粤北地区早发冠心病与MEF2A基因11外显子的关系

目的:探讨广东粤北地区人群中肌细胞增强因子（MEF）2A基因第11外显子基因多态性与早发冠心病的关联性。方法: 应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序技术检测210例散发冠心病患者及180例对照者MEF2A基因第11外显子基因多态性,并研究它与冠心病的关系。结果: 冠心病常见的危险因素,如高血压病、糖尿病、吸烟,在冠心病组分布的频率明显高于对照组（P<0.05）,MEF2A基因11号外显子存在CAG重复序列多态性,重复序列4～11个不等,各等位基因的分布在冠心病组和对照组无明显差异,未发现21个碱基缺失的基因突变。采用Logistic回归方程分析,只有糖尿病是冠心病发病的独立危险因素（P<0.01）。结论: MEF2A基因第11外显子CAG重复序列基因多态性不是粤北地区早发冠心病的危险因素。     

大黄素对家兔离体主动脉平滑肌细胞增殖影响的可能途径

目的：探讨大黄素干预对家兔离体血管平滑肌细胞增殖的作用，并观察其浓度效应剂量。方法：实验于2004—06／12在第三军医大学西南医院药学部完成。选择雄性家兔1只作为动脉平滑肌细胞的动物来源，采用组织贴块法进行主动脉平滑肌细胞的培养。细胞培养成功后分2组：对照组和大黄素组。对照组不加药，大黄素组按剂量分为5个亚组即1．25，2、5，5，10，20mg／L组，每组6孔。选用生长良好的第三四代细胞，加^3H-标记的胸腺脱氧核苷酸行液闪计数以表征细胞增殖的程度，细胞增殖测定采用酶标仪上比色（波长为570nm）用吸光度值表示。超过氧化物歧化酶测定采用邻苯三酚自氧化抑制法，直接以每毫升培养液中超过氧化物歧化酶kat表示。脂质过氧化物测定采用改良TBA微量法，以脂质过氧化物的稳定终产物丙二醛浓度（nmol／L）表示。实验结果采用单因素方差分析（方差齐性检验），用SNK法进行均数之间的显著性检验。结果：①大黄素对细胞增殖的影响：随着大黄素剂量的增加，吸光度值逐渐减少，抑制率逐渐增高。大黄素5，10，20mg／L剂量组的吸光度值明显低于对照组（0．594&;#177;0．037，0．410&;#177;0．014，0．301&;#177;0．024，0．730&;#177;0.041，P〈0.05）。②大黄素对胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量的影响：随着大黄素剂量的增加，胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量逐渐减少，抑制率逐渐增高。大黄素5，10，20mg／L剂量组每分液闪计数值明显低于对照组大黄素（33537&;#177;3713．29304&;#177;4336，21155&;#177;1938，73958&;#177;2276，t=5．862，7．330．18．688，P〈0．05）。③大黄素对超过氧化物歧化酶的影响：大黄素剂量1．25，2．5mg／L剂量组，超过氧化物歧化酶高于对照组，但差异不显著（P〉0．05）。5，10，20mg／L剂量组明显高于对照组[（118．19&;#177;3．56），（127．48&;#177;4．59）．（140．23&;#177;4．96），（100．16&;#177;9．83）kat／L，t=4．224．6．170．8．914，P〈0．051。④对丙二醛含量变化的影响：随着大黄素剂量的增加，其水平逐渐减少，当大黄素剂量为5，10，20mg／L时与对照组相比显著减低[（2．336&;#177;0．113），（1．945&;#177;0．135），（1．381&;#177;0．193），（3．110&;#177;0．256）nmol／L，t=6．774，9．857，13．187．P〈0．051。结论：随着培养液中大黄素浓度的增加，超过氧化物歧化酶活性逐渐增强，同时丙二醛水平逐渐降低，从而抑制血管平滑肌细胞的增殖此，此作用均从5mg／L剂量组开始，并具有浓度依赖性。     

膀胱逼尿肌细胞与Cajal间质细胞结构和功能联系的实验研究

背景:膀胱运动的效应细胞是逼尿肌细胞,而膀胱Cajal间质细胞如能在膀胱运动中作为起搏细胞而存在,必须能对逼尿肌细胞进行调控.因此,二者在结构和功能上的联系可以从一个方面证明Cajal间质细胞是否具有起搏细胞地位.目的:观察膀胱逼尿肌细胞与Cajal间质细胞结构和功能上的联系,分析膀胱Cajal细胞在逼尿肌细胞兴奋调控中的作用.设计、时间及地点:观察对比实验,于2007-04/10在解放军第三军医大学基础部中心实验室完成.材料:选用SD大鼠用于取膀胱逼尿肌新鲜组织块.方法:应用透射电镜观察Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间的超微结构联系:利用荧光漂白技术模拟信号从Cajal间质细胞传递到逼尿肌细胞的过程,观察Cajal间质细胞与逼尿肌细胞之间的信号交流情况.主要观察指标:Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间的超微结构联系及荧光强度变化.结果:①Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间有缝隙连接.②对单个Cajal间质细胞相邻的逼尿肌细胞进行荧光漂白后,发现逼尿肌细胞内的荧光强度明显恢复,同时Cajal间质细胞的荧光强度逐渐减弱.说明Cajal间质细胞与逼尿肌细胞之间有信号通讯通路.结论:逼尿肌细胞与Cajal间质细胞之间存在结构上的联系,Cajal间质细胞可以将兴奋信号传递给周围的逼尿肌细胞.     

Effects of unsaturated fatty acids on calcium-activated potassium current in gastric myocytes of guinea pigs

AIM: To investigate the effects of exogenous unsaturated fatty acids on calcium-activated potassium current [IK(Ca)] in gastric antral circular myocytes of guinea pigs. METHODS: Gastric myocytes were isolated by collagenase from the antral circular layer of guinea pig stomach. The whole-cell patch clamp technique was used to record /K(Ca) in the isolated single smooth muscle cells with or without different concentrations of arachidonic acid (AA), linoleic acid (LA), and oleic acid (OA). RESULTS: AA at concentrations of 2,5 and 10 μmol/L markedly increased IK(Ca) in a dose-dependent manner. LA at concentrations of 5, 10 and 20 μmol/L also enhanced /K(Ca) in a dose-dependent manner. The increasing potency of AA, LA, and oleic acid (OA) on /K(Ca)at the same concentration (10μmol/L) was in the order of AA>LA>OA. AA (10 μmol/L)-induced increase of Ik(ca) was not blocked by H-7 (10 μmol/L), an inhibitor of protein kinase C (PKC), or indomethacin (10 μmol/L), an inhibitor of the cyclooxygenase pathway, and 17-octadecynoic acid (10 μmol/L), an inhibitor of the cytochrome P450 pathway, but weakened by nordihydroguaiaretic acid (10μmol/L), an inhibitor of the lipoxygenase pathway. CONCLUSION: Unsaturated fatty acids markedly increase Ik(Ca), and the enhancing potencies are related to the number of double bonds in the fatty acid chain. The lipoxygenase pathway of unsaturated fatty acid metabolism is involved in the unsaturated fatty acid-induced increase of IK(Ca) in gastric antral circular myocytes of guinea pigs.     

伴有高血压的糖尿病大鼠大血管病变SMC增殖早期基因表达谱的研究

目的:建立糖尿病大血管病变平滑肌细胞(SMC)增殖早期基因表达谱.方法:以自发性高血压大鼠(SHR)为对照,以STZ诱导SHR构建伴有高血压的糖尿病大鼠模型为实验组,分别在1周、2周、4周时抽提胸主动脉中膜的总RNA,获得两组cDNA的探针,与含有4 096条大鼠全长基因的cDNA表达谱芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像,对差异表达基因数据进行生物信息学分析.结果:1周时有差异表达的基因321条,160条基因表达下降(ratio<0.5),161条基因表达上升(ratio>2).2周、4周时上述数据分别为414、238、176和403、202、201.分级聚类分析归为8类,3期全部高表达已知基因13条,其中4条持续升高的基因(CD74、Irf1、GAP43、CD36)都与细胞增殖有关.CYP2E1基因的表达大幅上调(ratio 1 w=34.54; ratio 2 w=24.82; ratio 4 w=33.57).结论:糖尿病大血管病变SMC增殖是多基因综合改变的结果,细胞增殖相关基因高表达是主要病理基础,CYP2E1基因可能是糖尿病大血管病变SMC增殖较重要或关键的基因.     

非编码RNA在脓毒症心肌细胞中表达及分析

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)及微RNA(miRNA)在脓毒症心肌细胞中的表达情况.方法 采用基因芯片筛选对照组与脓毒症组小鼠心肌细胞中lncRNA与miRNA的差异基因,通过基因本体和京都基因与基因组百科全书对差异基因进行分析以判定差异基因主要参与的生物学功能及相关通路.通过starbase数据库及NCB...     

丹参素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的　研究丹参素对豚鼠心室肌细胞膜L 型钙通道的影响 ,探讨丹参素在离子通道水平的药理机制。方法　急性酶解法获得豚鼠的单个心肌细胞 ,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙电流。结果　在保持电位 (Holdingpoten tial,HP)为 - 80mV ,预先去极化至 - 4 0mV ,再去极化至0mV ,波宽为 30 0mS的刺激参数下 ,可记录到一具有电压和时间依赖性内向的电流 ,当用含 1μmol/L硝苯地平的台氏液灌流时该电流被迅速消除 ,在灌流液中加入丹参素 1mg/mL和 10mg/mL ,1mg/mL组对钙电流无明显改变 (P >0 0 5 ,n =5 ) ,10mg/mL组使钙电流减少 [- (7 76± 0 85 )pA/pFvs - (2 6 2 6± 0 5 9)pA/pFP <0 0 5 ,n =8],并使心肌细胞钙电流 -电压曲线上移 ,原有的电流 -电压依赖特征不变。结论　丹参素浓度依赖性地抑制心肌L 型钙通道     

微小RNA-21与心血管疾病关系的研究进展

<正>微小RNA(microRNA,miRNA)是广泛存在于真核生物中的一类长度为20～24个核苷酸所构成的内源性非编码调控单链小分子RNA,它是由含有茎环结构的miRNA前体经Dicer剪切而成。越来越多的研究证实,miRNA作为重要的转录后调节基因,通过抑制靶信使mRNA的翻译而起到重要的负性调控作用,参与细胞的分化、增殖、凋亡以及多种生物组织的发育调节过程[1]。包括miRNA-21在内的     

右美托咪定对心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的观察右美托咪定(DEX)对大鼠心室肌细胞L型钙离子通道电流(ICa-L)的影响,探讨其对心脏电活动影响的机制。方法取SD大鼠,用酶解法分离获得单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录ICa-L,观察不同浓度的DEX(0.6,1.8,5.4,10,200 ng/ml)以及1μmol/L育亨宾(α2肾上腺素受体拮抗剂)单独使用及与10 ng/ml DEX联合使用对ICa-L的影响。结果 0.6,1.8,5.4,10,200 ng/ml的DEX对峰电流的抑制率分别为8.8%±2.4%、14.6%±3.6%、21.4%±8.4%、25.2%±6.4%和32.1%±6.6%,使I-V曲线上移。小剂量(0.6,1.8,5.4 ng/ml)的DEX对ICa-L激活曲线无明显影响(n=6,P>0.05);大剂量(10和200 ng/ml)的DEX可使ICa-L激活曲线右移。0.6,1.8,5.4,10,200 ng/ml的DEX可使ICa-L失活后恢复时间延长。10 ng/ml的DEX可使ICa-L的峰值抑制约25.2%±6.4%,再向电极外液中加入育亨宾后ICa-L平均增加约15%(n=6,P<0.05)。1μmol/L育亨宾灌流前后ICa-L的峰值无差异(n=6,P>0.05)。结论 DEX对心室肌细胞ICa-L具有浓度依赖性地抑制作用,可能是通过细胞膜上的α2肾上腺素受体介导的。