观察20例基底细胞样乳腺癌的组织形态、免疫组化特点及临床资料,结合文献进行分析。结果：20例均为女性,年龄25-71,平均年龄45岁;镜下形态学特征主要包括推挤样边缘,地图样坏死,高级别核及核分裂易见。免疫组织化学结果：ER、PR、CerbB2均阴性表达,CK5/6有15例明显表达,占75%,5例弱表达,占25%,EGFR在7例病例中有表达,占35%。结论：基底细胞样乳腺癌是一种特殊类型的乳腺癌,具有独特的形态学特征及免疫表型,是一种独立亚型,应该提高对此类疾病的认识。     

胃癌患者外周血来源树突状细胞诱导培养及表型分析

目的分析胃癌患者外周血单个核细胞，经诱导培养获取树突状细胞(DC)的形态学特点及表面分子表达的特点，为基于DC的胃癌生物学治疗提供实验基础。方法胃癌患者外周血单个核细胞经GM-CSF，IL-4及TNF-α诱导培养，获取成熟DC。利用光镜、电镜观察其形态特点。利用流式细胞术检测其表面分子表达特点。结果诱导培养7d即可获取成熟DC，细胞表面出现大量典型树枝状突起；细胞表面分子表达随细胞的成熟而逐渐升高，至培养7d时逐渐趋于稳定。结论胃癌患者外周血单个核细胞经GM-CSF，IL-4及TNF-α诱导培养，可获得大量成熟DC。所获取DC具备典型形态学特点及表面分子表达特点。该研究结果可作为胃癌生物学治疗进一步研究的基础。     

内质网应激与自噬的交互作用对血管钙化的影响

目的证实内质网应激(ERS)和自噬的交互作用对血管钙化(VC)的影响。方法维生素D3肌注和尼古丁灌胃制备大鼠在体血管钙化模型,取主动脉行茜素红染色和钙含量检测,Western blot检测相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,钙化组大鼠主动脉管壁钙沉积显著增加,血管平滑肌细胞(VSMC)收缩表型标志蛋白SM-22α和Calponin表达显著降低,而成骨细胞样表型标志蛋白骨形态发生蛋白2(BMP-2)和Runt相关转录因子2(RUNX2)表达显著升高,ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)以及自噬标志蛋白轻链3(LC3Ⅱ)和Beclin-1表达显著升高。钙化大鼠应用ERS激动剂衣霉素[10μg/(kg·d)]可进一步增加血管壁钙沉积及BMP-2和RUNX2表达水平,而SM-22α和Calponin表达进一步减少,GRP78和CHOP以及LC3Ⅱ和Beclin-1表达水平进一步增加。钙化大鼠应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤[10 mg/(kg·d)]可降低LC3Ⅱ和Beclin-1水平,同时GRP78和CHOP表达升高,增加血管壁钙沉积及BMP-2和RUNX2表达水平,降低SM-22α和Calponin表达。结论内质网应激与自噬的交互作用影响血管钙化的发展。     

BRAF基因与结肠癌的关系及临床意义

近年研究发现畸形隐窝灶-增生性息肉-锯齿状腺瘤-癌序列是结肠癌形成的另一条重要途径,它由RAS-RAF-MEK-ERK信号传导通路调控,BRAF基因是该通路重要的调节因子.微卫星稳定性、CpG岛甲基化表型与BRAF基因突变、结肠癌发生部位、结肠癌的类型及患者的性别等因素有关.     

维持性透析患者高脂蛋白(a)水平影响因素探讨

目的探讨血液透析患者脂蛋白（a）[Lp（a）]代谢紊乱机制,为寻找有效控制Lp（a）紊乱的方法提供理论基础。方法采用高分辨SDS-琼脂糖凝胶电泳联合免疫印迹法检测66例维持性血液透析（MHD）患者、51例终末期肾病（ESRD）患者和62例健康对照apo（a）表型,监测常见的影响Lp（a）水平的网素指标,统计分析并找出与维持性透析患者高Lp（a）水平密切相关的因素。结果LWM表型中,MHD组与ESRD组Lp（a）中位数浓度差异无统计学意义（P〉0．05）,但显著高于健康对照组（P〈0．05）。与健康对照组相比,MHD组、ESRD组相天指标肌酐（Crea）、清蛋白（Alb）、血红蛋白（Hb）、C反应蛋白（CRP）、胱抑素（CysC）检测结果差异均具有统计学意义（P〈0．05）。MHD组与ESRD组相比,Crea、CRP、CysC结果差异有统计学意义（P〈o．05）。LWM表型患者Lp（a）浓度与Alb、CysC存在相关性（P〈0．05）;HWM表型中与Lp（a）浓度相关的指标则是CRP和CysC（P〈0．01）。但就MHD组总体来讲,Lp（a）浓度与Alb和CysC结果相关（P〈0．01）。回归分析表明,就MHD组总体而言,apo（a）表型、Alb、CysC进入了回归方程,确定系数（r^2）为0．348,其中apo（a）表型对应的r^2为0．121,CysC埘应的,上为0．178,Alb埘应的r^2为0．049。结论导致维持性血液透析患者高Lp（a）水平的机制是多种因素共同作用的结果,而且不同表型的Lp（a）升高原因存在差异,临床上可考虑针对不同表型采取不同措施,以达到更好的治疗效果。     

Snail1外源性过表达诱导HepG2细胞上皮间叶样表型转化的实验研究

目的探讨Snail1蛋白诱导肝癌细胞发生上皮间叶表型转化并增强其侵袭转移能力的效应。方法利用重组腺病毒载体pAdEasy-SNAI1高效感染HepG2肝癌细胞株,诱导外源性Snail1蛋白过表达,以空载腺病毒pAdEasy-GFP作为对照。利用RT-PCR、Western blot和细胞免疫组织化学的方法,检测转染后HepG2细胞Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的mRNA转录和蛋白表达水平。随机运动实验及侵袭实验检测HepG2细胞转染目的基因后运动侵袭能力的改变。结果①pAdEasy-SNAI1高效感染HepG2细胞,与对照组相比SNAI1mRNA和Snail1蛋白表达均显著增强(分别为1.591±0.090、0.414±0.031,0.995±0.009、0.423±0.002,P<0.01),Snai1蛋白在胞浆和胞核着色明显强化。②实验组HepG2细胞,在mRNA和蛋白水平E-cadherin表达均显著受到抑制(分别为0.528±0.037、1.668±0.065,0.284±0.003、1.067±0.011,P<0.01),N-cadhrein、Vimentin表达则明显上调(N-cadhrein:0.945±0.029、0.600±0.015,0.655±0.007、0.226±0.007,P<0.01;Vimentin:1.630±0.123、0.291±0.024,0.692±0.009、0.219±0.005,P<0.01);③实验组随机运动实验中各观察时相点细胞空白区均小于对照组;侵袭实验中,实验组穿膜细胞数多于对照组(59.4±7.48、23.9±4.15,P<0.01)。结论外源性Snail1蛋白过表达能诱导HepG2细胞出现EMT样变化,细胞运动、侵袭能力增强。     

人巨细胞病毒临床分离株对更昔洛韦耐药的表型分析

目的检测分析人巨细胞病毒（HCMV）临床分离株的更昔洛韦（GCV）耐药表型。方法收集临床接受GCV治疗过的各类移植受体的血液或尿液标本以及婴幼儿HCMV感染症患儿的尿液标本,分离HCMV。然后通过噬斑减少试验测试其对GCV药物的耐受性。病毒株对GCV的耐受性程度表示以不加药物孔中病毒致细胞病变效应（CPE）为参照,能够抑制50％CPE的药物浓度（IC50）为GCV的耐受性。GCV敏感型毒株的IC50为≤5．000μmol／L。结果以标本接种人胚肺成纤维细胞（MRC-5）,最终获得病毒株共33株。其中6株来自移植受体,27株来自婴幼儿HCMV感染症患儿。以MRC-5为敏感细胞,调整所测病毒浓度为100×50％组织培养感染量（TCID50）,并加入不同浓度的GCV药物,检测发现32株GCV的IC50均≤5．000μmol／L（1．500～5．000μmol／L）,只有1株GCVIC50为12．500μmoL／L。同步平行检测的标准毒株HCMVAD169的GCVIC50为1．500μmol／L。结论药物耐受表型测定能够了解并评估病毒对GCV药物的敏感与否,但全过程周期较长,技术要求比较高,尤其必须以获得活病毒为前提,尚难以直接推向临床实验室。     

铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶分布及产金属酶检测方法比较

目的通过不同地区铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的分析,了解其分布,并比较几种金属酶表型检测的方法。方法收集国内16个城市28家医院临床分离的658株铜绿假单胞菌。采用E-test法检测其对亚胺培南（IPM）及美罗培南（MRP）的耐药性。对筛选出的353株耐碳青霉烯类抗菌药物的铜绿假单胞菌采取双纸片协同试验、IPM乙/二胺四乙酸（EDTA）组合纸片试验、E-test法（IPM/EDTA）进行金属酶表型筛选,并采用聚合酶链反应（PCR）及克隆测序明确金属酶基因型。结果PCR金属酶基因型检测结果显示,8株菌株金属酶阳性,其中4株金属酶基因型为VIM-2,另外4株为IMP-9。与基因型检测结果比较,上述3种检测金属酶的方法敏感性均为100.0%,E-test法和组合纸片法（以直径之差≥6 mm为标准）的特异性均为100.0%,组合纸片法（以直径之差≥4 mm为标准）的特异性为99.4%,双纸片协同试验的特异性为91.3%-95.9%不等。结论组合纸片法（IPM/EDTA,以直径之差≥6 mm为标准）是相对方便、快捷、适于临床广泛应用的金属酶表型检测的方法。     

慢性应激动脉粥样硬化载脂蛋白E基因敲除小鼠内脏若干免疫炎症因子的表达变化

血脂异常为动脉粥样硬化(As)的主要危险因素之一,磷脂转运蛋白(PLTP)在血脂代谢中发挥重要作用,尤其可影响高密度脂蛋白(HDL)的代谢。我们的前期研究发现PLTP缺乏可抑制公认的三个As模型鼠的主动脉斑块形成,其作用机制与减少富有载脂蛋白B的脂蛋白颗粒的合成与分泌,并增强脂蛋白的抗氧化能力等有关。新近的实验发现PLTP缺陷鼠HDL的抗炎作用增强,但因为使用的小鼠模型天生缺乏参与人脂蛋白代谢的重要成分胆固醇酯转运蛋白(CETP),....     

炎症性肠病基因型与临床表型的研究进展

炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一组病因未明的慢性肠道疾病。根据炎症特征和病变部位不同,主要被分为克罗恩病（Crohn’s disease,CD）、溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）以及未定型结肠炎（indeterminate colitis,IC）。西方国家IBD发病率约为5～20／10^5;既往亚洲国家发病相对较低,但近20年来IBD报道异常增多,呈明显上升趋势。