大鼠脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体关系

目的：探讨脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的关系。方法：成年SD大鼠32只了随机分为4组（每组8只）：A组（正常组）、B组（脾虚组）、C组（治疗组）、D组（自复组）。采用放射配基分析法,测定各组大鼠血清T3、T4、FT3、FT4、 γ－T3 及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的含量。结果：B、D组大鼠血清T3、T4、FT3、FT4含量均较A、C组低,有显差异（P＜0.05或P＜0.01）;各且间血清γ－T3 含量无显性差异;B、D组下丘脑、胸腺细胞T3受体含量较A、C组低,有显差异（P＜0.01）。结论：血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的水平降低,可导致甲状腺激素生物效应低下,经由神经内分泌免疫调节环路,削弱免疫功能,这可能是脾虚证的一种重要病机。     

首例中国株乙型肝炎病毒D基因型全序列测定及分析

目的：测定并分析1例中国慢性无症状携带者感染的乙型肝炎病毒（HBV）D基因型的全基因序列。方法：用聚合酶链式反应（PCR）扩增HBV全基因,将PCR产物克隆后对其进行核酸序列分析并与已发表的HBV毒株全列进行同源性比较;对GenBank中已发表的30株HBVD基因型毒株的全序列进行系统进行树分析。结果：该病毒全基因长3182bp,为ayw3亚型,D基因型,此毒株全基因GenBanK Accession No为AF280817,与GenBank中已发表的HBV D基因型全序列同源性为98．3％－94．5％,与已发表的A,B,C,E,F和G基因全序列同源性均小于89．5％,结论：首例中国株HBVD基因型全序列与源于瑞典的四株HBV D基因型全基因的进化距离最近。     

N—甲基—D—天门冬氨酸和非N—甲基—D—天门冬氨酸类受体在新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电中的作用

目的：探讨N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的作用。方法：在新生SD大鼠离体延髓脑片上记录舌下神经的呼吸节律性放电活动,在改良的Krebs液中加入兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂,观察其RRDA的影响。结果：使用非NMDA受体激动剂海人酸（Kainic acid,KA)后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长,NMDA受体激动剂对呼吸活动则没有明显影响（P＞0.1);相应的拮抗剂6-氰基-7-硝基喹恶啉土卫四（6,7-dinitroquinoxaline-2,3-dione,DNQX)和2-氨基磷酸戊酸（D-2-amino-5-phosphonopentanoic,AP5)均可使放电频率和积分幅值明显降低吸气时间显著缩短（P＜0.01),DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短（P＜0.05)。结论：在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用。     

N—甲基—D—门冬氨酸2B受体mRNA在纹状体边缘区的表达

目的 通过研究N－甲基－D－门冬氨酸（N-methyl-D-asparate,NMDA)2B受体是否在纹状体边缘区表达,从而在基因分子方面确定边缘区在学习记忆过程中的作用。方法 用地高辛标记多相探针方法,原位检测大鼠纹状体边缘区内NMDA2B受体表达。结果 原位杂交结果发现NMDA2B 受体mRNA阳性信号在纹状体内分布不均匀,主要见于尾壳核,在尾壳核和苍白球间的边缘区部位可见中等大小梭形神经元,呈密集的带状分布,而苍白球只有少量的阳性胞体。结论 大鼠纹状体边缘区可以合成NMDA2B受体,推测边缘区的学习记忆功能与NMDA受体有关。     

中药复方降酶合剂对大鼠肝脏细胞因子调节的实验研究

目的：研究中药复方制剂降酶合剂对D-氨基半乳糖所致动物急性肝损伤的保护作用,和对内毒素（LPS）刺激后肝枯否细胞（KC）分泌IL-6、IL-8和TNF-α的调节作用。方法：复制大鼠D-氨基半乳糖致急性肝损伤模型,制备SD大鼠降酶合剂和联苯双酯的含药血清,以LPS和含药血清刺激SD大鼠体外培养KC,采用ELISA夹心法检测IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果：D-氨基半服糖所致急性肝损伤模型转氨酶和细胞因子分泌水平明显增高,中药降酶合剂可以降低转氨酶和调节细胞因子分泌水平。培养细胞在加入LPS刺激后,上清中IL-6、IL-8和TNF-α浓度明显高于对照组（P＜0.01)。而在加入降酶合剂后,上清中的IL-6、IL-8和TNF-α水平明显下降（P＜0.01)。结论：降酶合剂降低ALT的作用可能与其通过对机体免疫功能的调节,降低IL-6、IL-8和TNF-α等细胞因子的产生有着密切的关系。     

基因步移在分离蚊虫细胞色素P450启动子中的应用及意义

目的：快速扩增出白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6N3基因（CYP6N3）上游启动子区序列。方法：根据本室已获得的白纹伊蚊CYP6N亚家族新成员CYP6N3全长cDNA的5′－末端核苷酸序列,设计2个反向特异引物（GSP1和GSP2）,利用4种限制性内切酶Dra I、EcoRV、PvuⅡ和Stu I分别消化白纹伊蚊溴氰酯抗性株高分子量基因组DNA,消化产物与适配子连接产生4种消化的DNA库（DL1、DL2、DL3及DL40,并分别以此为模板,进行基因步移。用特异引物GSP1与适配子引物AP1进行第1步PCR扩增,然后再以第1步PCR产物为模板、用内部特异引物GSP2与内部适配子引物AP2进行第2次PCR扩增。结果：第1步PCR结果显示：在上述4种消化文库中分别扩增出约806、2190、2206和3076bp的特异条带;第2步PCR结果与第1次PCR相类似,但各泳道主带扩增效率明显升高。结论：本实验已成功地获得了白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6N3上游启动子区核苷酸序列及其4种限制性内切酶图谱。此外还对基因步移法是在昆虫细胞色素P450多样性及其参与杀虫剂抗性分子机理研究中的意义进行了讨论。     

脂质体介导下重组pcDNA3-hBMP3转染兔关节软骨细胞的条件

目的　探讨基因转移效率与 pc DNA3- h BMP3质粒及阳离子脂质体的浓度、转染时机以及细胞的种殖密度等因素的关系 ,以寻求最佳的基因转染条件 .方法　细胞密度按 2× 10 4· cm- 2 接种后 ,对细胞接种后即时、孵化 2 ,5和 7d进行转染效率研究 ;G418浓度每 m L DMEM分别含有 2 0 0 ,30 0 ,40 0 ,5 0 0和 6 0 0μg,探讨 G418对软骨细胞的杀伤作用 ;选择不同细胞接种密度、不同脂质体浓度和 pc DNA3- BMP3浓度 ,在细胞对数生长期且细胞融合至 70 %～ 80 %时开始做转染 ,各组软骨细胞爬片的原位杂交结果通过计算机图像分析 ,以其灰度值判定基因转染的效率 .结果　最佳期的转染时机为软骨细胞接种后在孵箱内放置 2 d转染 ,即在软骨细胞对数生长期内做转染 .G418对软骨细胞的最佳筛选浓度为 40 0 mg· L- 1 .最佳的细胞种植密度、pc DNA3- BMP3浓度和脂质体的量应分别为 2× 10 4· cm- 2 ,5 μL 和 10 μL.结论　通过本研究探索出脂质体介导下 pc DNA 3- BMP3转染兔关节软骨细胞的最佳条件 .     

1—（9H—卟唑—4—氧）—3—取代氨基—2—丙醇类化合物的合成及生物活性（Ⅰ）

目的：寻找有-β－受体阻滞活性,且高效低毒的化合物。方法：以β－受体阻滞剂咔唑洛尔为先导化合物,根据药物设计中的结构拼合原理,对其内醇胺侧链进行结构修饰,设计并合成了10个1－（9H－卟唑－4－氧）－3－取代氨基－2－丙醇类化合物V1－V10。结果和结论：所合成的目的物均未见文献报道,结构经红外光谱、核磁共振氢谱、质谱、元素分析或高分辨质谱确证。初步药理筛选结果显示,10个化合物均能够不同程度地拮抗异丙肾上腺素引起的心支过速,其中化合物V1、V3、V4的活性与先导化合物相似。     

预真空灭菌器B-D试验失败的原因与处理方法

Ｂ-Ｄ试验全称叫布维 狄克试验 (Ｂｏｗｅｎ Ｄｉｃｋｔｅｓｔ) ,是专用于预真空压力蒸汽灭菌器空气排除效果的检测方法[1 ] 。它是灭菌前或检修完毕后必须进行的灭菌器空锅灭菌测试工作。Ｂ Ｄ试验失败表现在指示图上的异常颜色变化有以下 4种情况 :①四周为标准的褐色或黑色 ,中间部分有 4～ 1 0ｃｍ2 明显未变色。②中间部位变色比外部淡 ,呈由外到内逐渐变淡的现象。③变色不均匀 ,也无规律。④褐色或黑色的条纹上呈现条状或块状白色斑块 ,边缘较模糊。现就Ｂ Ｄ试验失败的原因及处理方法分析如下。1　材料和方法　　山东新华医疗器械厂…     

3T3—L1脂肪细胞中高糖诱导胰岛素抵抗的分子机制

We investigated the cellular effect of high glucose using 3T3-L1 adipocytes on glucose transport activity, the expression of insulin signaling proteins and IRS1 tyrosine phosphorylation. Results showed that adipocytes treated with different high glucose (10, 15 and 25 mmol.L-1) for 24 hours showed to impair the basal and insulin-induced increase in glucose uptake in a dose-dependent manner and decreased significantly IRS1 tyrosine phosphorylation. High concentration of glucose produced opposite effects on IRS1 and IRS2: down-regulated IRS1 protein expression level and tightly up-regulated IRS2 contents. p85 and PKB were unaffected. Chronic exposure to high glucose can inhibit glucose uptake and induce insulin resistance. The mechanism may be involved in affecting the expression of insulin signaling peptides and tyrosine phosphorylation.