新型可降解聚合物聚乙二醇对苯二甲酸酯/聚对苯二甲酸丁二醇酯的细胞相容性研究

目的：研究新型可降解聚合物聚乙二醇对苯二甲酸酯／聚对苯二甲酸丁二醇酯(PEGT／PBT)的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)相容性，对其在组织工程血管中的应用进行探讨。方法：对PEGT／PBT进行细胞毒性评价。观察并检测HUVEC在PEGB／PBT、Ⅰ型胶原改性(Col-)的PEGT／PBT、纤维连接蛋白改性(Fn-)的PEGT／PBT上的粘附和增殖，对细胞在粘附过程中的粘着斑蛋白进行免疫荧光染色观察。结果：PEGT／PBT细胞毒性不大于1级，能支持脐静脉内皮细胞的粘附和增殖。纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原处理可促进HLIVEC在PEGT／PBT膜上的增殖，而且纤维连接蛋白可增加HUVEC在PEGT／PBT上20min、2h的粘附率，并促进细胞形成局部粘附结构。结论：新型可降解聚合物PEGT／PBT具有良好的血管细胞相容性，对其在组织工程血管中的应用值得进一步开发研究。     

硫酸酯化葡甘聚糖凝胶颗粒的微观形貌及其吸附行为研究

制备了硫酸酯化魔芋葡甘聚糖凝胶颗粒血液低密度脂蛋白吸附剂，扫描电镜观察产物呈交联网状多孔结构。体外静态吸附实验表明：在37℃振荡吸附2h后，对总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白及超低密度脂蛋白胆固醇（LDL＋VLDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的吸附率分别为52．68％、54．76％、27．78％。通过吸附动力学曲线和吸附等温线分析，吸附剂对LDL＋VLDL-C的作用包括类似分子筛的吸附和电荷间静电相互作用两种方式。     

JC病毒样颗粒可直接转运进入细胞核

目的探讨JC病毒(JCV)病毒样颗粒(VLP)是否可以直接转运进入细胞核。方法心用JCV主要外壳蛋白VP1体外表达、重组VIP，在其表面标记异硫氰基荧光素(FTTC)，同时在其内部包裹荧光染料Cy3，感染培养的HeLa细胞和SVG细胞，荧光显微镜观察VLP入核转运。结果HeLa和SVG细胞感染包裹Cy3的FTTC-VLP时，FTTC与Cy3同时出现于细胞核内相同部位；而感染FTTC—VP1与Cy3混合物时，FTTC虽可在细胞核内检测到，但Cy3信号几乎消失。包裹Cy3的VIP用SDSPAGE展开，荧光显像后行考马斯亮蓝(CBB)染色，发现Cy3和VLP移行至不同部位，证明Cy3不能与VP1结合，提示VLP以完整的颗粒形式转运进入细胞核。应用包裹外源性DNA的VLP感染培养的HeLa和SVG细胞，发现包裹的DNA在细胞浆和细胞核内均可检测到，提示JCV入核过程与VIP相同。结论VLP可以不经裂解直接转运进入细胞核，JCV入核转运可能与VLP相同。     

尿微量白蛋白、尿酶和尿肌酐联合测定对糖尿病早期肾损害的临床价值

目的探讨尿蛋白定性阴性的糖尿病患者随机尿中尿微量白蛋白(mAlb)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿肌酐(Cr)的检测对发现糖尿病早期肾损害的临床价值。方法尿微量白蛋白(mAlb)用免疫透射比浊法,尿NAG用终点法,尿肌酐(Cr)采用Jaffe's速率法进行测定。结果尿蛋白定性阴性的糖尿病组尿mAlb/Cr,NAG/Cr分别为(8.33±6.82)mg/mmol和(24.33±17.38)U/g,对照组mAlb/Cr,NAG/Cr分别为(1.61±0.86)mg/mmol和(5.83±2.96)U/g.,两组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论常规尿mAlb/Cr,NAG/Cr的检测可作为发现糖尿病早期肾损害敏感而又可靠的常规指标。     

几种新药相继登场乙肝市场又起纷争

中国1．2亿名乙肝病毒携带者，3000万名慢性乙肝患者，每年用于乙肝治疗费用超过3000亿元人民币，如此巨大的市场早已被国内外药商视为必争之地。此前一直被葛兰素史克的拉米夫定一统天下的中国乙肝药物市场，随着国内与国外“阿德福韦酯”的剑拔弩张而硝烟四起，而恩替卡韦等几种新药的相继登场，则令市场争夺日趋白热化。     

壳聚糖醋酸溶液对凝血作用的研究

研究了不同脱乙酰度和不同分子量壳聚糖醋酸溶液的凝血作用。发现壳聚糖醋酸溶液使抗凝血液中红细胞发生了明显的聚集和变形。通过不同分子量和脱乙酰度壳聚糖的促红细胞聚集实验,证明了低脱乙酰度壳聚糖(60%~70%)使红细胞聚集效果更好,分子量在105~106范围内作用不十分明显。对血液的凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分促凝血酶原激酶时间(APTT)和纤维蛋白原浓度(FIB)的测定结果验证了壳聚糖醋酸溶液凝血机理不依赖于血小板和常规“瀑布”凝血机制。     

构建肿瘤坏死因子-α免疫微球的实验研究

前瞻性构建肿瘤坏死因子-α免疫微球,以期为将来进一步研究能应用于特异性清除TNF-α的血液净化方法,奠定实验基础。采用以PSM为载体,依次包被PLL及rHTNF-αM cA b的方法而制备的免疫微球,分别以异硫氰酸荧光素标记,应用倒置显微镜及荧光显微镜观察、分光光度计测定等方法,探讨吸附微球的包被条件。结果显示,20℃、pH 9.5、60 m in三者为PLL包被PSM的最佳条件。包被后的洗脱液检测结果显示PLL含量无明显变化,说明PLL在PSM表面包被较为牢固。在相同温度及包被时间内,应用浓度为0.2%的戊二醛溶液进行的rHTNF-αM cA b对PLL的包被结合牢固。实验表明,所构建的肿瘤坏死因子-α免疫微球,达到了预期的目的,可以作为一种新颖的免疫吸附材料。该方法简单,价格便宜,为相关实验研究提供了一种崭新方法。     

淡色库蚊(Culex pipiens Pallens)与击倒抗性(kdr)相关的钠通道基因突变

本研究采用RT-PCR技术,使用简并引物分别从淡色库蚊(Culex pipiens pallens)敏感品系和抗溴氰菊酯品系中扩增出钠通道ⅡS4～ⅡS6区域的基因片段,长度为359bp.该基因片段所编码的氨基酸与黑尾果蝇(Drosophila melanogaster)、家蝇(Musca domestica)、埃及伊蚊(Aedes aegypti)、冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)及德国小蠊(Blattella germanica)等昆虫相应区域的氨基酸序列具有较高的同源性,其同源性分别为95.8%,95.0%,100.0%,98.3%和95.0%.经序列比对,确认抗溴氰菊酯品系淡色库蚊钠通道基因在1014位点发生了突变该位点的碱基"A"突变为"T",其对应氨基酸由亮氨酸(L)变为苯丙氨酸(F),该突变(L1014F型)在多种昆虫中较为常见.     

P53对涎腺腺样囊性癌细胞端粒酶活性的抑制作用

目的为了探讨P53基因对腺样囊性癌细胞端粒酶活性的抑制作用及机制。方法构建携带人野生型P53基因的腺病毒表达载体，以脂质体法瞬时转染腺样囊性癌SACC-83细胞，RT-PCR检测转染细胞P53基因mRNA的表达，TRAP-PCR-ELISA法检测转染细胞端粒酶活性的改变。并将P53基因与含有hTERT启动子核心调控区的荧光素酶报告基因pGL2—630共转染SACC-83细胞，测定转染细胞荧光素酶报告基因活性。结果1．瞬时转染含人野生型P53基因的重组腺病毒表达载体p△E1-P53于腺样囊性癌SACC-83细胞后，其P53基因mRNA的表达明显增强；2．基因转染后，SACC-83细胞内源性端粒酶活性显著降低。3．P53基因与含有hTERT启动子核心调控区的荧光素酶报告基因pGL2-630共转染SACC-83细胞后，其荧光素酶活性显著下降。结论外源性表达P53基因可以降低腺样囊性癌细胞SACC-83细胞端粒酶活性，并可能通过抑制端粒酶hTERT基因启动子的转录活性实现。     

糖皮质激素对肾病综合征患儿骨代谢的影响

目的 探讨糖皮质激素(GC)对肾病综合征(NS)患儿骨代谢的影响.方法 选择30例NS患儿为NS组,予口服泼尼松2 mg·kg-1·d-1,采用中、长程疗法.治疗前及应用GC治疗4周后采集NS患儿静脉血,并留取晨尿,分别测定血Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PICP)、尿脱氧吡啶啉(DPD)排泄率.健康体检的15名学龄前儿童为健康对照组.结果 NS组患儿GC治疗前血清PICP水平、尿DPD排泄率与健康对照组比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05);GC治疗后血清PICP水平较治疗前及健康对照组明显降低、尿DPD排泄率较治疗前及健康对照组明显增高,差异均有统计学意义(Pa<0.05).结论 长期应用GC对NS患儿骨骼代谢有潜在的影响.