大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植的实验研究

Objective To investigate a novel method of adrenocotical cells transplantation. Methods Adrenal glands of neonate rats were dissociated into adrenal cortical cells. Cells were cultured in self-made collagen type Ⅰ gel for one week, and then transplanted under the renal capsule of bilateral adrenalectomy mate rats. Blood samples were collected per week after surgery. Animals were sacrificed at the 8th week, and histological characteristics of the allografts, proliferation of transplanted cells, CYP11B1 and CYP11B2 expression as well as plasma aldosterone and corticosterone were observed. Results There were totally 15 rats receiving collagen gel transplantation, and 12 survived 8 weeks post-operation. The plasma cortocosterone level in collagen gel transplantation group was significantly higher than in adrenocortical cell transplantation group, and reached the normal level from 6th to 8th week, but the change in plasma aldosterone level in collagen gel transplantation group was similar to that of adrenocortical cell transplantation group. The adrenocortical cells cultured in gel grew well, and had a high proliferation rate. 95% of them were fasciculata cells which expressed CYP11B1, and the rest were glomerulosa cells which expressed CYP11B2. No inflammatory cell infiltration was observed. Conclusion The proliferation and function of adrenocortical cells could be promoted when they were cultured in collagen gel.     

组织工程化表皮膜片构建及其在供皮区的应用研究

目的构建组织工程化表皮细胞膜片并应用于供皮区创面治疗。方法利用患者少量自体或同种异体正常皮肤分离、培养、扩增的表皮细胞,接种于壳聚糖明胶膜构建成表皮细胞膜片;将膜片移植于治疗组供皮区创面、适度加压,同时设立对照组:空白材料对照以及传统油纱布对照覆盖创面。于术后5～10d、30d、90d行大体观察、组织学检查、广谱角蛋白、外皮蛋白、层粘连蛋白、免疫组织化学检测以及Ⅰ、Ⅲ型胶原比值测定(偏光显微镜、RTPCR)。结果利用自体及异体表皮细胞和壳聚糖明胶膜能够构建出人表皮细胞膜片,应用于临床供皮区创面治疗15例,经过3个月随访,疗效肯定。移植膜片创面愈合时间(8.1±1.3)d,空白材料对照区为(16.2±3.8)d,空白油纱布对照区为(23.0±5.8)d。移植膜片存活良好,结构较完整、术后30d及90d观察:12例无明显增生,3例有轻度增生(20.0%),而空白油纱布对照区11例遗留增生性瘢痕(74.4%,χ2=8.127,P<0.01)。结论表皮细胞-壳聚糖明胶膜片能促进供皮区创面早期愈合并减少后期瘢痕增生,具有良好治疗效果。     

高龄并血象低下患者肾移植5例临床分析

2001年1月至2003年3月，对5例60岁以上尿毒症同时伴有血象低下患者，行同种异体肾移植术，取得了满意的效果，现总结报道如下。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿1例报告

目的　探讨异基因造血干细胞移植治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿 (PNH)的疗效。　方法　采用 HL A配型完全一致的同胞的外周血造血干细胞 ,减量的 BU CY方案处理。　结果　移植后第 1 5天外周血中性粒细胞 >1 .0× 1 0 9L- 1 ,第 2 5天血小板 >2 0× 1 0 9L- 1 ,第 5 0天骨髓造血完全恢复 ,未出现严重的并发症和移植物抗宿主反应。结论　异基因外周血造血干细胞移植是治疗 PNH的有效方法。     

同种异体组织工程化软骨组织的生化分析

目的以胚胎来源的关节软骨细胞,体内构建同种异体组织工程化软骨组织,分析其与正常关节软骨组织糖胺多糖(GAG)和Ⅱ型胶原含量的差异.方法以酶消化法分离胚胎(100 d)山羊关节软骨细胞,与生物材料聚环氧乙烯复合,并植入异体成年山羊腹部皮下.按不同时间段取材, Western-blot、MTT比色法分析测定其GAG和Ⅱ型胶原含量,并与正常关节软骨组织比较.结果新生软骨中GAG的含量比正常关节软骨显著下降(P<0.01),而II型胶原含量与正常关节软骨无显著性差异.结论胚胎来源的同种异体组织工程化软骨与正常关节软骨有着相同的生化成分,且新生软骨中II型胶原的含量与正常关节软骨接近.     

用胎儿硬脑膜行鼓膜成形术31耳报告

采用同种异体胎儿硬脑膜材料行鼓膜成形术31耳(28人),随访3周至1年11个月,现报告如下: 移植材料的处理 人工流产(水囊引产)胎儿,12小时内取出硬脑膜,生理盐水洗净血迹,浸入70％乙醇内0～4℃冰箱内保存二周左右。临用前取出置生理盐水中浸泡30分钟,晾干备用。 一般资料 共做31耳,男20耳,女11耳.年龄15—43岁。鼓膜穿孔小于1/2者2耳,大于1/2者29耳。术前干耳1月以上。全部病例听力曲线均为传导性聋,且无手术禁忌症。31耳中,28耳采用WullsteinⅠ型,3耳用大鼓室Ⅲ型手术。采用内植法3耳,外植法15耳,夹层法13耳。     

应用同种动脉治疗主动脉根部病变

报告５例采用同种动脉（ＨＡＶ）治疗５例主动脉根部病变（主动脉瓣狭窄１例，关闭不全４例）。男３例，女２例；年龄１３～４７岁。病因为细菌性心内膜炎２例（包括先天主动脉瓣二瓣化畸型１例），Ｍａｒｆａｎ综合征２例，风湿性主动脉瓣关闭不全１例。术中采用同种主动脉全根置换３例（Ｂｅｎｔａｌｌ手术），其中１例用ＨＡＶ上的二尖瓣前叶加宽主动脉瓣环（Ｍａｎｏｕｇｕｉａｎ手术），余２例用自体肺动脉移置主动脉根部，另取同种肺动脉做原位移置（Ｒｏｓｓ手术）。结果死亡１冽，４例存活，且无并发症发生。术后超声心动图提示主动脉根部良好，无主动脉瓣反流。随访２．５～３．５年疗效满意。     

温缺血时间与同种心脏瓣膜细胞活性的关系

以１０具脑外伤死亡的健康男性的心脏的６０个同种主动脉、肺动脉瓣叶分为６组进行实验。经不同的温缺血时间灭菌并经过３个月的液氮深低温保存后，通过流式细胞计数测定细胞活性，同时行组织块贴壁培养及电镜观察。结果表明：温缺血时间在１２小时以内，细胞活性为９３．４９±２．３５％，较对照组无明显下降。灭菌２４小时，细胞活性为８９．８２±３．５２％，较对照组明显下降，Ｐ＜０．０１，并且可见形态上改变；冷冻后细胞活性进一步下降，但下降幅度减低，冻存３年后活细胞仍占８０％。结论为：温缺血时间对细胞活性有影响，时间延长与活性的下降成正相关。因此温缺血时间应控制在１２小时以内。     

带血管甲状腺-甲状旁腺移植术5例报告

用带血管的胎儿甲状旁腺移植术治疗甲状旁腺机能低下症,共行手术6次(腹腔内移植5次,股三角区移植1次),6次中有3例术后发生4次排斥反应。经1年8月至3.5年随防,疗效显著者2例,有效2例,失败1例。本文讨论了有关甲状旁腺移植的手术方法、注意事项、免疫抑制剂应用等问题。     

低温保存同种心脏瓣膜活性及临床应用的研究

取正常成人心脏瓣膜３６个，置于低浓度广谱抗生素的营养液（ＲＰ－ＭＩ１６４０细胞培养液）中灭菌４８ｈ，－８０℃冰箱初冻，置于液氮中长期保存。灭菌前后瓣膜细菌培养阴性率分别为９４．３％和１００％，解冻后经光镜、电镜检查证实瓣组织细胞结构正常，组织培养葡萄糖消耗率测定示瓣组织存活良好。临床同种心脏瓣膜原位移植３例，随访６～３０个月，瓣功能良好