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11.
用新鲜的人绒毛膜组织,抽提组织总RNA并通过逆转录反应合成cDNA第一链。利用人工合成的一对寡核苷酸引物,采用PCR技术特异性地扩增hCG-β-cDNA。琼脂糖凝胶电泳结果显示扩增片段大小为500bp,同预计的片段长度相符。将此片段利用T-A载体克隆至PCRⅡ质粒上并进行全序列分析,结果显示克隆片段包含hCG-βcDNA5’端和3’端非编码区及完整的编码区。  相似文献   
12.
胃癌D17S261和D17S799位点二核苷酸重复序列不稳定性的意义   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的研究二核苷酸重复序列不稳定性〔DRSI〕在胃癌发生中的作用及其临床意义.方法采用PCR方法检测了D17S261和D17S799位点二核苷酸重复序列不稳定性.结果胃癌总DRSI发生率为34%(17/50),其中高中分化腺癌DRSI阳性率(667%,10/15)显著高于低分化癌(194%,6/31,P<001);肠型胃癌DRSI阳性率(556%,10/18)显著高于胃型胃癌(20%,6/30,P<005),DRSI与胃癌部位、大小、浸润、分期、淋巴结转移无显著相关.结论DRSI在胃癌的发生中可能起重要作用.  相似文献   
13.
本研究利用逆转录PCR技术和家族特异性引物,先后从9株分泌不同特异性单抗杂交瘤细胞株中扩增出轻,重链可变区基因,并经克隆和序列测定。其中利用轻链引物从分泌抗转铁蛋白受体单抗的杂交瘤细胞株中扩增出了无功能的VK序列。经分析和GenBank数据库比较,该序列虽与BALB/cVK21-E细胞株分泌的抗体轻链有98%同源性,但是在V/J连接区内有4个碱基对缺失,导致后续阅读框架移位,因而出现终止密码子而致  相似文献   
14.
人类线粒体DNA多态区荧光标记序列分析的研究及其在法庭科学中的应用张纯斌周静倪锦堂李伯龄(公安部第二研究所)DNA分析技术在法庭科学中的应用是一个重要的分支,以往的DNA个体识别与亲子关系鉴定分析技术主要有对存在于细胞核中的DNA做各种不同方式的分析...  相似文献   
15.
下呼吸道感染鲍曼不动杆菌ESBLs表型及基因型检测   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的分析引起下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的耐药情况及其β-内酰胺酶(BLA)耐药基因类型。方法采用微量稀释法测定临床分离的35株鲍曼不动杆菌对21种抗菌药物的敏感性、三维试验法检测ESBLs采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析BLA基因型。结果29株(82.9%)ESBLs阳性,其中14株(40.0%)合并产AmpC酶。所有菌株均对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和多粘菌素E敏感,其余抗生素的耐药率在40.0~100.0%之间。35株TEM型扩增全部阳性,任选2株测序结果均为TEM-1型。有15株菌株扩增到SHV型BLA基因,经测序13株为SHV-12型ESBLs,另2株(HZ01株和HZ29株)为2种新发现的SHV型BLA,分别被命名为SHV-48和SHV-56。结论临床分离的引起下呼吸道感染鲍曼不动杆产ESBLs比例很高,多重耐药状况极其严重,至少存在4种不同类型的β内酰胺酶基因,基因型分别为TEM-1、SHV-12、SHV-48和SHV-56。  相似文献   
16.
应重视口腔颌面部恶性肿瘤的综合序列治疗   总被引:11,自引:2,他引:9  
口腔颌面部恶性肿瘤约占全身恶性肿瘤的3%,虽然所占比例不高,但l大l其解剖部位特殊.涉及美观和重要的生理功能,冈此对患者机体和心理的影响不容忽视。早期(Ⅰ、Ⅱ期)口腔颌面部恶性肿瘤无论采用手术和(或)放射治疗,均能取得良好效果。但遗憾的是,大多数患者就诊时,已属局部一区域晚期(Ⅲ、Ⅳ期)。由于受到局部解剖和维持功能的限制,单纯通过扩大手术切除范围和改进现有手术技术,除能改善患者生存质量外,已无法提高此类患者的生存率,延长其生存时间。  相似文献   
17.
18.
目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假阴性出现。PCR-SSP法与血清学比较,血清学检出错误或漏检率分别为HLA-A位点23.5%,B位点26.5%。血清学发生错误或易混淆的抗原有:A2和A68、A32和A33,B5、B60和61。结论PCR-SSP法进行HLA-A、B抗原等位基因分型具有分辨率高、特异性强、重复性好、实验过程简捷快速、分型结果较血清学更加准确可靠的优点。  相似文献   
19.
人抵抗素基因cDNA的克隆   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的克隆人抵抗素基因(hRETN)cDNA,为进一步研究RETN的结构和功能提供实验基础.方法应用RT-PCR方法从中国人网膜脂肪垫总RNA中扩增出RETN 基因cDNA,克隆入载体pMD18-T中,形成重组载体pMD18-T/hRETN.通过蓝白斑筛选出阳性克隆,限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序.结果从脂肪组织总RNA中扩增得到363 bp片段hRETN基因,其cDNA序列与Genbank hRETN基因序列基本相同.结论成功地克隆中国人hRETN cDNA.  相似文献   
20.
目的:比较常用T1WI快速扫描序列在肝癌诊断中的作用。方法:肝癌患者38例,分别进行二维小角度激发(FLASH)序列、超快速扰相梯度回波(turbo-FLASH)序列、化学位移成像一同相位、反相位梯度回波二维小角度激发(in-phase&opposed-phaseFLASH,IP-&OP-FLASH)序列扫描,并进行信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR)、图像质量、病灶检出率的比较。结果:各扫描序列的SNR、CNR有统计学意义,但在图像质量、病灶检出率上无差异性。结论:二维小角度激发(FLASH)序列是肝癌诊断中最有效的扫描序列,其它序列根据情况作为补充扫描提供有效的信息。  相似文献   
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