2型糖尿病周围神经病变动物模型的建立及检测指标分析

目的通过阅读动物实验文献,对2型糖尿病周围神经病变(DPN)模型常用动物、造模方法、成模指标、适用指征等进行分析。方法通过中国知网(CNKI)、PubMed、万方数据库检索近10年内与2型DPN相关的动物实验研究文献,并对其中相关指标及数据进行统计分析。结果 2型DPN动物模型常用动物为SD大鼠,常用方法为实验诱导建模,即高能饲料喂养结合低剂量链脲佐菌素(STZ)注射;判断动物模型成模指标分为2型糖尿病成模指标及周围神经病变成模指标。2型糖尿病成模指标:空腹血糖>11.1 mmol/L或随机血糖>13.8 mmol/L、胰岛素抵抗;周围神经病变成模指标:神经传导速度降低、热痛觉及机械痛觉异常、坐骨神经形态异常、表皮神经纤维减少。结论 2型DPN动物模型通常使用SD雄性大鼠,采用高糖高脂饲料(含10%猪油、20%蔗糖)或高脂饲料(含45%～60%猪油)喂养结合低剂量STZ(25～35 mg/kg)单次腹腔注射的诱导方式,具有成模率高、死亡率低、可操作性强等优势,结合行为学、病理形态学及神经电生理学检测为综合判定指标。该研究方案适用于研究2型DPN病变早期及肥胖相关2型DPN发...     

综合性实验在组织学与胚胎学教学中的开展

为激发医学生对组织学与胚胎学的学习兴趣,增强学生的实践能力和探索精神,提高实验教学质量,同时为响应教育改革的要求,尝试在组织胚胎学实验教学融入多种综合性实验。学生对此教学模式表现出极高的兴趣和参与热情,能够提高组织胚胎学的教学质量。     

法医毒物分析实验教学多元化模式改革

法医毒物分析是法医学专业的主干课程之一,实践性强,应注重培养学生敏锐观察能力、实践探索能力及综合运用能力。在法医毒物分析实验教学中,引入仿真的案件现场、开放的实验平台和实验教具,营造一个立体化法医毒物分析实验教学模式,从而加深学生对毒物的认识,激发学生对案件的思考,完成理论知识到实践的转化。     

猪体外循环下房间隔缺损模型的建立及补片修补

  目的  探讨高成功率猪体外循环下房间隔缺损模型的建立及补片修补的方法。  方法  选用20只中华小型猪,雌雄不拘,12～13月龄,体质量45.3～55.7 kg,其中4只用于献血,16只用于造模。全麻气管插管,经右侧第四肋间进胸,导丝引导法行升主动脉插管,心包外法行上下腔静脉插管,建立体外循环,升主动脉不阻断,上下腔静脉阻断,并行循环下打开右房,于卵圆孔处预置缝线弯钳扩张法行房间隔造孔、实验补片植入。  结果  全组猪死亡1只,原因为右心耳结扎牵引暴露时根部意外撕裂出血,余15只顺利完成手术,均成功植入实验补片。1只猪术后低血压,平均压低至38 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,经使用升压药及补充容量缓解;1只猪术中心脏停搏,经心脏按摩后恢复。15只猪饲养6月,均成活。  结论  选用猪作为合适的实验动物,使用成熟规范的手术方法,能保证高成功率地建立实验模型,并成功进行补片修补。     

碘乙酸致大鼠膝骨关节炎疼痛模型的研究规律

目的 碘乙酸（Monoiodoacetic acid, MIA）注射是建立骨性关节炎（Osteoarthritis, OA）动物模型的经典方法,本研究通过大鼠双侧膝关节腔注射不同浓度MIA建立大鼠OA模型,探究不同浓度碘乙酸不同处理时间致大鼠膝骨性关节炎的模型规律。方法 将72只200g左右的清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组每组各18只。对照组双侧膝关节各注射50μl生理盐水,低剂量组每侧膝关节注射1 mg/50μl的MIA溶液（超纯水配置）50μl,中剂量组每侧注射3 mg/50μl的MIA溶液50μl,高剂量组每侧注射6 mg/50μl的MIA溶液50μl。比较注射后第1天,第1、2、3、4、5周运动功能、疼痛学改变、关节软骨病理变化及Mankind评分。结果：各实验组在造模两天后就出现轻微OA症状,造模后3周出现典型的病理、疼痛学改变,具有剂量效应和快速建模的特点。结论采取关节腔注射MIA能快速建立大鼠OA模型,并且具有剂量效应,随着剂量的加大,大鼠关节损伤越严重,在第3周至第4周时所表现骨性关节炎症状最为明显,是研究早期骨关节炎的理想模型。     

鹰嘴豆芽素A预防给药抑制心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症产生

【摘要】目的 构建心肌缺血再灌注（MIRI）损伤动物模型,观察鹰嘴豆芽素A预防给药对心肌炎性因子调节酶过氧化物酶体增殖物激活受体ɑ（PPARɑ）、细胞色素P4501A1（Cyp4501A1）、磷脂酰肌醇 3激酶（PI3K）和丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT）蛋白及mRNA表达的影响。方法 60只SD大鼠适应性喂养2周后按照随机数字法分为假手术组、模型组、雷米普利干预组、鹰嘴豆芽素A低、中和高剂量组,每组10只。灌胃给药2周后,所有大鼠均采用可逆左冠状动脉前降支结扎法构建MIRI模型,假手术组只穿线不结扎,手术后立即收集血液检测心肌酶谱和血清炎性因子含量,收集心脏检测心肌病理学、心肌炎性指标、心肌炎性因子调节酶PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA的表达。结果 心肌组织病理学可见,假手术组心肌纤维排列整齐,模型组有纤维断裂和组织坏死,与模型组相比,各治疗组均明显好转;与假手术组相比,模型组心肌酶CK MB和LDH、心肌和血清炎性因子Hs CRP、IL 1α、IL 6、IL 8和TNF α均明显升高（P＜0.05）,各治疗组相较于模型组明显降低（P＜0.05）;与假手术组相比,模型组心肌PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达水平均明显降低（P＜0.05）,而各治疗组相较于与模型组则明显升高（P＜005）。结论 鹰嘴豆芽素A预防给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子具有明显抑制作用,其作用机理可能与鹰嘴豆芽素A可调节PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达有关。     

五苓散治疗非酒精性脂肪性肝病的网络药理学研究和实验验证

[目的]探讨五苓散治疗非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)对五苓散中有效成分进行筛选及靶点预测,检索GeneCards、在线人类孟德尔遗传(online mendelian inheritance in man,OMIM)数据库筛选NAFLD疾病靶点,利用韦恩图在线平台筛选五苓散-NAFLD核心靶点,使用Cytoscape 3.7.1建立化合物-疾病-靶点调控网络,基于DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。建立NAFLD大鼠模型,五苓散干预28d后检测大鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、p53蛋白、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)表达水平,行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色以观察肝组织病理学变化。[结果]基于TCMSP得到五苓散的27个有效成分和62个潜在靶点,经筛选获得与NAFLD疾病发生、发展相关的靶点1 732个,构建韦恩图得到五苓散治疗NAFLD的核心靶点27个,GO功能富集分析主要包括脂质反应、乙醇脱氢酶活性等功能途径;KEGG通路富集分析主要包括TNF信号通路、p53信号通路、IL-17信号通路等通路途径。动物实验结果显示,五苓散可显著降低NAFLD模型大鼠血清TC、TG、LDL-C水平,亦可显著降低肝组织TNF-α、p53、IL-17表达水平,同时肝组织病理变化显著改善。[结论]五苓散治疗NAFLD具有多成分、多靶点、多通路整体调节的作用特点,经实验证实五苓散能够改善NAFLD模型大鼠血清TC、TG、LDL-C水平,其作用可能与调控肝组织TNF-α、p53、IL-17表达有关。     

ADA、TB-DNA、T-spot单用或联合检测对结核性胸膜炎早期诊断的临床意义*

目的 探究腺苷脱氨酶（ADA）、胸水结合分歧杆菌脱氧核糖核酸（TB-DNA）、结核感染T细胞斑点实验（T-spot）或联合检测在结核性胸膜炎（TBP）早期诊断的临床意义。方法 回顾性选取上虞人民医院2016年6月—2018年6月疑似TBP患者76例作为研究对象,以经皮穿刺胸膜活检确诊为TBP患者48例作为TBP组,其余非TBP胸膜炎患者28例作为非TBP组,检测并比较两组胸腔积液中ADA,TB-DNA和外周血T-spot水平。并分析单独检测和3种方法平行联合诊断的诊断效能。结果 TBP组ADA水平高于非TBP组,TBP组的TB-DNA和T-spot阳性率也高于非TBP组（P?<0.05）。ADA和TB-DNA具有较高的特异性（85.71%和96.43%）,T-spot的敏感性（81.25%）高于ADA和TB-DNA（P?<0.05）,其特异性低于ADA和TB-DNA（71.42%）（P?<0.05）。ADA+T-spot和ADA+TB-DNA+T-spot的敏感性（87.50%和91.67%）和阴性预测值（77.78 % 和82.61%）均高于ADA+TB-DNA（68.75%和62.50%）（P?<0.05）。而ADA+TB-DNA的特异性（89.29%）高于ADA+T-spot和ADA+TB-DNA+T-spot（60.71%和67.86%）（P?<0.05）。TB-DNA+T-spot、ADA+T-spot及ADA+TB-DNA+T-spot平行联合检测的曲线下面积分别为0.666（95% CI：0.614,0.879）、0.849（95% CI：0.802,0.989）和0.917（95% CI：0.831,1.000）。结论 ADA、TB-DNA和T-spot 3种方法各有特点,T-spot敏感性较好,ADA和TB-DNA特异性高,3种方法平行联合检测可提高TBP诊断的敏感性。     

疏肝消脂Ⅲ方胶囊急性毒性实验

目的:观察疏肝消脂Ⅲ方胶囊的急性毒性,为其临床用药安全提供实验依据。方法:将20只小鼠随机分为5个不同剂量组,每组4只,雌雄各半,分别为128.23 mg·kg~(-1)组、276.27 mg·kg~(-1)组、595.20 mg·kg~(-1)组、1 282.32 mg·kg~(-1)组、2 762.67 mg·kg~(-1)组。用生理盐水将疏肝消脂Ⅲ方胶囊配制成混悬液进行灌胃给药,24 h内灌胃3次,最后1次给药后连续观察14 d,记录小鼠的体质量、一般情况、中毒症状与死亡情况。另将40只小鼠随机分为疏肝消脂Ⅲ方胶囊组及空白对照组,每组20只,雌雄各半。疏肝消脂Ⅲ方胶囊组根据小鼠灌胃可承受的最大体积给予最大剂量疏肝消脂Ⅲ方胶囊,对照组给予等量生理盐水灌胃,24 h内灌胃3次,给药后连续观察14 d,记录小鼠的一般情况、体质量、中毒表现等。结束观察期后采用颈椎脱臼法处死并解剖小鼠,肉眼观察其主要脏器是否发生病变,采血测定其血液学指标,计算主要器官脏器系数,进行组织病理学观察。结果:5个剂量组小鼠均无中毒及死亡现象,无法测出疏肝消脂Ⅲ方胶囊的半数致死量。疏肝消脂Ⅲ方胶囊组与空白对照组小鼠,给药前后一般情况良好,进食、饮水量无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。疏肝消脂Ⅲ方胶囊组与空白对照组比较,给药前、给药后第3天、第6天、第9天、第12天及第14天的体质量无显著变化,差异无统计学意义(P0.05)。疏肝消脂Ⅲ方胶囊组与空白对照组比较,小鼠血液学指标无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。疏肝消脂Ⅲ方胶囊组与空白对照组比较,小鼠主要脏器的脏器系数均无显著变化,差异均无统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,疏肝消脂Ⅲ方胶囊组小鼠各脏器组织病理切片均未发现异常病理学改变。结论:疏肝消脂Ⅲ方胶囊对小鼠的进食、饮水量、体质量及主要脏器无明显毒性反应,急性毒性反应低,临床常用药物剂量安全可靠。     

黄豆中总黄酮提取及不同豆类抗氧化活性研究

目的:以黄豆中的总黄酮含量变化作为指标,正交试验来优化超声的提取条件,并且在最佳提取条件下测定黑豆、黄豆、绿豆、红豆的抗氧化活性。方法:本实验以超声时间、温度、液固比、乙醇浓度为考察因素,通过单因素和正交实验确定最佳提取条件,利用紫外分光光度计测定提取液中总黄酮含量,最后在最佳条件下采用DPPH法测定其抗氧化活性。结果:黄豆中总黄酮最佳提取条件为超声时间20 min、温度70℃、液固比75 mL/g、乙醇浓度80%。4种豆中总黄酮含量分别为黄豆24.31 mg/g、红豆31.20 mg/g、绿豆10.94 mg/g、黑豆32.70 mg/g。抗氧化活性分别为维生素C IC50值0.0014、黄豆IC50值0.2041、红豆IC50值0.0098、绿豆IC50值0.2110、黑豆IC50值0.0078。结论:得出总黄酮含量及抗氧化活性均为黑豆红豆黄豆绿豆,为豆类总黄酮和抗氧化活性的研究提供了最基础的信息。