索拉非尼联合伊匹单抗对肝癌抑制作用的实验研究

目的探讨索拉非尼联合伊匹单抗对肝癌的抑制作用。方法设置索拉非尼组、伊匹单抗组及联合组,分别加入不同浓度的索拉非尼(5、10、15、20μmol/L)、伊匹单抗(5、10、15、20μmol/L)及两药联合(10μmol/L索拉非尼+10μmol/L伊匹单抗)处理肝癌HepG2细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹(Western blot)法检测Raf-1、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1(p-MEK1)、磷酸化细胞外信号调节激酶1(p-ERK1)蛋白表达量。结果不同浓度索拉非尼、伊匹单抗处理HepG2细胞,随着浓度增加,细胞吸光度值及增殖率均下降,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。10μmol/L索拉非尼组、10μmol/L伊匹单抗组以及联合组的细胞增殖率分别为(49.83±0.4)%、(45.53±0.8)%、(33.57±0.9)%,分别低于对照组的100%,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。与对照组、10μmol/L索拉非尼组、10μmol/L伊匹单抗组比较,联合组细胞侵袭数目均明显减少,凋亡率均明显提高,Raf-1、p-MEK1、p-ERK1蛋白表达量均明显下调,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论索拉非尼及伊匹单抗均能显著抑制肝癌HepG2细胞增殖与侵袭,与抑制Raf-1/MEK1/ERK1信号通路有关,且联合给药优于单药。     

猪牙皂皂苷与索拉非尼联用对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其机制

目的探索猪牙皂皂苷(SFGS)与化疗药物索拉非尼联用对肝癌HepG2细胞增殖的影响及相关蛋白的表达。方法将SFGS和索拉非尼分别或联用处理体外培养的肝癌HepG2细胞48 h,采用CCK-8方法检测药物作用对肝癌HepG2细胞存活率的影响;应用基于FITC-Annexin V/PI双染的流式细胞技术检测药物作用对肝癌HepG2细胞凋亡的影响;应用Western Blot检测肝癌HepG2细胞中相关蛋白的表达变化。结果 SFGS可以显著提高索拉非尼对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,增强cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的上调表达。结论 SFGS与索拉非尼联用对肝癌HepG2细胞的抑制有协同作用。     

原发性肝细胞癌分子病理学研究与临床

原发性肝癌(primarylivercancer,PLC)是临床上常见的恶性肿瘤之一,其中90%为肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)。目前我国肝癌发病人数占全球55%,死亡人数约占全世界肝癌死亡人数的45%。随着以形态学为主的“传统病理学”向形态学与分子学诊断相结合的“分子病理学”转变,原发性肝癌在发病、诊断、治疗、预后等方面有了新的进展。     

索拉非尼抑制大鼠肝纤维化的实验研究

目的：研究索拉非尼对实验性大鼠纤维化过程的影响。方法：Wistar大鼠腹腔注射DMN诱导建立肝纤维化模型。造模后分别以高剂量（10mg/kg）、低剂量（3mg/kg）灌胃。观察各组大鼠肝脏大体变化;HE染色观察病理变化;Masson’s trichrome及Sirius Red染色观察肝细胞内胶原纤维水平,免疫组织化学法测定α-SMA表达。对肝纤维化程度分级,图象分析仪半定量分析。灌胃稀释剂作为对照。结果：肉眼观察治疗,结束后对照组及低剂量组肝脏表面出现单发或多发大小不等的肝纤维化结节,高剂量组大鼠肝脏肝纤维化程度较前两组明显减轻;光镜观察对照组可见肝细胞变性、坏死,纤维组织增生,肝内广泛假小叶纤维化,低剂量组病变程度同对照组类似,高剂量组肝细胞无明显变性,未见广泛再生结节和再分隔。对照组及低剂量组胶原染色面积胶原染色面积无明显差别,高剂量组胶原染色面积分别为模型组和低剂量组的52%、49%,较对照组均有显著差异（P〈0.05）;对照组及低剂量组α-SMA表达水平不同程度增加,高剂量组α-SMA表达明显减少。结论：索拉非尼能在病理水平减轻实验性模型大鼠的肝纤维化进程。     

索拉非尼联合蒽环类化疗药对乳腺癌MCF-7细胞增殖周期的影响

目的探讨索拉非尼联合蒽环类化疗药表阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞增殖周期的作用。方法细胞做四甲基偶氮唑盐实验,绘制细胞增殖曲线。实验分为4组：对照组、索拉非尼单药组、表阿霉素单药组、联合组（索拉非尼＋表阿霉素）。用聚酰亚胺染色后,经流式细胞仪检测各组细胞增殖周期的变化。结果细胞增殖曲线可见细胞传代后开始增殖,4~5 d达到峰值,后随着时间的延长,细胞增殖受抑越来越明显。流式细胞仪检测细胞周期结果显示,索拉非尼单药组使MCF-7细胞阻滞于G0/G1期[（62.837±0.511）%]与对照组[（49.250±0.826）%]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;表阿霉素单药组使细胞阻滞于S期[（24.976±0.409）%],与对照组[（23.473±1.009）%]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;联合组G0/G1期细胞比率[（64.373±0.429）%]高于对照组及表阿霉素单药组[（50.980±0.403）%],差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论索拉非尼和表阿霉素的联合应用可以使乳腺癌MCF-7细胞明显阻滞于G0/G1,可以为乳腺癌的联合化疗提供一定的理论依据。     

索拉非尼联合塞来昔布对胆管癌细胞株SK—ChA-1增殖的影响

目的研究索拉非尼联合塞来昔布在体外对胆管癌细胞株SK—ChA-1增殖的影响。方法体外培养人胆管癌细胞株SK—ChA-1,通过MTF法检测索拉非尼单用或与塞来昔布联用时对胆管癌细胞株增殖的抑制作用,WesternBlot分析索拉非尼单用或与塞来昔布联用时对胆管癌细胞株内多聚ADP核糖聚合酶（PARP）蛋白表达的影响。结果索拉非尼抑制胆管癌细胞株SK-ChA-1的增殖并诱导细胞凋亡。索拉非尼联合塞来昔布协同抑制胆管癌细胞株SK—ChA-1的增殖。塞来昔布使索拉非尼诱导的胆管癌细胞株SK—ChA-1的凋亡增加。结论索拉非尼联合塞来昔布能协同抑制胆管癌细胞株SK—ChA-1的增殖,这与塞来昔布使索拉非尼诱导的细胞凋亡增加有关。     

索拉非尼抑制肝癌细胞增殖中自噬的作用及其机制

目的：研究分子靶向药物索拉非尼在体外对人肝癌细胞株HepG_2增殖抑制过程中自噬的表达及作用,并探讨其可能机制。方法：以吖啶橙染色荧光显微镜对自噬进行定性观察;cell counting kit-8检测活性氧（reactiveoxygen species,ROS）抑制前后HepG_2细胞成活率的变化;RT-PCR检测自噬基因Beclin-1表达的变化。Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin-1的变化：荧光分光光度计检测胞内二氯荧光素DCF的荧光强度。结果：索拉非尼对肝癌细胞HepG_2具有显著的抑制作用;索拉非尼可诱导肝癌细胞HepG_2产生自噬及ROS,自噬在基因及蛋白水平表达均增加;抑制ROS的产生可减少索拉非尼诱导的肝癌细胞HepG_2自噬的表达量,自噬的抑制增强了索拉非尼对肝癌细胞的抑制作用。结论：ROS参与索拉非尼诱导肝癌细胞HepG_2的自噬表达,索拉非尼在抑制肝癌细胞自噬过程中自噬可能起到保护作用,抑制自噬可能为提高进展期肝癌病人索拉非尼分子靶向治疗敏感性提供新的思路。     

索拉非尼联合TACE治疗老年原发性肝癌的临床观察

目的 探讨老年原发性肝癌患者采用索拉非尼联合经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗的临床观察.方法 选择56例老年原发性肝癌患者,随机分索拉非尼联合TACE治疗组(观察组)28例,单纯TACE治疗组(对照组)28例;按照RECIST标准评价客观有效率(ORR)、临床获益率(CBR)、6个月生存率、1年生存率、2年生存率,甲胎蛋白(AFP)的变化及不良反应.结果 治疗组ORR、CBR、6个月生存率、1年生存率和2年生存率分别为57.1％、96.4％、100％、80.9％和75.0％,对照组分别为25.0％、67.9％、78.6％、60.7％和42.9％,差异有显著性(P＜0.05).结论 索拉非尼联合TACE治疗老年肝癌疗效较好,毒副反应能耐受.     

索拉非尼治疗晚期肾癌33例临床分析

目的 初步评价索拉非尼治疗晚期肾癌的疗效和不良反应.方法 2007年5月至2009年6月应用索拉非尼治疗转移性肾癌33例.男23例,女10例.年龄21～81岁,中位年龄54岁.其中透明细胞癌29例,乳头状细胞癌2例,嫌色细胞癌和透明混合嫌色细胞癌各1例.单一脏器转移18例,多脏器转移15例,至少具有1处可测量病灶.其中发现肾癌同时伴有转移4例,术后发现转移29例,术后1年以内发现转移15例,＞1年14例.曾接受免疫治疗和(或)化疗13例,索拉非尼一线治疗20例.口服索拉非尼400～600 mg 2次/d,直至肿瘤进展或出现不可耐受的不良反应.采用实体瘤疗效评价标准每8周评定1次.随访11～106周,中位随访时间29周.结果 全组无完全缓解患者,部分缓解 4例(12%),疾病稳定27例(82%),疾病进展2例(6%),无死亡病例.最常见的不良反应是手足皮肤反应28例(85%)、腹泻15例(46%)、皮疹14例(42%)、脱发12例(36%)、口腔炎及溃疡6例(18%)、高血压2例(9%),3级腹泻1例(3%),未见4级毒副反应.结论索拉非尼治疗晚期肾癌有效率12%,疾病控制率94%.不良反应较轻,大多数患者可以耐受.

Abstract：

Objective To investigate the efficacy and toxicity of sorafenib in the treatment of advanced renal cell carcinoma. Methods From May 2007 to JUN 2009, 33 patients with advanced renal cell carcinoma were given oral sorafenib 400-600 mg twice daily. There were 23 males and 10 females in the study group. The pathological diagnosis of the primary tumors was clear cell carcinoma in 29 patients, papillary renal cell carcinoma in 2 patients, chromophobe renal cell carcinoma in 1 patient and chromophobe renal cell carcinoma mixed with clear renal cell carcinoma in 1 patient. Fifteen patients had multiple organ metastases and 18 patients had single organ metastasis. The median follow-up time was 29 weeks. Results Four (12%) patients achieved partial remission, 2 (6%) patients achieved progression disease, the remaining 27 (82%) patients achieved stable disease. Complete remission was not observed in the group. Two of the partial remission patients benefited on bone metastases. Common toxicities were skin reaction (85%), diarrhea (46%), erythra (42%), alopecia (36%), oral ulcer (18%) and hypertension (9%). Conclusions Sorafenib could be effective in controlling tumor growth. The overall effectiveness was 12%, the disease control proportion was 94% in this group and its toxicity was relatively minor and well tolerated.