人结肠癌组织中PTEN／p—Akt1的表达及其临床意义

目的研究结肠癌、腺瘤和相应癌旁正常结肠黏膜组织中PTEN、P—Akt1表达及其临床意义。方法取85例结肠癌、18例结肠腺瘤和9例癌旁结肠黏膜组织分别制成72点和104点两块组织芯片，采用免疫组织化学法检测结肠组织芯片中PTEN、P—Akt1的表达。结果PTEN、P—Akt1在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠黏膜组织中的表达无显著差异（P〉0.05），在不同分化程度的大肠癌组织中PTEN的表达差异显著（P=0．029），PTEN的表达与其它临床病理资料无关，p-Akt1的表达与大肠癌组织学分化程度以及淋巴结转移有关（P=0.000，P=0.032），与其它临床病理资料无关。结论PTEN、P—Akt1畸变可能没有参与正常大肠细胞早期恶性转化的过程，但在结肠癌发生、发展中可能起一定作用。     

CD56、CD54在甲状腺病变中的表达及意义

目的：检测CD56、CD54在甲状腺病变组织中的表达情况,探讨CD56、CD54的表达在甲状腺病变鉴别诊断中的作用。方法分别收集海南医学院附属医院病理科73例甲状腺乳头状癌、64例良性病变组织蜡块。将137例石蜡标本制做组织芯片。应用免疫组织化学技术检测CD56、CD54蛋白在甲状腺病变组织中的表达情况。结果 CD56在甲状腺乳头状癌组织中大多表达缺失,表达率为14%,在良性甲状腺病变组织中表达率高(92.2%),两者间表达率差异具有显著统计学意义(P<0.01)。CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎组织中表达增高(69.9%vs 75.0%),呈弥漫阳性表达,这两组间表达差异无统计学意义(P>0.05);在其他良性甲状腺组织包括结节性甲状腺肿和滤泡性腺瘤中,CD54表达较低(3.8%),主要呈散在弱阳性表达,与甲状腺乳头状癌组织相比,其表达差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 CD56在甲状腺乳头状癌中表达缺失,在甲状腺良性病变组织中表达增高;CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎中高表达,联合检测CD56、CD54对甲状腺病变的鉴别诊断具有重要作用。     

组织芯片技术在检测肿瘤组织抗原表达中的应用

Kononen等于1998年创立并报道的组织芯片亦称组织微阵列（tissus microarray，TMA）技术，是一项以形态学为基础的分子生物学新技术。组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片，按实验设计的需求整齐地排列在同一张载玻片上而制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、快速、低耗、易于标准化等优点，已逐步应用于HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术。我们使用自制的组织芯片采样器制作组织芯片，将此技术初步尝试应用于免疫组织化学，检测VEGF、nm23、Ki-67和PCNA四种抗体在108冽肿瘤标本组织中的表达，以探讨和了解组织芯片技术在临床病理诊断及科研中的实用价值。     

氟他胺对胚胎期SD大鼠睾丸发育整体基因表达水平的影响

目的研究抗雄激素物质氟他胺（Flu）对胚胎期SD大鼠睾丸发育整体基因表达水平的影响。方法对F0亲代母鼠在孕12～17d时每日皮下注射Flu（6．25mg／kg）,于胚胎期20d解剖孕鼠,取出实验组与对照组雄性胎鼠睾丸,提取mRNA,分别用cy5和cy3探针逆转录标记,与Rat 12KcDNA表达谱芯片杂交,荧光扫描分析;同时迅速取出雄性仔鼠右侧睾丸,做免疫组化检测;另将出生后第2d的雄性子代断颈取血清,用睾酮试剂盒测定激素水平。结果芯片结果显示实验组差异表达基因共31条,其中下调基因14条,已知功能基因9条;上调基因17条,已知功能基因7条;一共16条差异表达基因与睾丸组织功能及发育密切相关;免疫组化结果显示合成睾酮两种关键酶蛋白表达降低;且检测睾酮激素水平下降。结论所有证据表明F0亲代母鼠孕期染毒氟他胺能够影响胚胎期雄性SD大鼠的生殖发育,导致出生后雄性子代性分化和性发育异常。     

PTEN、HIF-1α和NDRG1在子宫内膜样腺癌中的表达和相关性研究

目的 探讨PTEN、HIF-1α和NDRG1蛋白的异常表达在子宫内膜样腺癌发生、侵袭和转移中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学方法,结合组织芯片技术,检测124例Ⅰ型子宫内膜癌、28例内膜不典型增生、35例正常内膜组织中PTEN、HIF-1α和NDRG1的表达水平,结合临床病理因素进行分析.结果 PTEN、HIF-1α和NDRG1在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率分别为29.8%、61.3%、52.4%,与正常内膜组和不典型增生组比较,差异有统计学意义(P<0.01).PTEN表达下调和NDRG1过度表达与肿瘤分化程度明显相关(P<0.05),HIF-1α蛋白表达与肿瘤分化、肌层浸润和淋巴结转移明显相关(P<0.05).子宫内膜样腺癌组织中PTEN和HIF-1α和NDRG1的表达存在负相关关系(r=-0.314,P<0.01,r=-0.296,P=0.001),而HIF-1α蛋白与NDRG1的表达正相关(r=0.237,P=0.008).结论 PTEN缺失可能上调HIF-1α和NDRG1蛋白的表达,在子宫内膜样腺癌发生、侵袭和转移中起重要作用,联合检测对于判断子宫内膜癌的恶性程度和预后有重要意义.     

Ⅳ和Ⅳ+Ⅴ型狼疮性肾炎患者血清microRNA标志物的芯片初筛?

目的：应用微小核糖核酸(microRNA)芯片技术初步筛选Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ型狼疮性肾炎患者血清 microRNA,探讨血清microRNA在狼疮性肾炎病理分型中的作用。方法从北京大学深圳医院肾内科生物标本库中选取Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ型狼疮性肾炎血清各4例,作为试验组;同时选取4例健康人血清作为对照组,使用 microRNA 芯片技术筛选差异表达的血清 microRNA。结果Ⅳ型和Ⅳ+Ⅴ型共有部分microRNA,其中22个有显著差异,Ⅳ型特异性microRNA有29个,Ⅳ+Ⅴ型特异性microRNA有3个。结论血清microRNA具有作为鉴别Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ型狼疮性肾炎生物标志物的潜能。     

胃癌组织中P53和泛素对缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的研究胃癌组织中P53和泛素(ubiquitin)对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响及意义。方法采用组织芯片技术制作60例胃癌组织芯片,同时用SP免疫组织化学法和原位分子杂交(cDNA-mRNA)方法检测胃癌组织芯片中P53、ubiquitin、HIF-1α、HIF-1αmRNA的表达。结果60例胃癌组织中,P53、ubiquitin、HIF-1α、HIF-1αmRNA的阳性率分别为55.0%、43.3%、58.3%和71.7%。淋巴结转移组P53、HIF-1α和HIF-1αmRNA阳性率显著高于无淋巴结转移组(P<0.01)。P53高表达、ubiquitin低表达与HIF-1α、HIF-1αmRNA高表达明显相关。结论应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。P53和HIF-1α的表达水平可以作为评估胃癌预后的参考指标,突变型P53影响HIF-1α的高表达,ubiquitin影响HIF-1α的低表达。     

应用组织芯片研究乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达及其临床意义

摘要:目的探讨乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达与临床及预后的关系。方法制作240例乳腺癌组织芯片,采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果CK5／6阳性表达占乳腺癌总数的14.72％(29／197)。CK5／6表达与患者年龄、月经、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移情况、肿瘤病理类型等无关,而与ER阴性表达具有相关性(P＜0.01)。CK5／6表达阳性与阴性的乳腺癌比较,生存期短且预后差。结论CK5／6阳性表达的乳腺癌患者预后较差,CK5／6可成为乳腺癌预后的指标之一。     

竞争PCR-微流芯片法检测血清HBV-DNA含量

目的 评价微流芯片法检测乙型肝炎病毒(HBV)基因的竞争PCR扩增产物含量的准确性.方法 通过竞争PCR-微流芯片法的重复性试验、稀释试验及与竞争PCR-微孔板杂交法、荧光PCR法的比较,判断HBV-DNA检测的准确性.结果 竞争PCR-微流芯片法重复性、稀释试验的线性相关性较好;检测线性范围高于竞争PCR-微孔板杂交法,竞争PCR内对照的含量对检测结果有一定影响;与荧光PCR法检测有较好的一致性.结论 竞争PCR-微流芯片法是临床检测HBV-DNA含量可行的一种方法.     

应用液相芯片技术对上海地区尖锐湿疣患者进行人乳头瘤病毒分型

目的 采用液相芯片技术分析上海地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)型别的分布情况.方法 从116例尖锐湿疣患者的疣体标本中提取脱氧核糖核酸(DNA),应用液相芯片技术进行HPV基因型检测,并与聚合酶链反应(PCR)的检测结果进行比较,明确液相芯片的检测效能.结果 液相芯片检测的116例标本中,HPV阳性114例,阳性率为98.3%.其中单一型别感染占71.6%(83/116),双重型别感染占18.1%(21/116),三重型别感染占7.8%(9/116),四重型别感染占0.9%(1/116).共检出18种HPV亚型,其中HPV6和HPVll最为常见,感染率分别为60.3%(70/116)和42.2%(49/116).在高危型HPV感染中,最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPVl8.液相芯片与PCR检测结果的符合率为90.7%,并且液相芯片对多重感染的检出率高于PCR.结论 上海地区尖锐湿疣以HPV6和HPV11感染为主.高危型HPV感染中最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPV18.液相芯片对HPV多重感染的检出率高于PCR.