房颤病人心房肌浆网RyR2受体mRNA表达变化的研究

目的:研究心房颤动(房颤)患者肌浆网钙释放通道ryanodine受体(ryanodine receptor type2,RyR2)mRNA表达的改变,探讨房颤电重构与结构重构的发生机制.方法:38例风心病二尖瓣狭窄接受外科手术者,手术时取右心房及右心耳各约100 mg,通过逆转录-聚合酶链反应技术,以GAPDH为内参照,测量肌浆网RyR2受体的mRNA的变化.结果:房颤者肌浆网RyR2受体mRNA较窦性心律者上调,心房不同部位无差别.结论:房颤患者RyR2受体mRNA上调,说明肌浆网Ca2 超负荷与肌浆网钙库的释放增加有关.     

家兔未成熟心肌摄钙功能的实验

目的：从亚细胞水平研究未成熟心肌缺血-再灌注损伤中肌浆网(sarcoplasmic reticulum，SR)摄钙功能，及其mRNA表达．方法：将48只兔随机分为4组，进行Langendorff灌注．组I：幼兔，单纯灌注30min；组Ⅱ：幼免，灌注30min，停搏60min，再灌注30min。组Ⅲ和组IV为成免，处理分别同组I和组Ⅱ，进行对照．测定各组心功能、冠状动脉流出液血气，单细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)，肌浆网钙离子—三磷酸腺苦酶(sarcoplasmic reticulum Ca^2 -adenosine triphosphatase,SR Ca^2 -ATPase)活性，肌浆网^45Ca^2 摄取，并用斑点杂交(dot blot)检测SR Ca^2 —ATPase mRNA表达．结果：缺血—再灌注后，成熟与末成熟心肌均发生钙超载(P＞0．05)．成熟心肌SR Ca^24—ATPase活性，SR ^45Ca^2 摄取初始量，SR^45Ca^2 摄取最大量明显减弱，SR Ca^2 —ATPase mRNA表达明显上调，未成熟心肌则变化不明显，两相比差异显(P＜0．05)．结论：缺血—再灌注后，未成熟心肌SR Ca^2 —ATPase活性恢复率，SR ^45Ca^2 摄取恢复率，明显高于成熟心肌，SR Ca^2 —ATPase mRNA表达上调明显低于成熟心肌．未成熟心肌缺血—再灌注损伤钙超载机制不同于成熟心肌：SR钙摄取功能在钙超载损伤中不起主要作用．     

美托洛尔对心衰大鼠肌浆网Ca2+-ATP酶及心功能的影响

目的 探讨美托洛尔对心衰大鼠肌浆网Ca2+-ATP酶及心功能的影响.方法 腹主动脉缩窄法建立心衰大鼠模型,同时设假手术组.对心衰大鼠随机分为心力衰竭组及美托洛尔组10 mg/(kg·d),观察6周,行心脏超声、血流动力学检查及SERCA2a蛋白及活性测定.结果 同假手术组比较,心衰大鼠左室舒张末压(LVEDP)显著升高,短轴缩短率(FS)、左室收缩压(LVSP)、压力最大上升及下降速率(±dp/dt max)显著降低(P＜0.05),左室收缩、舒张末直径(LVESD/LVEDD),左室后壁厚度(LVPWD)、室间隔厚度(VSD)及左室质量指数(LVWI)显著增加(P＜0.05);美托洛尔治疗后,LVSP、±dp/dt max较心衰组显著增加(P＜0.05),LVEDD、VSD、LVWI显著减小(P＜0.05),但未达到假手术组水平(P＜0.05);同心衰组比较,美托洛尔对SERCA2a蛋白量无明显影响,能显著升高其活性(P＜0.05),但未达到假手术组水平(P＜0.05).结论 美托洛尔对SERCA2a蛋白量无明显影响,但能显著升高其活性,这可能是其改善心衰大鼠的心脏功能,抑制心肌重塑的机制之一.     

房颤病人心房肌浆网钙调控基因mRNA表达变化的研究

心房颤动 (房颤 )的发生机制十分复杂 ,我们主要研究房颤病人心房肌肌浆网钙调控基因Ｃａ2 ＡＴＰ酶 (ＳＥＲＣＡ)、尼兰丁受体 (ＲｙＲ)及三磷酸肌醇受体 (ＩＰ3Ｒ)ｍＲＮＡ表达的变化 ,探讨房颤时心肌细胞内Ｃａ2 超负荷的原因。1.对象与方法 :38例风湿性心脏病二尖瓣狭窄病人均为 1999年 9月至 2 0 0 0年 6月住院接受开胸换瓣手术病人 ,男 16例 ,女 2 2例 ,年龄 2 7～ 70岁 ,平均 46 2岁。共分 3组 :Ａ组 13例 ,为窦性心律者 ;Ｂ组 8例 ,阵发性房颤 2例 ,持续性房颤 <6个月者 6例 ;Ｃ组 17例为房颤持续时间 >6个月者。术前常规行心…     

肌浆网钙ATP酶过表达对心房颤动兔心房及L型钙通道a1c蛋白表达的影响

目的 探讨心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)基因过表达，对兔急性心房颤动(AF)的心房肌L型电压依赖钙通道蛋白alc亚单位(LVDCCalc)表达的影响。方法 48只成年健康新西兰大白兔，随机分成为房颤组(AF组,n=12)、9-型腺相关病毒 增强型绿色荧光蛋白组 房颤组(rAAV9 EGFP AF组,n=12)、9-型腺相关病毒 肌浆网钙ATP酶2a 增强型绿色荧光蛋白组 房颤组(rAAV9 SERCA2a EGFP AF组,n=12)，并设假手术组作为对照(Control组,n=12)。rAAV9 EGFP AF组和rAAV9 SERCA2a EGFP AF组起搏前30d开胸心包腔内注射包含报告基因的rAAV9-EGFP和包含靶基因的rAAV9-SERCA2a-EGFP各500祃L(1?012v.g/礚)。转染30 d后，AF组、rAAV9 EGFP AF组和rAAV9 SERCA2a EGFP AF组,以600BPM刺激频率，持续起搏兔右心房24小时制作AF模型。处死各组动物，倒置荧光显微镜下观察右心房肌组织EGFP表达情况，行HE染色对右心房组织形态检查，应用免疫组化技述检测SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白在心房肌中的表达情况。结果rAAV9 EGFP SERCA2a AF组SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白表达量显著高于AF组和rAAV9 EGFP AF组(P<0.05)，但与对照组比较无显著差异。结论 心房肌转SERCA2a基因，显著减少了急性房颤心房肌的LVDCCa1c蛋白表达的降低，有逆转急性AF电重构的作用。国家国际科技合作专项的编号2011DFA32860     

心脏的兴奋收缩耦联与心电图

心脏的基本功能和基本的活动形式有两种:电活动和机械活动。在每一个心动周期中都是电活动在前,机械活动在后,两者相差40～60ms,形成了兴奋与收缩的耦联。人们常把心脏比喻为循环系统中的一个动力泵,更确切地说心脏是一个电驱动的机械泵。     

CVB3m重复感染心肌致心室重构的实验研究

目的探讨CVB3m重复感染致病毒性心肌炎心肌结构的改变。方法用梯度倍增法连续4次经腹腔注射CVB3m病毒液感染昆明鼠，分别于末次感染后10、30、60d处死动物，电镜下观察心肌细胞超微结构的改变，HE染色观察心肌病变程度和分布，VG染色观察心肌纤维增生情况。结果(1)电镜下显示末次感染后10d股丝走行紊乱，线粒体大部分肿胀，少数嵴溶解消失，肌浆网扩张，溶酶体糖原颗粒增多。30d时肌丝紊乱程度减轻，糖原减少，核周有轻度的低电子密度区，线粒体嵴仍有断裂或絮状变，基质密度降低。60d时心肌间质中血管周围有大量纤维素的沉积，胶原纤维合成增多。(2)HE染色显示末次感染后10d心肌损伤严重，30d时仍可见小灶坏死，60d时未检出心肌损伤。(3)VG染色表明末次感染后10d心肌即出现较弱的胶原染色，30d时胶原明显可见，60d时心肌组织的胶原显著增加，心肌组织血管周围胶原面积(RCVA)和心肌胶原容积分数(CVF)均显著增加。结论CVB3m重复感染可导致急性期严重的心肌坏死，慢性期心肌胶原沉积和心肌纤维化。     

稳心颗粒对心力衰竭兔心肌细胞肌浆网钙泵基因和蛋白表达的影响

目的探讨稳心颗粒对心力衰竭（简称心衰）兔肌浆网钙泵基因和蛋白表达的影响及其意义。方法采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄制作家兔慢性心衰模型。36只日本大耳白兔随机分为假手术组（Sham）、假手术稳心颗粒组（Sham—drug）、心衰组（HF）、心衰稳心颗粒组（HF—drug）。仅游离结扎右颈总动脉和分离腹主动脉,并不造成主动脉瓣返流和腹主动脉缩窄为假手术处理,稳心颗粒组于主动脉瓣返流术后第二天开始喂药稳心颗粒。连续给药8周后行心脏超声检查观察兔心脏结构和功能的变化,并检测肌浆网钙泵（SERCA2a）和受磷蛋白（PLB）的mRNA和蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,HF组左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）、左室舒张末期容积（LVEDV）和左室收缩末期容积（LVESV）增大（P〈0．05）,而左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）降低（P〈0．05）,HF—drug组的LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV均低于HF组（P〈0．05）,LVEF、LVFS高于HF组（P〈0．05）。与Sham组相比,HF组心肌SERCA2amRNA和蛋白表达明显降低（P〈O．05）;然而,HF-drug组心肌SERCA2amRNA和蛋白表达显著高与HF组（P〈O．05）。而PLB的mRNA表达和蛋白表达水平4组间无差异（P〉0．05）。结论稳心颗粒能一定程度上提高心衰家兔SERCA2amRNA和蛋白的表达,增加SERCA2a的活性,可能是稳心颗粒改善心功能的原因。     

川芎嗪通过调控组蛋白乙酰化修饰上调SERCA2a对心力衰竭小鼠模型的防治机制研究

目的　研究川芎嗪（ligustrazine, LGSZ）是否通过调控组蛋白乙酰化修饰上调心肌肌浆网Ca2+-ATPase 2a（SERCA2a）在预防心力衰竭中发挥作用。方法　通过微创性横向主动脉缩窄（TAC）手术构建心力衰竭的小鼠模型,超声心动图评价LGSZ干预后心脏功能变化,实时定量聚合酶链式反应（qPCR）,western blot及ChIp检测SERCA2a相关蛋白和基因表达,并通过试剂盒检测组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）活性。结果　TAC+LGSZ组手术前后左心室前壁舒张末期厚度（LVAWd）、舒张末期左室后壁厚度（LVPWd）、射血分数（EF）及缩短分数（FS）比较,差异均无统计学意义（t=0.245~1.054,均P>0.05）。TAC+LGSZ组SERCA2a mRNA和SERCA2a蛋白表达显著高于TAC组,差异有统计学意义（t=4.817,3.913,均P<0.001）。TAC+LGSZ组中总AcH3和AcH3K9与SHAM组比较,差异无统计学意义（t=0.624,1.249, 均P>0.05）。TAC组HDAC1酶活性和HDAC1水平均高于SHAM组和TAC+LGSZ组,差异均有统计学意义（t=2.361~4.309,均P<0.05）。TAC组心脏组织中,Atp2a2启动子区域附近GATA4和Mef2c水平低于TAC+LGSZ组,差异有统计学意义（t=4.816,5.007,均P<0.001）。结论　LGSZ通过调控组蛋白乙酰化修饰上调SERCA2a在压力超负荷引起的心力衰竭中起预防作用。