SAG3基因在造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断中的应用

目的探讨造血干细胞移植患者弓形虫感染的快速、特异、敏感的诊断方法。方法以弓形虫SAG3基因为靶基因，采用聚合酶链反应法(PCR)对56例造血干细胞移植受者及20名正常对照者进行检测，同时以酶联免疫吸附试验(ELISA)进行弓形虫抗体IgG、IgM的血清学检测。结果以PCR和ELISA检测弓形虫SAG3基因片段和其抗原，阳性分别为10例及7例，阳性率分别为17．9％和12．5％，其中PCR检测阳性、而ELISA检测阴性的3例，经病原学检测，均证实有弓形虫感染；20名正常对照者的检测结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫SAG3基因的方法诊断弓形虫感染具有准确、快速、特异和敏感的优点，可作为造血干细胞移植患者弓形虫感染的诊断方法之一。     

妊娠妇女及新生儿TORCH感染的初步调查

TROCH是一组慢性非细菌性感染。T2弓形虫(toxoplasa)；R：风疹病毒(rubella)：C：巨细胞病毒(cy-tomegaloviras)：H：单纯疱疹病毒(herpesvims)；O2其它(梅毒螺旋体等)。孕妇感染这些病原体后，可导致流产，胎儿、新生儿感染后可导致死胎或呈现病症，引起先天性缺陷或死亡。鉴于上述情况，我们调查了唐山工人医院产科l996年5月～1997年1月孕妇及新生儿TORCH感染的情况。结果报告如下。     

弓形虫感染与儿童脑功能损害

目的：了解弓形虫感染与脑功能损害的关系。方法：对100例精神发育迟滞、100例多动症患者，及100例门诊不足疾病诊断标准的学习成绩低下和多动的儿童（边缘儿童）和71例在校正常儿童进行弓形虫抗体IgG,IgM和循环抗原CAg检测。结果：3个研究组和正常儿童对照组相比，弓形虫抗体IgG阳性率差异有显著性。结论：精神发育迟滞，多动症和边缘儿童与既往弓形虫感染有关。     

孕妇巨细胞病毒、弓形虫和细小病毒B_(19)感染与异常生育关系的研究

目的：研究孕妇感染巨细胞病毒（ＣＭＶ）、弓形虫（ＴＯ）、细小病毒Ｂ１９与异常生育的关系。方法：应用ＰＣＲ方法检测实验组２０７例怀孕及有异常妊娠史妇女的血、宫颈分泌物，流产物和羊水中ＣＭＶ、ＴＯ和Ｂ１９ＤＮＡ；对照组２１０例正常孕妇检测宫颈分泌物中ＣＭＶ、ＴＯ和Ｂ１９ＤＮＡ。结果：实验组ＣＭＶ、ＴＯ和Ｂ１９ＤＮＡ阳性率分别为１６．９１％（３５／２０７），１１．１１％（２３／２０７），和９．１８％（１９／２０７）。对照组ＣＭＶ、ＴＯ和Ｂ１９ＤＮＡ阳性率分别为５．２４％（１１／２１０）、３．３３％（７／２１０）和１．９０％（４／２１０）。两组之间有十分显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论：孕妇感染ＣＭＶ、ＴＯ和Ｂ１９与异常生育关系极为密切。     

氨基脲敏感胺氧化酶对弓形虫感染小鼠组织器官毒性作用研究

[目的]以真核单细胞微生物弓形虫为实验对象研究氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)的细胞毒性作用. [方法]通过腹腔注射和脂肪组织感染途径小鼠感染来自腹腔液传代弓形虫,6 d后,取脂肪组织制备组织切片并进行HE染色,观察脂肪组织病变及弓形虫在脂肪组织的存在情况,并采用酶联分光光度法检测小鼠脏器组织SSAO的活性.根据弓形虫P1基因设计引物,通过PCR方法检测脂肪组织、肝脏、脾脏、肺和脑各组织弓形虫的感染情况. [结果]腹腔注射组小鼠脂肪细胞病变严重,且发现有大量弓形虫存在,脂肪组织注射组小鼠非注射处脂肪组织结构基本正常,且没有检测出弓形虫感染,而其他组织器官检测到大量弓形虫感染.与其他组织器官相比较,小鼠脂肪组织中SSAO的活性最高. [结论]脂肪细胞由于表达大量SSAO其分解底物后对真核生物的细胞感染具有毒性作用,这可能与SSAO所致血管内皮细胞损伤从而引起的动脉粥样硬化的产生与发展有着内在的联系.     

关于弓形虫感染的免疫学研究及其在防治中的应用前景

弓形虫是一种广泛寄生在恒温动物有核细胞内的原虫。据国外文献记载，美国人的感染率为三分之一，欧洲高达85％，我国人群弓形虫感染抗体阳性率为5-20％。尽管大多数人呈隐性感染无临床表现，但在AIDS患者，接受骨髓及其他器官移植者，肿瘤患者或免疫力低下者，     

家有宠物,孕前需做弓形虫检查

30岁的佳佳,是当地报社的一名记者,在与老公过了3年浪漫随意慵懒的二人世界后,看着身边的同事不少都当上了妈妈,突然也想生个可爱的宝宝。跟老公一拍即合,两人兴冲冲地做起了孕前的准备:老公戒烟戒酒,佳佳锻炼身体、补充营养、调整作息时间     

PCR检测弓形虫病

弓形虫病是一种十分常见的人畜共患的感染性疾病 ,孕妇感染弓形虫 (Ｔｏｘ)后可经胎盘传染给胎儿。为探讨发病与母亲孕期长短的关系及检测方法 ,我们对 1996年至 1998年收集的195份标本 ,采用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)检测弓形虫感染[1～ 3 ] ,共检出阳性标本 5 7份 ,给临床诊断提供了参考依据 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源195份标本分别来自于广州、南海及湖南地区城乡孕妇、新生儿及 3个月以下婴儿。其中孕妇全血 5 2份 (孕期 <2 4周者17份 ,孕期≥ 2 4周者 3 5份 ) ,孕妇阴道分泌物 48份 ,其中男 49例 ,女 2 8份 ) ,另取健康 3…     

弓形虫感染与宿主细胞凋亡抑制的研究进展

病原微生物感染诱导宿主细胞凋亡是一种普遍的现象。细胞凋亡抑制为病原体的生长、增殖和在体内的扩散创造了便利的条件。本文着重从热休克蛋白、核因子 - κB、半胱天冬酶类等方面综述了弓形虫感染与宿主细胞凋亡抑制的研究进展。     

弓形虫SAG1成熟蛋白编码区基因在甲醇酵母中的初步表达

目的：分析弓形虫主要表膜蛋白SAG1在甲醇酵母高效表达系统表达的可行性。方法：在5′端和3′端引物分别引入EcoRI和SpeI酶切位点，PCR扩增SAG1成熟肽编码区基因，定向克隆到甲醇酵母分泌型表达质粒pMETαA中，构建不带6个组氨酸尾序列的重组质粒。重组质粒被PacI酶切下表达盒，氯化锂化学法转化腺嘌呤营养缺陷型毕赤甲醇酵母株PMD11和PMD16，通过腺嘌呤营养缺陷型选择培养基YPD筛选酵母重组子，并利用MM／MD选择培养板分析外源基因表达盒整合到重组酵母染色体中的方式。筛选甲醇利用野生型的重组酵母，用甲醇诱导表达，并分析SAG1的表达水平，从中筛选高表达转化子。结果：获得了经非同源重组整合到酵母染色体上的能有效利用甲醇作为唯一碳源的PMD11和PMD16转化株。在甲醇诱导后第3天，细胞裂解液SDS－PAGE检测开始出现分子量与目的蛋白预测分子量相同的蛋白带，但PMD11重组株中的该蛋白随培养时间延长而减少，而PMD16重组株中的目的蛋白量未见减少。上清中有40kDa和27kDa的两种蛋白，后的量大于前，并与SAG1成熟肽的大小一致，PMD16株的表达量大于PMD11株，总蛋白量约35μg/ml。结论：弓形虫SAG1基因可在甲醇酵母表达系统中表达，但PMD11宿主菌会降解外源蛋白，而缺失了蛋白酶的PMD16宿主菌能比较高效地表达、分泌SAG1成熟蛋白。