妊娠相关血浆蛋白-A与促卵泡激素在卵泡发育中的关系

目的:探讨妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)是否直接参与了卵泡发育中的FSH作用系统。方法:将来自体外受精-胚胎移植的卵巢黄素化颗粒细胞纯化后,在不同剂量FSH作用下进行体外培养。收集培养液,并采用时间荧光免疫分析法测定培养液中的PAPP-A量。结果:一定浓度范围(0.5-25IU/ml)的FSH能够刺激体外培养的黄素化颗粒细胞分泌PAPP-A(P<0.05),而高浓度(50IU/m)的FSH对颗粒细胞分泌PAPP-A无显著影响。结论:PAPP-A与一定浓度的FSH在卵泡内的作用机制相关,参与卵泡生长发育的调节。     

凋亡对女性生殖细胞的调节作用

卵泡被一层颗粒细胞包绕阻滞于减数分裂Ⅰ期，这种生殖细胞体细胞单位叫做卵泡，以后经过一系列成熟过程，包括卵母细胞生长、颗粒细胞增生以及卵母细胞的最后成熟阶段，完全成熟的卵泡释放出卵母细胞，进入生殖管道受精、形成胚胎并进一步发育成胎儿。成年女性在生殖年龄持续存在这个过程，直到卵泡耗竭终止，这时卵巢发生衰老，在人类形成绝经。在女性一生中仅有很少的一部分卵母细胞生长、排卵、     

干细胞因子及其受体在卵泡早期发育中的作用

目前认为卵泡早期发育是非促性腺激素依赖性过程。此期干细胞因子是启动原始卵泡发育、过渡为初级卵泡的必需因子,与受体c-Kit结合后激活c-Kit下游3-磷酸肌醇激酶等信号通路,调控卵母细胞生长、颗粒细胞和卵泡膜细胞分化、增殖及激素合成。干细胞因子与骨形态发生蛋白15、生长分化因子9等细胞因子相互影响,受促性腺激素调控,共同参与卵母细胞-颗粒细胞对话。     

LNG对双室培养的卵巢颗粒细胞和卵泡内膜细胞分泌功能的影响

本文采用羊膜双室培养系统,观察了18甲基炔诺酮(LNG)对猪卵巢颗粒细胞(G-C)和卵泡内膜细胞(T-C)在甾体激素生成过程中的影响。生长在羊膜两侧的G-C和T-C在加入或不加FSH、LH及各种不同浓度LNG的条件下孵育48小时,用RIA测定内、外室培养液中孕酮(P)和雌二醇(E_2)的含量,并与单独培养时的结果相比较。结果表明:①在FSH刺激时,LNG(30、3000nmol/L)明显抑制双室培养的G-C的P和E_2产量:P产量由55.1±3.4μmol/L降为25.8±1.8和20.3±3.8μmol/L;E_2产量由9.35±0.06nmol/L降至5.24±0.64和3.34±0.72nmol/L。但对P和E_2的基础水平无影响。②不论有或无LH刺激,LNG(30、3000nmoL/L)均明显抑制双室培养的T-C的P产量。有LH刺激时,P产量由70.9±6.5μmoL/L分别降为47.1±11.8和4.8±0.5μmol/L;在无LH刺激时,则由26.9±1.7μmol/L分别降至16.9±1.1和5.6±0.9μmol/L。结论:①LNG抑制双室培养中G-C的P和E_2产量,这种抑制作用是通过降低促性腺激素的刺激作用而产生的;②LNG不但抑制T-C的P基础分泌量,而且还表现为降低促性腺激素对P的刺激效应。③双室培养系统模拟了两种卵巢细胞在体时的旁分泌调节作用,与单独培养相比,是研究避孕药对卵巢功能影响的一种更为理想的模型。     

镉对大鼠卵巢颗粒细胞孕激素合成的影响研究

目的研究镉对大鼠卵巢颗粒细胞孕激素合成的影响,并探讨其机制。方法未成年Wistar大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG)100IU,48h后,取出卵巢颗粒细胞体外培养,备用。①取备用细胞随机分成4组,染镉剂量分别为0、10、20、40μmol/L,孵化30min,测孕酮、cAMP含量。②取备用细胞,随机分为3组,分别为空白对照组、40μmol/LCdCl2、1mmol/L8-Br-cAMP(cAMP类似物) 40μmol/LCdCl2,培养2h,测量孕酮含量。结果各剂量组与对照组比较孕酮含量差异有统计学意义(P<0.01),且随着染镉剂量的增加孕酮含量明显下降;8-Br-cAMP 40μmol/LCdCl2组与单纯40μmol/LCdCl2比较,孕酮含量明显升高(P<0.01);高剂量(40μmol/L)、中剂量(20μmol/L)组镉抑制细胞内cAMP的含量(P<0.01)。结论在本实验的条件下,镉可抑制大鼠颗粒细胞孕酮的合成;8-Br-cAMP可增加孕酮含量,且可逆转镉所导致的孕酮降低;镉对cAMP的抑制作用可能是其抑制孕酮合成的机制之一。     

促性腺激素释放激素激动剂对卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成急性调节蛋白表达的影响

自上世纪90年代开始，促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin-releasinghormoneagonist，GnRH—a）被广泛用于辅助生育技术领域控制性超排卵治疗中。近年来，人们逐渐认识到GnRH-a在提高获卵数量和妊娠率的同时，存在着对垂体和卵巢黄体的过度抑制作用。前期研究显示，在不同剂量GnRH-a降调节方案中，启动日血清黄体生成素（LH）、雌二醇水平以及人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射日的LH、雌二醇、孕酮水平存在差异。本研究针对这一现象，通过对GnRH-a降调节的体外受精-胚胎移植（invitrofertilizationandembryotransfer，IVF-ET）周期中卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成的关键性调节蛋白——甾体激素合成急性调节蛋白（steroidogenicacuteregulatoryprotein，StAR）表达的实验研究，探讨GnRH-a剂量对黄体功能影响的程度和机制，为选择GnRH-a降调节方案和改善黄体支持方案提供实验依据。[第一段]     

大鼠卵巢颗粒细胞IGF—I,TGFβ,Fas—L表达与卵泡闭锁发生？…

为研究ＩＧＦ－Ｉ,ＴＧＦβ和Ｆａｓ－Ｌ在维持卵泡颗粒细胞存活和介导颗粒细胞凋亡中的作用。探讨卵泡闭锁的局部分子机理,将ＳＤ大鼠卵巢石蜡切片,用ＴＵＮＥＬ法和ＰＣＮ免疫组地区别闭锁和生长卵泡,用免疫组分法标记言之有理三种因子以及它们的膜受体在卵泡内的表达,结果显示,无腔和有腔生长卵泡内大多数颗国ＰＣＮＡ阳性,早期有腔闭锁卵泡有５个以上颗粒细胞被衍标记,部分颗粒细胞为ＰＣＮＡ阳性;晚期有腔闭锁卵泡剩余     

早孕期蜕膜组织中细胞的形态学及组织化学研究

用多种组织化学方法对人早孕期蜕膜组织的细胞种类和各类细胞的化学成份作了研究。蜕膜组织内有两类细胞:大细胞和小细胞,其数量各占一半,大细胞胞质内含有丰富的糖原、脂类、脂酶,碱性磷酸酶以及3-β-羟基甾体脱氢酶,小细胞的胞质内含有丰富的酸性磷酸酶和三磷酸腺苷酶,部分小细胞内含有酸性粘多糖。含颗粒的小细胞占小细胞的20.7％,不含颗粒的小细胞有待进一步研究,研究表明,大细胞是形态一致,功能多样的细胞,而小细胞是形态各异和功能不一的细胞。     

三种颗粒细胞剥除方式对卵母细胞受精率及胚胎发育的影响

目的对三种颗粒细胞剥除方式在常规体外受精(IVF)中对卵母细胞受精率及胚胎发育影响进行前瞻性研究。方法2004年1～12月,因输卵管因素不育在我院生殖中心行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者54例,患者年龄均小于35岁。采用随机表法随机分为三组,每组18例,共818个卵母细胞。对三组卵母细胞在IVF后采取不同的颗粒细胞剥除方式:第一组在受精后4h完全剥除颗粒细胞;第二组在受精后4h部分剥除颗粒细胞,受精后16～18h再将颗粒细胞完全剥除;第三组在受精后16～18h完全剥除颗粒细胞(即传统的过夜培养方式)。对三组的受精率、优质胚胎率、囊胚形成率进行比较。结果第一组及第二组的优质胚胎率高于第三组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组在受精率及囊胚形成率方面没有显著差别。结论第一组的颗粒细胞剥除方式最好,即缩短精-卵共培养时间可以提高胚胎质量,长时间的精-卵共培养对优质胚胎的形成有不利影响。较短时间(12～14h)的颗粒细胞与卵细胞的共培养可能对胚胎发育的质量无显著影响。     

肾嗜酸细胞腺瘤的临床病理学观察

目的观察肾嗜酸细胞腺瘤病理学特点并与其它具有嗜酸性细胞浆的肾上皮性肿瘤鉴别。方法观察４例肾嗜酸细胞腺瘤，在光镜观察基础上，运用免疫组织化学检测Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ及Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，并行Ｈａｌｅ胶体铁染色及电镜检查，与形态上类似的肾肿瘤进行鉴别。结果肾嗜酸细胞腺瘤的特点为：胞浆强嗜酸性，粗颗粒，腺泡状或实性片状排列，无坏死，无核分裂像或核分裂像罕见；Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ８阳性，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ阴性，Ｈａｌｅ胶体铁染色阴性，电镜下有多量粗大线粒体。据此，可与颗粒型肾细胞癌、混合型肾细胞癌及肾嫌色细胞癌鉴别。结论肾嗜酸细胞腺瘤是有病理特点的良性肾肿瘤，根据组织学改变，免疫组化、组化染色及电镜特点可与胞浆嗜酸性的肾癌鉴别，具有临床意义。