氯喹通过上调泛素-蛋白酶体相关分子表达抑制LPS活化巨噬细胞的实验研究

目的 观察氯喹(chloroquine,CQ)对脂多糖/内毒素(lipopolysaccharide/endotoxin,LPS)刺激的巨噬细胞中泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)相关分子A20、TRIM33和USP28表达的影响.方法 应用LPS刺激小鼠Raw264.7细胞,荧光定量PCR检测酸化抑制剂CQ对LPS诱导锌指蛋白A20、泛素连接酶TRIM33和泛素特异性蛋白酶USP28的mRNA表达,Western blot检测CQ对LPS诱导A20和TRIM33的蛋白表达.应用siRNA转染技术沉默A20,荧光定量PCR检测CQ对LPS诱导炎性细胞因子TNF的mRNA表达.结果 与LPS对照组比较,经CQ预处理的Raw264.7细胞中,A20、TRIM33、USP28的mRNA表达均显著上调[(3.197 ±0.013) vs (1.292 ±0.009),(1.627±0.113)vs(0.797±0.083),(1.387±0.144)vs(0.742±0.061),P＜0.05],A20和TRIM33的蛋白表达也同样上调.采用siRNA干扰A20基因表达,则CQ预处理组细胞中LPS诱导的TNF-α mRNA表达显著上调[(7.650 ±0.113) vs (4.145±0.120),P＜0.01].结论 CQ可显著上调LPS活化的巨噬细胞中泛素化相关分子A20、TRIM33和USP28的表达,而干扰A20基因表达可显著上调LPS活化Raw264.7细胞中TNF-α的mRNA表达,提示泛素-蛋白酶体系统及其相关分子参与CQ抑制LPS-TLR4信号通路的活化.     

电针对血管性痴呆大鼠学习记忆和血红素氧化酶的影响

[目的]探讨电针对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆障碍的治疗效应及其作用的分子机制.[方法]SD雄性大鼠60只,除假手术组10只外,其他大鼠均采用4-血管阻断法复制VD模型,存活大鼠随机分为电针组14只,尼莫通组13只,模型组13只;电针组针刺“百会”和“大椎”两穴,尼莫通组以12 mg/kg灌胃给药,假手术组与模型组未予任何治疗.采用Morris水迷宫观察治疗20d后各组大鼠在学习记忆方面的变化,并检测血红素氧化酶（HO）的蛋白表达和信使核糖核酸（mRNA）表达.[结果]与假手术组比较,模型组逃避潜伏期、HO-1蛋白表达、HO-1 mRNA表达增高（P＜0.01）;与模型组比较,电针组、尼莫通组逃避潜伏期、HO-1蛋白表达均显著减少（P＜0.01）,H0-1 mRNA表达水平均降低（P＜0.05）;电针组与尼莫通组比较,各指标均无显著性差异（P＞0.05）.[结论]电针治疗改善VD模型大鼠学习记忆能力与尼莫通治疗相仿,两法均可能与减少海马和皮质神经元细胞HO-1蛋白表达及H0-1 mRNA表达有关.     

20（S）-原人参三醇及其ocotillol型差向异构体代谢物的排泄

目的：考察20（S）-原人参三醇（PPT）及其ocotillol型差向异构体代谢物（简称为M1、M2）在尿液、粪便中的排泄情况和两代谢物在胆汁中的排泄情况。方法采用LC-MS/MS法分别测定大鼠尿液、粪便样品和其经葡萄糖醛酸酶水解后PPT、M1和M2的浓度,以及大鼠胆汁样品和其经葡萄糖醛酸酶水解后M1和M2的浓度。结果灌胃给予PPT后72 h,PPT、M1和M2的粪便累积排泄量分别为给药剂量的14.88%、1.34%和0.084%,经酶水解后,其累积排泄量分别为14.77%、1.36%和0.085%,它们基本不经尿排泄;灌胃给予M1或M2后72 h粪便累积排泄量分别为给药剂量的4.41%、47.20%,基本不经尿排泄。灌胃给予M1或M2后36 h胆汁累积排泄量分别为给药剂量的3.01%和0.068%,静注给药M1、M2后36 h,其胆汁累积排泄量分别为给药剂量的8.80%、1.24%。结论灌胃给予PPT后,PPT及其代谢物M1、M2少量经粪便排泄,基本不经尿排泄;M1和M2在大鼠的胆汁排泄具有立体选择性差异。     

神经酰胺参与II型CD20抗体诱导的细胞程序性死亡

目的：探讨II型CD20抗体诱导靶细胞程序性死亡的机制,为制备具有较强肿瘤杀伤能力的新型CD20抗体提供理论依据。方法：将淋巴瘤细胞Raji分别与 I型CD20抗体利妥昔单抗(Rituximab)和II型CD20抗体托西莫单抗(Tositumomab)孵育后,采用磷脂酰丝氨酸V(annexin V)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染,流式细胞仪比较两种抗体处理后程序性死亡细胞所占比例;在CD20抗体处理前,用工作浓度的caspase抑制剂Z-VAD-FMK (carbobenzoxy-valyl-alanyl-aspartyl-[O-methyl]-fluoromethylketone)或伏马毒素(fumonisin B1,FB1)预处理Raji细胞,并采用流式细胞仪比较预处理组与未预处理组淋巴瘤细胞程序性死亡所占的比例。收集CD20抗体处理过的Raji细胞,应用高效液相色谱法检测不同的CD20抗体处理组间淋巴瘤细胞内神经酰胺(ceramide)的水平,并用相同方法检测FB1对Tositumomab引起淋巴瘤细胞内ceramide水平变化的抑制作用。用不同浓度的C2-ceramide与淋巴瘤细胞进行孵育,16h后用annexin V & PI双染检测其诱导靶细胞程序性死亡的能力。结果：10 µg/mL的I型抗体Rituximab几乎不能诱导Raji细胞的程序性死亡,而相同浓度的II型CD20抗体Tositumomab能够诱导(28.6±4.2)%的Raji细胞产生程序性死亡,两者差异有统计学意义(t=26.48,P<0.01),这种程序性死亡不能被caspase抑制剂Z-VAD-FMK所抑制(F=3.01,P>0.05)。Tositumomab处理后能够引起Raji细胞内ceramide水平的升高(t=28.48,P<0.01),且5~40 µmol/L的C2-ceramide能够通过剂量依赖性的关系诱导Raji细胞的程序性死亡(F=2.71,P>0.05)。Ceramide合成的FB1可以显著抑制Tositumomab引起的Raji细胞内ceramide水平的升高(F=20.18,P<0.01),进而显著抑制Tositumomab介导的程序性死亡(F=17.02,P<0.01)。结论：II型CD20抗体Tositumomab而非I型CD20抗体Rituximab可以通过介导靶细胞内ceramide水平的升高,诱导靶细胞的程序性死亡,这种程序性死亡与经典的caspase通路无关。     

妇幼保健机构开展胎儿系统产前超声筛查的临床意义

目的：探讨开展胎儿系统超声产前筛查的重要性。方法应用西门子S-2000彩色多普勒超声诊断仪及VOLUOSENE 8、E6彩色多普勒超声诊断仪对孕20~26周1825例孕妇进行系统超声产前筛查。结果胎儿发育异常38例,畸形发生率占2%（38/1825）。产前超声诊断、经引产或出生后证实的胎儿畸形病例共在我院住院引产29例,外院追踪符合病例9例,漏诊1例（晚孕时发现手指缺陷）,诊断符合率为98%（38/39）。结论超声产前系统筛查有效降低了畸形儿的出生率,对临床有重要指导意义。     

皮肤深层减张缝合研究进展

目的总结皮肤深层减张缝合的研究进展，为深刻理解和改良深层减张缝合方法提供系统性资料。方法广泛查阅国内外皮肤深层减张缝合的相关文献，总结各种方法的特点及临床应用。结果皮肤深层减张缝合主要包括垂直褥式缝合及其改良缝合技术、水平褥式缝合及其改良缝合技术，以及一些特殊缝合技术，每种缝合技术都有其特点而适用于不同张力及形状的切口。结论外科医生应根据切口位置、张力大小等因素选择相应的深层减张缝合技术，对切口进行充分减张，以实现切口良好愈合，预防瘢痕增生。     

A novel mutation of LIM2 causes autosomal dominant membranous cataract in a Chinese family

AIM: To determine the prevalence and associations of non-retinopathy ocular conditions among older Australian adults with diabetes. METHODS: Multistage random-cluster sampling was used to select 3098 non-indigenous Australians aged 50y or older (46.4% male) and 1738 indigenous Australians aged 40y or older (41.1% male) from all levels of geographic remoteness in Australia. Participants underwent a standardised questionnaire to ascertain diabetes history, and a clinical examination to identify eye disease. We determined the prevalence of uncorrected refractive error, visually significant cataract, cataract surgery, age-related macular degeneration, glaucoma, ocular hypertension, retinal vein occlusion and epiretinal membrane among those with and without self-reported diabetes. RESULTS: Participants with self-reported diabetes had a higher prevalence of cataract surgery than those without diabetes (28.8% vs 16.9%, OR 1.78, 95%CI: 1.35-2.34 among non-indigenous Australians, and 11.3% vs 5.2%, OR 1.62, 95%CI: 1.22-2.14 among indigenous Australians). Diabetic retinopathy (DR) increased the odds of cataract surgery among self-reported diabetic indigenous and non-indigenous Australians (OR 1.89, P=0.004 and OR 2.33, P<0.001 respectively). Having diabetes for ≥20y and having vision-threatening DR increased the odds of cataract surgery among indigenous Australians with diabetes (OR 3.73, P=0.001 and 7.58, P<0.001, respectively). CONCLUSION: Most non-retinopathy ocular conditions are not associated with self-reported diabetes. However, to account for Australia’s worsening diabetes epidemic, interventions to reduce the impact of diabetes-related blindness should include increased cataract surgery services.     

一步法Real-time RT-PCR检测结直肠癌前哨淋巴结CK20 mRNA的表达

目的 探讨结直肠癌前哨淋巴结定位和检测CK20 mRNA的意义.方法 对49例结直肠癌患者术中注射美蓝定位前哨淋巴结,用一步法Real-time RT-PCR检测前哨淋巴结CK20 mRNA表达以确定转移病灶.结果 49例结直肠癌患者中成功确定了前哨淋巴结47例,共115枚,每例1～5枚,平均2.4枚/例,检出成功率为95.92％.47例患者前哨淋巴结中,常规病理学证实有11例为肿瘤细胞所浸润,阳性检出率为23.40％;一步法Real-time RT-PCR检测有20例CK20呈阳性表达,阳性检出率为42.55％.两种方法的阳性检出率有显著差异（P＜0.05）.结论 利用一步法Real-time RT-PcR技术检测CK20 mRNA表达可明显提高结直肠癌前哨淋巴结转移病灶的检出率.     

ＣＴ／ＣＴ图像融合用于非小细胞肺癌放射治疗对Ｖ２０及放射性肺炎影响的临床研究

目的　探讨ＣＴ／ＣＴ图像融合技术应用于非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）放射治疗计划对Ｖ２０和放射性肺炎（ＲＰ）的影响。方法　４０例入组患者均经病理组织学或细胞学证实为ⅢＡ、ⅢＢ期ＮＳＣＬＣ,三维适形放疗（３Ｄ-ＣＲＴ）剂量达到４０００ｃＧｙ肿块缩小达２５％后随机分为常规缩野放疗组２０例（Ａ组）和ＣＴ／ＣＴ图像融合缩野放疗组２０例（Ｂ组）,两组均追加剂量至６６００ｃＧｙ。记录临床资料、Ｖ２０、放疗结束３个月内ＲＰ发生情况等。ＲＰ用ＲＴＯＧ急性放射性损伤分级标准判断。采用ＳＰＳＳ１１.５软件包进行统计学分析。结果　４０例患者中ＲＰ发生率为２２.５％（９／４０）,其中Ａ组６例（３０.０％）,Ｂ组３例（１５.０％）,两组间差异无统计学意义（Ｐ＝０.２5６）。Ａ、Ｂ组的患侧肺Ｖ２０（ＩＶ２０）和全组的健侧肺Ｖ２０（ＣＶ２０）、患侧肺Ｖ２０均与ＲＰ发生有关,差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）,Ｗｉｌｃｏｘｏｎ检验两组间患侧肺Ｖ２０、健侧肺Ｖ２０差异均有统计学意义（Ｐ＜０.０５）。结论　ＣＴ／ＣＴ图像融合执行的缩野追加剂量放疗未增加ＲＰ的发生率,且有可能降低患侧肺Ｖ２０,为进一步提高局部放疗剂量,获得更好的局控率提供了理论参考依据。     

A review of tositumomab and I131 tositumomab radioimmunotherapy for the treatment of follicular lymphoma

The CD20 antigen has become a major therapeutic target in the management of follicular and other Bcell non-Hodgkin’s lymphomas. The murine monoclonal antibody, tositumomab, on binding CD20, is able to induce antibody-dependent cellular cytotoxicity, complement-dependent cytotoxicity and apoptosis. In addition, when radioiodinated, the antibody exploits the tumour’s sensitivity to ionising radiation by direct targeting of the malignant cell. Tositumomab and Iodine (I¹³¹) tositumomab (Bexxar^®, GlaxoSmithKline, Philadelphia, PA, USA) is administered in two steps. The dosimetric step determines individual patient pharmacokinetics, allowing a patient- specific dose to be calculated. This is followed by the therapeutic step, with administration of the therapeutic dose between 7 and 14 days after the dosimetric dose. Over a decade’s worth of experience in clinical trials has determined the efficacy and safety of the regimen in a variety of clinical ci-rcumstances; establishment of exactly where the regimen fits amongst the algorithm for the management of follicular lymphoma continues.