HLA—DPB1等位基因与重症肌无力相关性研究

①目的　探讨人类白细胞抗原 (HLA DPB1)在重症肌无力 (MG)发病中的作用。②方法　采用聚合酶链反应限制性长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,对 34例MG病人及 5 1例健康人HLA DP对应的HLA DPB1基因进行分型 ,并对其DPB1的各等位基因的频率进行比较分析。③结果　HLA DPB1 0 5 0 1与MG有一定关系 (χ2 =9.81,P <0 .0 5 )。④结论　HLA DPB1座位在MG发病过程中具有重要作用     

基于限制性立方样条探索儿童青少年的骨密度与骨龄发育的关系

目的 通过回顾性分析重庆地区3 776例儿童、青少年骨密度与骨龄发育的关系,为重庆地区的儿童、青少年生长发育评估提供理论依据。方法 回顾性分析3 776例2015年至2019年间在重庆高康健康管理咨询有限公司进行咨询的儿童、青少年的左腕骨X线骨龄片、骨密度、身高、体重。应用Logistic向前逐步回归模型和限制性立方样条分层分析儿童、青少年骨密度与骨龄发育的关系。 结果 本研究中的儿童、青少年在各年龄段均出现骨龄发育提前,其中四个年龄段的男性和女性的骨龄年龄差差异有统计学意义（P<0.05）。Logistic回归分析发现性别、骨密度同龄比、生活年龄为骨龄发育的独立影响因素。在性别、年龄和BMI分层的各亚组中,骨龄发育提前的概率在骨密度较低段有少量上升然后下降,在骨密度较高段呈上升趋势,在体格消瘦和正常组中最明显;各年龄段的骨龄发育提前趋势相当;随着BMI的增加,超龄发育概率逐渐向0.8~1.0区间靠近。结论 重庆地区儿童、青少年普遍存在骨龄发育提前的现象,这种现象可能与性别、骨密度、肥胖等因素有关。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病关系的研究

目的探讨Ｎ５－亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关系。方法利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，检测了７９名健康人和６９名冠心病患者ＭＴＨＦＲ基因的６７７碱基多态性突变Ｃ→Ｔ情况，并加以对照分析。结果冠心病患者ＭＴＨＦＲ基因突变型Ｖ６７７基因的频率，明显高于健康人，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。结论提示ＭＴＨＦＲ基因突变型Ｖ６７７基因可能是冠心病的又一个遗传风险因子，为探讨冠心病发病机理提供了新的依据     

江苏淮阴地区单采浆献血员员丙型肝炎病毒分型及发病情况

目的了解江苏淮阴地区单采浆献血员丙型肝炎病毒(HCV)感染后发病情况和病毒基因分型.方法应用ELISA法及RT-nestedPCR法检测67例单采浆献血员感染HCV后抗-HCV和HCVRNA,并用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)进行病毒基因分型.结果67例单采浆献血员,在感染HCV后,急性丙型肝炎发病率为17.9%(12/67),最终发展成慢性丙型肝炎者49.3%(33/67),HCV慢性持续感染68.8%(46/67).HCV基因分型1b/Ⅱ型占95.5%(64/67),2a/Ⅲ型1.5%(1/67),1b/2a混合型3.0%(2/67).结论淮阴地区单采浆献血员HCV感染以1b/Ⅱ型为优势株,慢性化比例高.     

HIV—1基因限制性显示片段的克隆与序列分析

目的：克隆并分析经限制性显示－聚合酶链反应（RD－PCR）扩增的HIV－1基因片段。方法：将所有HIV－1基因片段分成10组并进行RD－RCR扩增,纯化各组PCR产物后将之克隆至T载体上并快速鉴定。从阳性克隆中提取质粒,扩增靶片段并测序。结果：序列分析表明,所扩增的片段均属于HIV基因。结论：改良了一种多片段的克隆及鉴定方法并用于限制性显示扩增片段的克隆。     

聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性技术检测乙型肝炎病毒P基因区YMDD基因序列变异

目的 建立检测基因变异的聚合酶链反应（PCR）限制性片段长度多态性（Restriction fragment length polymophism,PFLP)法。方法 从服用拉米夫定1年以上的慢性乙肝病例中选取10例抽取血清,分别采用错配套式PCR－RFLP技术、PCR产物直接测序和重组克隆测序,检测P基因YMDD变异。结果 在10个病例中,PCR－RFLP检测到7例为野毒株、1例为混合株感染、2例为变异株;PCR产物直接测序,9例为野株、1例为变异株;对2份用PCR－RFLP法检测为非野株,而PCR测序为阴性的标本采用克隆后测序,发现均为混合株感染。结论 通过对几种检测方法的对比,认为克隆后测序的结果最精确;而从实用性和经济角度来看,采用PCR－RFLP进行初步筛查的方法具有更大的意义。值得推广。     

鼠牙乳头细胞核心结合因子cDNA片段的克隆与序列测定

目的 从培养大鼠牙头细胞中克隆核心结合因子（cbfal）的cDNA片段。方法 原代培养大鼠牙乳头细胞,提取培养细胞的总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR的方法扩增cbfal基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中,转化TOP10感受态细胞,蓝白筛选白色克隆,进行体外扩增,提取质粒进行酶切鉴定,含目的插段的克隆在PE317-A自动测序仪上进行序列测定。结果 从培养的鼠牙乳头细胞提取的总RNA中成功克隆出691bp cbfal基因片段,测序结果和GenBank报道序列完全一致。结论 从鼠牙乳头细胞中成功克隆到cbfal基因片段,确切的证实了核心结合因子（cbfal）基因在鼠牙乳头细胞中的表达。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与脑血管疾病的研究

目的　探讨N 亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性与脑血管疾病的关系。方法　利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法 ,检测了 72名健康人和 71名脑血管疾病患者MTHFR基因的6 77碱基多态性突变C→T情况 ,并加以对照分析。结果　脑血管疾病患者MTHFR基因突变型V6 77基因的频率 ,与正常健康人对比差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论　MTHFR基因突变型V6 77基因可能是脑血管疾病的又一个遗传风险因子 ,但本研究结果显示与脑血管疾病的发病无关 ,是否为脑血管病的遗传风险因素有待进一步研究。     

银染法与放射自显影法检测醛糖还原酶基因多态性的比较

目的 :探讨银染法检测醛糖还原酶 (aldosereductase,AR)基因 5′端微卫星多态性的可靠性。方法 :用银染法和放射自显影法分别检测相同样本DNA的AR基因微卫星多态性 ,比较二者结果。结果 :两种方法均能清楚判读基因型且结果一致。结论 :银染法可以代替放射自显影方法检测AR基因的微卫星多态性