心肌肌浆网钙泵2a与心力衰竭

慢性心力衰竭是复杂的临床综合征,是许多疾病的终末阶段。心肌肌浆网钙泵(SERCA)是肌浆网上的重要蛋白质,调节胞质钙离子的浓度,在心肌的兴奋收缩耦联中扮演重要的角色,参与慢性心力衰竭的病理生理过程。心力衰竭时SERCA2a表达下降,且SERCA2a mRNA的水平与心功能指数呈正相关。对心肌肌浆网钙泵的深入研究将为慢性心力衰竭的治疗提供新的途径。     

心肌肌浆网Ca2+-ATP酶基因转导改善慢性心力衰竭犬心功能的研究

目的： 探讨以重组腺相关病毒(rAAV)为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬心功能的影响。方法: 选取成年比格犬17只，随机分为对照组4只和心力衰竭组11只。快速右心室起搏建立慢性心力衰竭犬模型并随机分为心力衰竭组4只、心力衰竭＋绿色荧光蛋白（EGFP）组4只、心力衰竭＋SERCA2a组5只(其中1只在开胸后死亡)。接受基因导入的心力衰竭犬行开胸术，分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体。于基因转导30d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查。结果: 基因转导30 d时，心力衰竭＋SERCA2a 组犬的症状及超声心动图指标与心力衰竭＋EGFP组相比有显著好转（P<0.05）；与对照组相比无显著差别。血流动力学监测发现，转导SERCA2a的犬LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高，平均值较EGFP组分别增加54.12％［(214.72±31.74)mmHg vs (139.32±36.79)mmHg］、146.81％［(6 779.43±217.58)mmHg/s vs (2 746.85±931.23)mmHg/s］和71.52％［(-4 341.42±322.02)mmHg/s vs (-2 531.14±616.15 mmHg/s)］，LVEDP则降低了63.43％［(21.86±6.95)mmHg vs (59.78±6.92)mmHg］，所有参数与对照组相比无显著差异。心力衰竭＋EGFP组犬心肌冰冻切片在激光共聚焦显微镜下可见弥漫绿色荧光。结论: 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善慢性心力衰竭犬心脏的收缩和舒张功能，是1种有前景的治疗慢性心力衰竭的方法。     

H2S减少H2O2诱发H9c2心肌细胞内质网应激的机制研究

目的 探讨硫化氢(H2S)减少过氧化氢(H2O2)诱发H9c2心肌细胞内质网应激的作用机制.方法 H2O2 150 μmol/L诱发制备H9c2心肌细胞内质网应激模型后分为三组,A组为模型对照组,B组和C组分别采用硫氢化钠25 μmol/L和S-炔丙基半胱氨酸25 μmol/L处理;另设空白对照(D)组.CCK-8法检测细胞生存率,Hoechst染色法检测凋亡细胞,荧光分析法检测Caspase-12活性,Western blot检测转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白结合蛋白(BiP)、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)、受磷蛋白(PLN)和心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)表达,免疫共沉淀法检测CaMK Ⅱ与PLN以及SERCA2a与PLN的结合.结果 A组细胞存活率低于D组,而B组和C组高于A组(P＜0.05).A组凋亡细胞数多于D组,而B组和C组均少于A组(P＜0.05).A组 Caspase-12活性、PLN 磷酸化水平、CHOP、BiP、CaMK Ⅱ 以及 CaMK Ⅱ与PLN结合表达均高于D组,B组和C组则均低于A组(P＜0.05).A组SERCA2a与PLN结合的表达低于D组,B组和C组则均高于A组(P＜0.05).结论 H2S可以通过CaMK Ⅱ/PLN/SERCA2a途径减少内质网应激,对H2O2诱导的心肌细胞损伤发挥保护作用.     

实验性心肌梗塞心肌肌浆网钙释放通道变化

目的 :探讨急性心肌梗塞心肌肌浆网钙释放通道的变化。　　方法 :将兔分为急性心肌梗塞组和对照组 ,急性心肌梗塞组结扎兔冠状动脉左前降支 6小时后制成急性心肌梗塞模型 ,用氚标记的兰尼定 (3H- ryanodine)对心肌肌浆网钙释放通道进行放射配基分析。　　结果 :兔实验性急性心肌梗塞梗塞区心肌肌浆网钙释放通道总结合位点数 (Bmax值 )较对照组显著降低 (93.91± 9.6 8fmol/ mg.pro比 15 5 .74± 2 3.5 0 fmol/ mg.pro,P<0 .0 1) ;两组心肌肌浆网钙释放通道平衡解离常数 (Kd值 )无显著变化(P>0 .0 5 )。　　结论 :急性心肌梗塞时心肌肌浆网钙释放通道密度降低 ,而其亲和力则无改变。     

风湿性心脏病心肌细胞内肌浆网钙离子转运功能变化的机制

目的：探讨风湿性心脏病（风心病）慢性心力衰竭时心肌细胞内肌浆网Ca2 转运功能变化的机制。方法：采用Westernblot法测定19例风心病患者（风心病组）和6例意外脑死亡者（对照组）心肌肌浆网钙泵蛋白和兰尼碱受体含量,同时采用草酸盐易化的肌浆网Ca2 摄取法测定两组心肌肌浆网的Ca2 摄取功能,采用测定“裸露”心肌束的咖啡因敏感性方法测定风心病患者心肌肌浆网的Ca2 释放功能。结果：风心病组钙泵蛋白和兰尼碱受体相对含量比对照组分别显著减少23％（P＜0．01）和10％（P＜0．05）,心肌匀浆肌浆网Ca2 摄取量和摄取率也均显著低于对照组（P＜0．05～P＜0．01）,并且风心病患者钙泵蛋白相对含量变化与肌浆网Ca2 摄取率变化呈显著正相关（r=0．81,P＜0．01）,“裸露”心肌束的相对Ca2 释放速率变化也明显低于正常水平,且与兰尼碱受体相对含量变化密切相关（r=0．67,P＜0．05）。结论：风心病心肌细胞内肌浆网Ca2 摄取和释放功能下降的机制主要与肌浆网的Ca2 摄取和释放蛋白含量变化有关。     

大鼠烧伤后心肌局部肾素—血管紧张素系统的改变

目的 观察烧伤早期心肌局部肾素－血管紧张素系统（RAS）变化及其对心肌肌浆网（SR）钙运转功能的影响,探讨烧伤早期心功能障碍的发病机制。方法 大鼠随机分为对照组（8只,不予致伤）,烧伤组（40只,致30％Ⅲ度烧伤）,治疗组（40只,Lisinopril灌胃3天后致30％Ⅲ度烧伤）,测定烧伤前（对照组）及烧伤后3,8,24h左心功能变化,心肌组织血管紧张素转换酶（ACE）活性,血管紧张素Ⅱ（AⅡ）及钙离子（Ca^2 ）含量变化,测定心肌SR Ca^2 -ATPase活性,及SR Ca^2 运转功能的变化。结果 烧伤组大鼠左心室内压变化最大速率（±dp/dtmax)明显降低,心肌组织ACE活性、AⅡ及Ca^2 含量显著增加,心肌SR Ca^2 -ATP活性降低,SR Ca^2 摄取减少。治疗组预防性给予ACE抑制剂Lisinopril可显著降低烧伤后心肌组织ACE活性,减少A Ⅱ产生,Ca^2 含量降低,增加SR Ca^2 -ATPase活性,SR Ca^2 摄取增加,左心室功能明显改善。结论 烧伤早期心肌局部RAS迅速激活,抑制SR Ca^2 运转,可能是心肌RAS促进烧伤早期心功能障碍的作用机制之一。     

SERCA2a在糖尿病心肌病中表达与调控研究进展

正1.SERCA2a生物学特性及病理生理学作用SERCA是一种分子量为110 k Da的跨膜蛋白,属于P型ATP酶家族,可以分为3个不同区域的跨膜蛋白,包括胞浆区、跨膜螺旋和管腔袢,并且有10多种不同的细胞亚型在不同组织中表达。在心脏,其主要表达为SERCA2a,它能够利用ATP水解得到的化学能源运输2个Ca~(2+)离子进入肌浆网内。SERCA2a的活性取决于SERCA2a蛋白的含量,并进一步受其抑制蛋白受磷蛋白(phospholamban,PLB)、肌脂蛋白     

心肌缺血预适应状态下肌浆网功能变化的研究进展

心肌缺血预适应(IPC)是对抗心肌缺血再灌注损伤的一种内源性保护途径。近年 来研究表明,心肌肌浆网可能是IPC发挥心肌保护作用的重要靶点之一,IPC通过对肌浆 网上的钙转运蛋白功能的调节,延缓了缺血再灌注损伤导致的细胞内钙超载的发生。而 IPC可能是通过钙/钙调素依赖性蛋白激酶 Ⅱ、腺苷受体以及蛋白激酶C等途径作用于肌 浆网。     

人参皂苷Rh3预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶表达的影响

目的 探讨人参皂苷Rh3对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA)表达的影响。方法 雄性SD大鼠96只随机分为假手术组、模型组、低[人参皂苷Rh3 4mg/(kg·d)]、中[人参皂苷Rh3 8mg/(kg·d)]和高[人参皂苷Rh3 16mg/(kg·d)]剂量组以及利多卡因[8mg/(kg·d)]组。后4组造模前连续7d给予相应药物后,建立MIRI模型,计算心肌梗死面积,观察病理学改变、4′,6-二脒基-2-苯基吲哚和TUNEL荧光染色凋亡蛋白表达,ELISA法检测TNF-α和白细胞介素6(IL-6)水平,RT-PCR和Western blot检测心肌组织SERCA mRNA和蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组心肌细胞损伤明显,细胞核有大量凋亡蛋白分泌,低、中、高剂量组及利多卡因组凋亡蛋白分泌较少;心肌组织和血清炎性因子TNF-α和IL-6明显升高(P0.05);低、中、高剂量组及利多卡因组上述指标则明显低于模型组(P0.05);与假手术组比较,模型组心肌组织SERCA含量明显减少(P0.05),与模型组比较,高剂量组的含量明显增高(P0.05)。结论 人参皂苷Rh3预处理后,可明显减轻MIRI,改善心功能、降低炎性反应,与其可以降低凋亡蛋白,增加SERCA表达有关。     

糖尿病大鼠心肌磷酸兰苯蛋白含量的改变

目的：观察糖尿病大鼠心肌肌质网Ca²⁺-ATP酶（SERCA）和磷酸兰苯蛋白（PLB）的改变。方法：复制糖尿病大鼠模型,12周后比较糖尿病大鼠和对照组大鼠的心脏/体重比,并以Western印迹法测定两组大鼠心肌组织SERCA和PLB含量。结果：糖尿病大鼠心脏/体重比显著大于对照组（P<0.01）;虽然SERCA在两组间无显著差异,但是糖尿病大鼠心肌内PLB表达以及PLB/SERCA比值显著高于对照组（P<0.05）。结论：糖尿病可造成大鼠心肌内PLB含量和PLB/SERCA比值增高。