对IMMULITE Ⅰ型化学发光酶免疫技术中检测原理及相关内容的初评

美国德普(DPC)公司开发成功的IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光自动化分析仪及其配套的各项检测试剂盒是在IMMULITE系统条件下发展完善的.它以聚苯乙烯塑料珠为固相载体, 碱性磷酸酶(APase)标记抗体(或抗原),并作用于发光底物AMPPD[3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″磷酰氧基)苯基-1,2二氧乙烷].该仪器可完成单项、联合多项, 甚至十几项的常规项目物质浓度测定.每项检测原理及其反应模式不同.根据待测抗原的性质, 分子量大小, 各项试剂盒性能要求, 具体为每项检测内容设计了更为合理完美,结果准确的检测原理及其反应模式.信号数据处理也由自动化分析仪上电脑预先编制的软件完成, 备有多种标准曲线拟合方程, 以供不同免疫反应模式选择, 满足每项检测项目.本文在实践中了解和观察到32项常规项目的检测原理及相关内容, 用表格形式分析与初评如下.     

口腔黏膜病

正常人口腔黏膜不同部位表面感觉的测试；碱性成纤维细胞因子在口腔复发性阿弗他溃疡的表达及意义；诱导型一氧化氮合酶在口腔黏膜癌前病变——白斑中的表达及意义；口腔扁平苔藓病损区B7抗原及CD28的表达及意义；双氯芬酸钠含片治疗口腔溃疡性疼痛的临床研究；曲安缩松治疗口腔扁平苔藓疗效观察；     

婴幼儿化脓性脑膜炎肝细胞酶变化的观察

目的 探讨婴幼儿化脓性脑膜炎肝脏功能受损情况与年龄及细菌种类的关系。方法 ～3岁80例化脓性脑膜炎患儿，全部病例均于入院后1～3天做脑脊液常规、生化检查、细菌培养＋药敏。确诊病例次日查肝功，发现AST、ALT1项或2项升高者，做乙肝十项、丙肝系列检查。临床观察不同年龄组和不同病原体组肝脏功能受损比例及恢复的时间。结果 3个年龄组化脓性脑膜炎患儿初查时以～6个月发生率最高，为53．3％，3组比较差异有显著性（X^2=6．60，P〈0．05）；治疗后14天复查以～6个月发生率最高，为40．0％，3组比较差异有显著性（X^2=7．06，P〈0．05）；治疗后21天复查仍以～6月发生率最高，为23．3％，3组比较差异有非常显著性（X^2=7．39，P〈0．01）；治疗后28天所有病例AST、ALT全部恢复正常。4种致病菌化脑患儿初查以金葡菌组发生率最高，为61．5％，其次为大肠杆菌组，为41．7％，4组比较差异有显著性（X^2=5．92，P〈0．05）；治疗后14天仍以金葡菌组发生率最高，为46．2％，其次为大肠杆菌，为41．7％，4组比较差异有显著性（X^2=8．469，P〈0．05）；治疗后21天仍以金葡菌组发生率最高，为23．1％，其次为大肠杆菌，为16．7％，但4组比较差异无显著性（X^2=4．542，P〉0．05）；治疗后28天所有病例AST、ALT全部恢复正常。结论 婴幼儿化脑肝功受损比较常见，年龄越小受损比例越高，恢复时间越慢。不同病原体的化脓性脑膜炎以金葡菌组肝功能受损发生率最高，其次为大肠杆菌组。     

377 裙带菜孢子叶中新的抗病毒岩藻依聚糖

广藿香（Pogostemon cablin）的丙酮提取物对美国锥虫病病原体克氏锥虫上鞭毛体显示潜在的抗锥虫活性。本次从中分离及鉴定出3个新的倍半萜氢过氧化物和1个已知的倍半萜广藿香醇。     

止血环酸治疗黄褐斑的疗效及安全性观察

止血环酸（氨甲环酸tranexamic acid）是内科常用的止血药。杨希鏸等报道，由于其与参加黑色素代谢的酷氨酸部分结构相似，共有一个羧基，可竞争性抑制酷氨酸酶进而减少黑色素蛋白的形成。皮肤科临床上利用这一机制来治疗黄褐斑。我们于1998～2003年用临床实验研究方法对止血环酸治疗黄褐斑的疗效进行观察，并检测其安全性，现将结果报告如下。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ在非酒精性脂肪肝病变中的变化

目的研究血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)与非酒精性脂肪肝的关系。方法采用夹心酶联免疫分析的方法测定60例非酒精性脂肪肝患者和40名健康对照血清IGFⅠ水平,并比较两组IGF1、血脂[胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)]、空腹血糖(Glu)、丙氨酸转氨酶(ALT)的测定结果。结果脂肪肝组的血清IGF1水平为(162.0±46.6)ng/ml,健康组血清IGF1水平为(189.0±37.4)ng/ml,结果差异具有显著性(P<0.01)。两组的TG、Glu差异也有显著性(P<0.05),其他指标差异无显著性。结论非酒精性脂肪肝患者的IGF1水平下降与脂肪肝的形成有关,同时可能加重凋亡对已发生脂肪变性的肝细胞的损伤。     

髓过氧化物酶对巨噬细胞骨桥蛋白表达的影响

目的　研究髓过氧化物酶(MPO)对巨噬细胞骨桥蛋白表达量的影响。方法　人单核细胞转化的巨噬细胞 随机分为对照组,MPO不同浓度(125、250、500、1000、2000U/L)及时间(3、24、48h)干预组,用RT PCR技术结合 密度扫描分析,观察巨噬细胞内骨桥蛋白mRNA量的变化。结果　MPO浓度为1000U/L即能刺激巨噬细胞内 骨桥蛋白mRNA量增加,骨桥蛋白的mRNA与β actin的mRNA光密度比值3h干预组1.15±0.09,24h干预组 1.20±0.02,48h干预组1.09±0.04分别较对照组提高57.53%、64.38%和49.32%。结论　髓过氧化物酶能在 基因水平上刺激巨噬细胞骨桥蛋白的表达。     

C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响

[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列.