阿霉素对大鼠离体工作心脏毒性研究

阿霉素(100μM)可使离件心脏功能降低,心肌脂质过氧化物(MDA)含量明显增高,但钙含量未见增加,提示阿霉素早期心肌损伤的机制可能首先与自由基有关而不是胞外Ca~(2+)大量内流引起的Ca~(2+)超负荷。本实验还显示心肌细胞膜无明显破坏,推测阿霉素的早期作用部位主要在细胞内。给药后心肌收缩力迅速地、一过性地增高,与作者等以前观察到的阿霉素引起肌浆网Ca~(2+)释放特点相似。本文讨论了肌浆网Ca~(2+)释放与阿霉素心肌病的关系。     

阿霉素对实验兔心肌细胞内游离钙和肌浆网Ca2+-ATP酶活性的影响

目的：探讨治疗剂量阿霉素（ADR）对心脏血流动力学及心肌肌浆网Ca^2 －ATP酶活性的影响。方法：实验兔每周静脉注射ADR（2mg/kg）1次，共8周，以健康同龄兔静脉注射等量生理盐水为对照组。这药3周后多普勒测定降主动脉血流量，以代表心输出量（CO），左颈总动脉和左心室插管测定血压（BP），平均动脉压（MAP），左心室收缩压（LVSP），左心室舒张末压（LVEDP）。应用荧光分光光度计测定心肌细胞内游离钙（MyoCa^2 ）浓度，无机磷酸根法测定心肌肌浆网（SR）Ca^2 －ATP酶活性。结果：阿霉素组CO、BP、MAP、LVSP均较对照组低，而VEDP则明显增高。阿霉素组使MyoCa^2 浓度显著增高，同时SR Ca^2 -ATP酶活性明显低于对照组。结论：治疗剂量阿霉素可使心脏功能下降，心肌细胞内钙超载及SR Ca^2 －ATP酶活性降低。     

缺血再灌注对兔心肌肌浆网Ryanodine受体2功能的影响

目的 评价缺血再灌注（I／R）对心肌肌浆网（SR）钙释放功能的影响。方法 将16只新西兰兔完全随机平分为对照组、缺血再灌注组；采用langendorff离体心脏灌注模型；蔗糖密度梯度离心法制备心肌肌浆网；微孔滤过滤技术测定心肌肌浆网钙转运功能改变；并定量RT－PCR检测相应蛋白质mRNA表达水平改变。结果与对照组相比，缺血再灌组肌浆网摄钙增幅未见减少，而Ryanodine受体2（RYR2）mRNA表达水平改变。结果 与对照组相比，缺血再灌组肌浆网摄钙增幅未见减少，而Ryanodine受体2（RYR2）mRNA表达水平明显减少。结论 缺血再灌注后心肌肌浆网Ryanodine受体2基因表达减少，然后总的释钙量未见减少。     

风心病心房颤动患者心房肌肌浆网IP3-I受体mRNA表达变化的研究

目的 :研究房颤患者肌浆网钙释放通道 - IP3- I受体 (IP3R1 ) m RNA表达的改变 ,探讨房颤时心肌细胞浆Ca2 超负荷的原因。方法 :风心病二尖瓣狭窄接受外科手术 38例 ,手术时取右心房及右心耳心肌各约 10 0 mg。通过 RT-PCR(逆转录 -聚合酶链反应 )技术 ,以 GAPDH为内参照 ,测量 IP3R1 m RNA的变化。结果 :房颤者肌浆网 IP3R1 m RNA较窦性心律者上调 ,心房不同部位无差别。结论 :房颤患者 IP3R1 m RNA上调 ,说明心肌细胞 Ca2 超负荷与肌浆网钙库的排空有关。     

心脏肌浆网Ca^2＋—ATP酶及其调节

心脏肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶有４个Ｃａ２＋结合位点，胞浆面是２个高亲和力位点，而腔面则是２个低亲和力位点。依靠磷酸化，２个Ｃａ２＋从高亲和力位点转移到低亲和力位点，然后解离到肌浆网腔内。结合在肌浆网膜上的肌酸激酶与Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶之间存在着功能偶联。Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶被磷酸受纳蛋白调节，当后者脱磷酸化时是其抑制剂，磷酸化后则解除抑制。     

过度游泳训练及力竭降低大鼠骨骼肌肌浆网Ca2+相对释放能力

目的:观测6周递增时间游泳训练及一次力竭运动后,大鼠骨骼肌SR Ca2 转运能力相关指标的变化,为训练和/或力竭对骨骼肌SR Ca2 转运活性影响的研究提供实验依据.方法:将大鼠随机分为安静组(S)、安静力竭组(SE)、训练组(T)和训练力竭(TE)组,训练组进行6周递增时间游泳训练,力竭组在6周后做一次力竭运动,检测相关指标.结果:训练大鼠游泳至力竭的时间明显长于未训练大鼠;训练组血清总睾酮(TT)含量降低40% (P<0.05),安静力竭组降低90%(P<0.01),训练力竭组降低94%(P<0.01);安静力竭组和训练力竭组大鼠血清肌酸激酶(CK)活性分别增加40%和100%;训练力竭组大鼠骨骼肌SR钙泵(Ca2 -ATPase)活性及SR Ca2 摄取和释放显著增加,但SR Ca2 释放/摄取的比值降低40%.训练力竭组大鼠腓肠肌2a型钙泵(SERCA2a)表达增强10%(P>0.05), 而I型Ca2 释放通道(RyR1)表达减少30%(P<0.05),股四头肌钙调蛋白(CaM)增加(P<0.05),环一磷酸腺苷(cAMP)含量降低(P<0.05).提示:尽管(过度)训练和力竭游泳增加SR Ca2 摄取和释放,但损伤SR Ca2 的相对释放能力,游泳时间越长越明显.这可能是Ca2 /CaM和cAMP依赖性信号通路上调SERCA/RyR1表达和SR Ca2 转运的结果.股四头肌SR Ca2 摄取和释放的幅度和速度大于腓肠肌.     

三尖杉酯碱对大鼠心肌肌质网膜脂过氧化及膜脂分子运动的影响

目的：研究三尖杉酯碱（Ｈａｒ）对膜脂过氧化及膜脂运动的影响．方法：膜脂过氧化用硫代巴比妥酸法测定，其含量用ＭＡＡ表示；用纳秒荧光偏振技术研究膜脂过氧化对膜脂分子运动的影响．结果：Ｈａｒ１０ｍｇ·Ｌ－１可使ＭＡＡ由１７±０８增加至５４±５１μｍｏｌ／ｇ蛋白质；随过氧化脂质含量的增加，膜脂双层的微粘度增加，磷脂分子摆动角减小（ｒ＝－０８５６５，Ｐ＜００１），Ｃａ２＋转运ＡＴＰ酶活性降低（ｒ＝－０８７１４，Ｐ＜００１）；ＤＰＨ的荧光强度减弱，荧光寿命缩短．结论：Ｈａｒ引起肌浆网膜脂过氧化，因而影响膜脂双层的运动和膜蛋白的功能．     

基于钙超载探讨自主神经调控对HFpEF大鼠心肌结构重塑、电重塑及纤维化的影响

目的 探究自主神经调控对大鼠射血分数保留心力衰竭(HFpEF)模型结构重塑、电重塑及纤维化的影响。方法 SPF级12周龄SD大鼠44只,抽取10只作为对照组,余34只用于建立HFpEF模型。通过腹主动脉-下腔静脉瘘结扎的方式构建HFpEF模型。其中30只建模成功,4只死亡。建模成功的大鼠分为模型组、自主神经调控组(调控组)及自主神经调控+乙酰胆碱M2受体拮抗剂组(调控+拮抗组),每组10只。调控组在模型组基础上经皮耳缘迷走神经刺激。调控+拮抗组在调控组基础上每天经尾静脉注射美索曲明(0.5 mg/kg)。通过心脏超声仪测量心脏舒张末期左心室后壁厚度(LVPWD-D)、舒张末期室间隔厚度(IVS-D)及二尖瓣舒张早期/舒张晚期血流速度最大峰值(E/A)。心脏电生理刺激仪获取心脏的有效不应期(ERP)、单向动作电位时程(MAPD)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测B型尿钠肽前体(NT-proBNP)水平。HE染色观察心肌细胞排列及炎性细胞浸润情况。Masson染色观察心肌纤维化程度。RT-PCR和Western blot检测心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子...     

苓桂养心汤对扩张型心肌病大鼠心肌保护作用及肌浆网钙调控蛋白的影响

目的:明确苓桂养心汤对扩张型心肌病(DCM)大鼠心功能、心肌的保护作用;观察苓桂养心汤对DCM大鼠损伤心肌肌浆网(SR)钙调控相关蛋白的影响,探讨其可能的作用机制。方法:以60只SD大鼠腹腔注射阿霉素1.0 mg/kg/次,每周2次,连续6周,总量12 mg·kg-1建立DCM模型,另设正常组(10只),观察2周,8周后将存活DCM模型大鼠随机分为培哚普利组、苓桂养心汤组、模型组,连续灌胃给药8周。治疗后对上述各组大鼠行心脏超声检查;采血测定大鼠血清B型尿钠肽(BNP)水平及肌钙蛋白-Ⅰ(cTnI);取大鼠左心室心肌进行苏木素-伊红(HE)染色和透射电子显微镜检测大鼠心肌病理学形态。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别测定大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA2a),钙释放通道(RyR2),受磷蛋白(PLB),肌集钙蛋白(Calsequestrin),L-型钙离子通道(CAV1.3)的mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,苓桂养心汤组可以改善DCM模型大鼠的心腔大小、心功能、心肌损伤及心肌病理学形态。与模型组比较,苓桂养心汤组SERCA2a,RyR2,CAV1.3,Calsequestrin mRNA表达升高;PLB mRNA表达下降。与模型组比较,苓桂养心汤组SERCA2a及Calsequestrin蛋白表达升高;PLB蛋白表达下降。结论:苓桂养心汤能缩小DCM大鼠左心室内径,提高左心室射血分数和缩短率,降低血清BNP和cTnI水平,保护DCM大鼠损伤心肌,改善心功能。苓桂养心汤可部分调控DCM大鼠心肌肌浆网钙泵,兰尼碱受体,受磷蛋白,肌集钙蛋白,L-型钙离子通道的mRNA基因和蛋白表达。苓桂养心汤治疗DCM大鼠的作用机制,可能与通过调节DCM大鼠心肌肌浆网钙调控相关蛋白的基因及蛋白表达,改善心肌细胞钙转运及心脏舒缩功能有关。     

黄芪总皂甙对培养大鼠心肌细胞钙超载的影响

目的:研究黄芪总皂甙是否对培养大鼠心肌细胞钙超载产生影响,为研究和开发中药的新成分提供理论依据。方法:异丙肾上腺素干预培养大鼠(1～3d的SD乳大鼠80只)心肌细胞造成心肌细胞钙超载的模型,同时用黄芪总皂甙、维拉帕米和美托洛尔分别作用于细胞72h。分为异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)组,黄芪总皂甙1(astragaosides1,AS1)组,AS2组,ISO+AS1组,ISO+AS2组,ISO+美托洛尔(metoprolol,M)组,ISO+维拉帕米(verapamil,V)组及正常对照组(control,C)组。检测肌细胞内游离钙离子浓度和肌质网的钙负荷,测定心肌细胞内脂质过氧化物丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)的含量和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性。结果:异丙肾上腺素引起心肌细胞游离钙离子浓度和肌质网钙负荷明显增加(分别增加89%和116%)。黄芪总皂甙可浓度依赖性的抑制异丙肾上腺素的作用,从低浓度(10mg/L)到高浓度(100mg/L)。与ISO组比较,ISO+AS1组与ISO+AS2组可使细胞内的钙离子浓度分别降低37%和50%(169.2±24.2),(132.6±29.2),(267.6±82.0)nmol/L,t=2.57,P<0.05;t=3.81,P<0.01,使肌质网钙负荷分别降低23%和35%(P>0.05;t=2.48,P<0.05),但是黄芪总皂甙的这种作用不如维拉帕米,美托洛尔可基本阻断异丙肾上腺素的作用。异丙肾上腺素使心