结核杆菌H37Rv株重组KatG蛋白的表达纯化研究

目的表达纯化结核杆菌H37Rv株重组KatG（简称rKatG）蛋白，为深入研究异烟肼耐药机制奠定基础。方法重组质粒pET23b—KatG转化大肠埃希菌表达菌株BL21（DE3）plysE,IPTG诱导rkatG蛋白表达。经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后，优化表达条件，用镍离子鳌合亲和层析柱纯化rKatG蛋白，对纯化产物进行过氧化氢酶活性测定。结果成功构建了重组质粒pET、23b-KatG,rKatG蛋白以可溶性蛋白形式表达，经亲和层析后的rKatG蛋白纯度为95．6％，过氧化氢酶试验阳性。结论构建的pET23b-KatG重组质粒能高效表达有酶活性的可溶性rKatG蛋白，经亲和层析后可得到高纯度的纯化蛋白。     

高纯度卵泡刺激素效价及相关指标的检测

目的 探讨检测高纯度卵泡刺激素(FSH)产品中黄体生成素(LH)，卵泡刺激素(FSH)的生物活性以及异常毒性、热原的方法。方法 用幼大鼠精囊和卵巢增重法对高纯度卵泡刺激素(FSH)产品进行测定，用小鼠和兔进行异常毒性，热原检测。结果 FSH含量为237．61IU／mg．LH含量为1．05mg，其FSFI／LH的比值大于60：1，小鼠给药48h后存活，家兔热原总升温为0．15，总降温为0。结论 本法符合英国药典98版的要求；对该制剂的异常毒性和热原同时符合相关标准。     

树突状细胞培养技术的研究进展

树突状细胞(DC)是目前已知的体内功能最强的专职性抗原提呈细胞，获得大量高纯度且表型、功能典型的DC是各种基础研究和临床应用的前提。目前已在多种组织中建立了数种有效的DC分离纯化、培养扩增的方法，但仍存在方法的最优化问题，实验技术方法的改进为今后DC在临床的应用提供了基础。     

高纯度还原型辅酶Q10的微囊技术

辅酶Q10在生物体内广泛存在,具有电子传递作用,对于呼吸起了重要的作用。日本从1974年开始生产,2001年开始可以用于食品添加剂。日本Kaneka公司具有超过30年生产辅酶Q10的经验。辅酶Q10有氧化型和还原型,在生物体内,氧化型可以转化为还原型,而还原型的比例随着年龄的增加和压力会     

高纯度人绝经期促性腺激素在促排卵治疗中的应用研究

目的探讨高纯度人绝经期促性腺激素(HP-HMG)在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)促排卵治疗中的有效使用方法。方法回顾性分析2013年1月5日至10月30日于中信湘雅生殖与遗传专科医院行IVF-ET助孕的298名患者的临床资料,根据促排卵药物的不同分成2组:单纯使用HP-HMG的138人为第1组,使用重组FSH(rFSH)和HP-HMG的160人为第2组。比较两组患者促排卵过程中卵巢反应、激素水平、用药情况及治疗结局。结果第2组Gn第6天的E2水平[(2 923.06±430.64)pmol/L]显著高于第1组[(2 218.44±1 745.86)pmol/L](P0.05)。第1组HCG日及Gn第6天HCG水平、总Gn用量和Gn天数明显高于第2组[(分别为(1.79±0.78)U/L vs.(0.89±0.59)U/L,(1.38±1.03)U/L vs.(0.48±0.35)U/L,(1 623.02±547.08)U vs.(1 287.53±498.58)U,(9.89±1.57)d vs.(9.35±1.48)d](P0.05)。两组患者的平均获卵数、受精数、优胚数、早期流产率、取消率、中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率、OHSS取消率、宫外孕发生率比较均无显著性差异(P0.05)。第2组患者的妊娠率、着床率和活产率显著高于第1组(分别为81.06%vs.67.29%,62.25%vs.46.60%,74.24%vs.59.81%)(P0.05)。结论在IVF-ET治疗中,使用rFSH和HP-HMG联合促排卵可以获得比单纯应用HP-HMG较高的临床妊娠率。     

槲皮素制备方法的研究

目的：寻找高效的制备槲皮素的方法。方法：直接采用水提方法提取芦丁，再进行酸水解得到槲皮素，并且核磁共振鉴定结果。结果：所得槲皮素的纯度达到97％以上。结论：直接水提取芦丁，再酸水解得到槲皮素的方法可得到高纯度的槲皮素。     

高纯度r-亚麻酸包合工艺研究工——皂化值及皂化反应

目的：测定月见草油的皂化值及脂肪酸组分，研究皂化反应后pH对产物提率的影响和脂肪酸之间的相关性，为原料的选择、提高皂化产物的产率及尿素包合提供依据。方法：皂化值的测定，利用气相色谱法测脂肪酸组分。结果：月见草油r-亚麻酸含量在7％-10％，其含量多少与不饱和脂肪酸含量呈极显著负相关。通过皂化值的测定，确定了皂化月见草油时的KOH加量，及皂化反应萃取时的最适pH。对2个地区月见草油脂肪酸的测定得出，月见草油脂肪酸中棕榈酸的含量为6％-8％，硬脂酸为1％-2％，油酸为7％-10％，亚油酸为60％-70％，r-亚麻酸为7％-10％，不饱和度90％左右，并进行了相关性分析。结论：月见草油的皂化值在180-200，皂化反应后分离油最佳的pH为1．5—2．0。     

高纯度茄尼醇的精制工艺研究

目的:提供一种高纯度茄尼醇的精制工艺.方法:利用各种柱层析方法,通过HPLC对含量进行监测来实现工艺的优化.结果:发现HPD600型树脂结合氧化铝柱层析有很好的纯化效果,配合乙腈重结晶可使含量达到97%以上.同时,运用保温夹套柱,减少了样品粘连造成的影响.结论:本研究对工业化生产有重要的参考价值.     

医用空分式制氧机与其它供氧手段选用分析

空分式制氧是以分子筛吸附或分离空气中氮气并得到较高纯度的氧气而得名。众所周知,空气中氮气含量为78%,氧气为21%,其它气体占1%.空分式制氧机中的分子筛在一定压力下对氮气有强吸附作用。当加压后的空气通过时,氮气被截留生产出来的氧气浓度在90%～96%之间。基本能满足病人的     

应用离子交换层析法纯化抗RSV-McAb的实验报告

由于常规方法制备的McAb，因其制备过程中常混有大量的杂蛋白，因而在一定程度上影响了McAb的应用。如何获得高纯度的单克隆抗体仍然是研究的重点课题之一。根据应用目的和实验要求不同，已有多种单克隆抗体的纯化方法。本文从本实验室现有条件出发，应用离子交换层析法对本室自制的小鼠抗RSV-McAb进行了初步纯化。