PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究

目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法。方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-I、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术。对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较。结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830)。经χ2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P<0.05)。结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中~高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点。PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型。     

宫内节育器3371例B超结果分析

笔者对3 371例放置宫内节育器的受术者进行了B超检查,现将结果分析如下.     

B超引导下甲氨蝶呤局部介入治疗异位妊娠的护理

近年来异位妊娠率有了明显上升，由B超和HCG的检测使未破裂异位妊娠检出率也明显提高，为保守治疗提供了更好的条件。2006年3月至2007年10月，本院实施50例B超引导下甲氨蝶呤局部介入治疗异位妊娠，40例治疗效果满意，现将护理体会总结如下。     

间日疟原虫深圳株红内期SSUrDNA基因片段的克隆与序列分析

目的 体外扩增间日疟原虫深圳株红内期小亚单位核糖体核糖核酸编码基因(SSUrDNA)片段，研究其结构与功能。方法 设计一对特异性引物，采用聚合酶链反应(PCR)从间日疟原虫患者血样中扩增出间日疟原虫SSUrDNA片段，以PUC19质粒T载体构建重组子导入大肠杆菌JM109；阳性克隆双酶切鉴定后，双脱氧末端终止法测定序列。结果 间日疟原虫SSUrDNA扩增片段大小为341bp；阳性克隆双酶切及PCR扩增均得到预期大小的片段；序列测定插入片段为341bp，与Sal I株顺序相比，仅在第151位处缺失一个碱基C。结论 成功克隆了间日疟原虫SSUrDNA片段．该序列在间日疟原虫虫株间高度保守。     

Cloning and Subcloning of cDNA Coding for Group Ⅱ Allergen of Dermatophagoides Farinae

Objective: To clone, sequence and subclone the cDNA coding for group Ⅱ allergen of Dermatophagoidesfarinae(Der f2). Methods: The cDNA gene fragment of Der f2 was amplified by RT-PCR. After being purified, the gene fragment was cloned into a vector pMD-18T. The recombinant plasmid pMD-18T-Der f2 was transformed into E. coli JM109. Positive clones were screened and identified by PCR and digested with restriction endonuclease, and the sequence of inserted Der f2 cDNA was also analyzed. Then Der f2 was subcloned into the vector of pET-32a( ). Results: The Der f2 cDNA was specifically amplified from RNA by RTPCR. The recombinant plasmid pMD-18T-Der f2 and pET-32a( ),Der f2 was constructed and digested by SacⅠ and NotⅠ, and the size of gene fragment was 455bp and in accordance with the expected one. Conclusion: The pET-32a( )-Der f2 subclone was constructed successfully.     

B超诊断联体双胎（颅部联胎）1例

1临床资料 患者33岁，孕26周，因子宫大小与妊娠月份不符，来我院就诊。     

超高龄人工股骨头置换术的麻醉处理

我院近三年来进行了19例超高龄(85岁以上)患者人工股骨头置换术，现将麻醉处理及有关经验报告如下。     

子宫动脉栓塞治疗子宫腺肌症的临床观察

目的探讨经双侧子宫动脉栓塞治疗子宫腺肌症的临床疗效及副反应.方法选择26例28～56岁的子宫腺肌症患者,以Seldinger's技术完成双侧子宫动脉超选择插管,造影证实后,用聚乙烯醇(polywnyl alcohol foam,PVA)微粒+新鲜明胶海绵颗粒进行栓塞治疗子宫腺肌症.术后每3个月随访观察其疗效.结果26例患者术后临床症状全部缓解,月经量减少,痛经消失,子宫体积明显缩小.结论双侧子宫动脉栓塞治疗子宫腺肌症是一种创伤小、临床效果好、副反应少的保守性手术.     

B超在诊断社区中老年人前列腺增生的价值分析

目的:探讨B超在诊断社区中老年人前列腺增生症的应用价值。方法:用二维超声检查360例社区中老年人的前列腺健康情况。结果:245例发现前列腺增生症,前列腺增生症检出率40～49岁组为10.5%,50～59岁组51.3%;60～69岁、70～79岁组为72.4、80.2%,≥80岁组为78.1%。结论:前列腺增生的大小、形态及内部结构超声均可显示,能够较准确地估计增生的程度及其并发症,充分体现了B超技术在社区卫生服务的应用价值。