耐索拉非尼肝癌细胞株的构建及耐药机制研究

［摘要］　目的　构建耐索拉非尼肝癌细胞株并探讨其耐药机制。方法　应用HepG2、Huh7细胞通过浓度递增法建立耐索拉非尼细胞模型。通过CCK8法检测细胞对不同浓度索拉非尼的敏感性。通过划痕实验检测细胞的迁移能力。通过流式细胞术分析细胞凋亡情况。通过荧光实时定量RT-PCR和Western blot实验检测凋亡相关因子caspase-3和自噬标志因子P62、LC3的表达水平。结果　获得耐索拉非尼肝癌细胞株HepG2-SR、Huh7-SR。随着索拉非尼药物干预浓度的升高，耐药细胞株及野生型细胞株的存活率均逐渐降低。HepG2-SR细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）显著高于HepG2细胞［（15.74±0.38）μM vs （7.27±0.44）μM ；t=5.450，P<0.001］；Huh7-SR细胞的IC₅₀显著高于Huh7细胞［（11.73±0.27）μM vs （4.92±0.31）μM；t=4.807，P<0.001］。相较于野生型细胞株，耐药细胞株具有更高的抗凋亡和迁徙能力。耐药细胞株的caspase-3、P62表达水平显著低于野生型细胞株（P<0.05），而LC3表达水平显著高于野生型细胞株（P<0.05）。结论　耐索拉非尼肝癌细胞株HepG2-SR、Huh7-SR具有更强的抗凋亡、抗生殖抑制和迁移能力，且自噬水平更高，为研究肝细胞癌对索拉非尼的耐药机制提供了基础。     

甲胎蛋白应答评价索拉非尼联合卡瑞利珠单抗治疗晚期肝细胞癌的效果分析

目的 探讨甲胎蛋白(AFP)应答在索拉非尼联合卡瑞利珠单抗治疗晚期肝细胞癌中的临床疗效及安全性。方法 选取2020年9月—2022年2月于新疆医科大学第一附属医院接受索拉非尼联合卡瑞利珠单抗治疗的48例晚期肝细胞癌患者的临床资料，按照治疗后AFP应答水平进行分组：应答组(治疗6～8个月时，与基础AFP比较，AFP下降率>20%,n=32);无应答组(治疗6～8个月时，与基础AFP比较，AFP下降率≤20%,n=16)。计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验；计数资料组间比较采用χ²检验。绘制生存曲线，行Cox单因素/多因素回归分析得到与OS相关的独立危险因素。比较两组患者无进展生存时间、总生存期与治疗效果。结果 两组患者中均未观察到达到临床缓解的病例。AFP应答组的客观有效率(21.88%vs 0)和疾病控制率(84.38%vs 43.75%)均高于无应答组(χ²值分别为2.530、6.668,P值分别为0.112、0.010)。应答组无进展生存期(9.9个月)、总生存期(13.8个月)均高于无应答组(6.8个月、11.1...     

医保谈判对多纳非尼治疗肝细胞癌药品经济性的影响

目的 立足于我国卫生服务体系角度，评价医保谈判前后，多纳非尼对比索拉非尼一线治疗晚期肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）的药品经济性。方法 基于一项在中国晚期肝细胞癌患者开展的临床试验（ZGDH3研究）及已发表的文献数据，构建分区生存模型模拟患者长期生存获益和治疗成本，支付意愿（willingness to pay, WTP）阈值设定为1～3倍我国2021年人均国内生产总值（gross domestic product, GDP），并进行单因素敏感性分析和概率敏感性分析以检验模型稳健性。结果 基础分析显示，医保谈判前后，多纳非尼组对比索拉非尼组的增量成本-效果比（incremental cost-effectiveness ratio, ICER）分别为280 745.92元/质量调整生命年（quality-adjusted life year, QALY）与181 477.87元/QALY（低于3倍人均GDP,242 928元）；单因素敏感性分析显示，多纳非尼成本、疾病进展（progressed disease, PD）状态效用值是影响ICER的主要...     

微小RNA调控肝细胞癌索拉非尼耐药的分子机制北大核心CSCD

肝细胞癌是全球最致命的恶性肿瘤之一,侵袭性强,治愈率低,转移率高,预后极差。索拉非尼是治疗晚期肝细胞癌最主要且有效的一线治疗药物,但原发和获得性耐药,严重限制其临床疗效。微小RNA是一种小非编码RNA,在肝细胞癌的发生、发展,以及索拉非尼耐药进展中扮演着关键的调控角色。该文总结了微小RNA在肝细胞癌索拉非尼耐药的起始和发展中的作用,旨在进一步了解索拉非尼抗肝癌的机制,并为肝细胞癌的临床靶向治疗,及预后改善提供有价值的理论依据。     

水飞蓟宾对索拉非尼在大鼠体内药动学的影响及机制研究

目的 研究不同剂量水飞蓟宾对索拉非尼在大鼠体内药动学的影响并探究相关机制。方法 雄性SD大鼠随机分为索拉非尼（100 mg/kg）组、低剂量（50 mg/kg）水飞蓟宾＋索拉非尼（100 mg/kg）组和高剂量（100 mg/kg）水飞蓟宾＋索拉非尼（100 mg/kg）组，每组6只，连续8 d ig空白溶剂或水飞蓟宾后ig索拉非尼，于不同时间点采集血样，测定血浆索拉非尼质量浓度。采用qRT-PCR检测大鼠肝组织中细胞色素P450 3A1（cytochrome P450 3A1，CYP3A1）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A7（UDP-glucuronosyltransferase 1A7，UGT1A7）和小肠组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）和乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）mRNA表达。结果 50 mg/kg水飞蓟宾使索拉非尼的C_max、AUC_0～t和AUC_0～∞分别增加了47.4%、57.1%和64.7%，100 mg/kg水飞蓟宾使索拉非尼的C_max、AUC_0～t和AUC_0～∞分别增加了47.6%、80.5%和79.8%；联合给药组小肠组织中P-gp和BCRP mRNA表达明显受到抑制（P<0.05），但肝组织中CYP3A1和UGT1A7 mRNA表达没有变化。结论 水飞蓟宾和索拉非尼联用存在药动学相互作用，可能会增加索拉非尼不良反应发生风险，临床联合使用时应加强监测，必要时调整给药剂量。     

双氢青蒿素和索拉非尼诱导未分化甲状腺癌铁死亡的协同机制

目的探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)和索拉非尼(sorafenib, SOR)诱导未分化甲状腺癌(anaplastic thyroid cancer, ATC)细胞发生铁死亡的协同作用及分子机制。方法以细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞仪检测DHA和SOR对ATC细胞CAL-62增殖及铁死亡的影响;实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11基因(SCL7A11)、脂氧合酶-15(LOX-15)及p53表达水平的变化;对应的检测试剂盒检测铁死亡中间代谢产物乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛、亚铁离子(Fe2+)、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)水平;建立裸鼠肿瘤模型分析DHA和SOR对ATC在体内的抑制作用。结果与对照组相比, DHA、SOR和DHA+SOR处理均呈剂量依赖性抑制细胞增殖(P<0.001), LDH、Fe2+、丙二醛及ROS含量明显增多, GSH活性明显降低(P<0.001), 其作用均被硫酸亚铁(FeSO4)促进, 被铁抑素-1逆转。与对照组及单独...     

索拉非尼无定形体系结晶动力学稳定性评价及结晶抑制剂筛选

目的 制备索拉非尼无定形体系，评价其结晶动力学稳定性，探讨聚合物对无定形的抑制结晶效应。方法 旋转蒸发法制备索拉非尼无定形态，非等温多速率差式扫描量热分析法研究无定形形成能力和结晶动力学稳定性，溶解度和体外溶出实验考察聚合物对无定形的抑制结晶效应。结果 动力学脆性指数48,玻璃化转变温度与熔融温度之比0.8,降低结晶温度0.51,结晶活化能152.15 kJ·mol^-1,Avrami指数约为2,含有50μg·mL^-1甲基纤维素M450溶液，无定形体系溶解度与累积溶出度分别提高1.43和2.17倍。结论 索拉非尼无定形具有较高的动力学稳定性，甲基纤维素可延长无定形体系过饱和时间。