多位点酶电泳法(ET)用于我国A群脑膜炎奈氏菌的分型及流行病学意义

应用多位点酶电泳(ET)分型法从我国183株A群脑膜炎奈氏菌中分出24个ET型,其中ET₃、ET₁₃为70年代以来在我国引起流脑流行的优势型别。在不同的流行期中优势型别不相同。每一次流行只和一个ET优势型别有关。在流行间歇期,存在许多地方性的ET型别的菌株引起的发病和健康带菌者。     

精神分裂症多基因遗传位点的筛检

项目名称 :精神分裂症多基因遗传位点的筛检项目来源 :国家自然科学基金 (39970 16 5 )项目负责人 :尉军、于雅琴 (130 0 2 1长春 ,吉林大学公共卫生学院 )起止时间 :2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 2年 12月　　精神分裂症 (精分症 )是人类最常见的精神性疾患之一。在中国 ,精分症的终身患病率高达 0 .7%左右 ,不仅给家庭和社会带来沉重的经济负担 ,而且还严重威胁社会的安全与稳定。可见 ,确定其病因从而达到防治是医学界乃至整个社会需迫切解决的问题。遗传流行病学研究证实 ,精分症与遗传因素有密切关系 ,但不符合经典的孟德尔单基因遗传规律 ,…     

HBV转录后调节序列变异位点的生物学意义初探

探讨HBV转录后调节序列位点变异与细胞因子介导的非细胞毒抗HBV机制的关系。应用定点突变技术,体外构建含有HPRE位点变异的重组质粒载体,观察位点变异对HPRE功能以及细胞因子抗HBV机制的影响。经测序证实,成功构建了含有HPRE变异位点的重组质粒载体。与野生株比较,1504nt突变株的CAT活性明显升高,差异有显著性意义;1508nt突变株则无明显变化。在IFN-γ或（和）TNF-α作用下,3种突变株的CAT活性均明显下降,在IFN-α作用下,1504nt突变株和1504+1508nt突变株的CAT表达活性明显降低,差异有显著性意义（P<0.01）;而1508nt突变株的CAT表达活性无明显变化（P>0.05）。提示HPRE1504nt位点的变异可能影响HPRE功能的发挥,而1508nt位点的变异可能逃逸了IFN-α的抑制作用。     

1例嵌合型Klinefelter综合征患者细胞与分子遗传学研究

目的:观察嵌合型Klinefelter综合征的外周血染色体、Y染色体上SRY基因和AZF基因微缺失发生情况。方法:对1例嵌合型Klinefelter综合征患者及父母进行外周血染色体核型分析,确定9个实验用序列标签位点(STS),分别是:sY84、sY86、sY127、sY129、sY134、sY254、sY255、sY242、sY152,同时检测SRY基因,并以X/Y连锁锌指蛋白基因(ZFX/ZFY)为内对照进行多重PCR筛查AZF微缺失。结果:患者核型为46,XY/47,XXY/48,XXYY/49,XXXXY,其中48,XXYY占56%;47,XXY占30%;46,XY占12%;49,XXXXY占2%,患者父母核型正常;患者及父母SRY基因检测与染色体性别一致,患者检出Y染色体AZF微缺失,缺失位点为sY86和sY127,缺失类型为AZFa+AZFb缺失。结论:Klinefelter综合征患者存在Y染色体AZF微缺失,染色体核型分析和Y染色体AZF微缺失是Klinefelter综合征患者重要的遗传检测指标。     

COL4A5基因c.4518_c.4519insC新突变所致X连锁显性遗传Alport综合征的分子遗传学及临床分析

目的通过对胶原蛋白Ⅳ型α5链（collagen type Ⅳ α 5 chain,COL4A5）基因进行分析,为1例X-连锁性遗传性Alport综合征家系的分子诊断和遗传咨询提供依据。探讨Alport综合征COL4A5基因移码突变谱及临床表型。方法应用全外显子组测序技术进行基因检测,应用Sanger测序法对候选致病变异进行验证。结果病人肾损害渐进展,出现肉眼血尿、肾病综合征,抗感染治疗后蛋白尿及肉眼血尿可缓解。先证者肾脏病理活检:病理表现为基底膜厚薄不一,致密层增厚,部分呈撕裂状和蛛网状。高通量测序和一代测序结果均提示病人COL4A5基因49号外显子存在c.4518_c.4519 insC（p.Gln1507Profs*14）的杂合变异;病人父母均不携带该变异。结论首次报道了COL4A5基因该位点的新生变异为病人的发病原因,丰富了COL4A5基因变异谱,为该X-连锁性遗传性肾炎家系的分子诊断及产前诊断提供了依据;对指导家族中母亲及女儿再生育,通过产前基因诊断或胚胎植入前遗传学诊断技术,阻断该疾病有重要意义。     

BAG3蛋白ser187位点磷酸化与胶质瘤发生发展的相关性研究

目的:观察BAG3蛋白在胶质瘤中的表达,及其ser187位点磷酸化与胶质瘤间的相关性。方法:收集胶质瘤组织标本,进行分子生物学实验,观察BAG3蛋白在胶质瘤组织中的表达情况及BAG3蛋白ser187位点磷酸化对细胞侵袭的影响。结果:(1)IHC:BAG3在Ⅳ级胶质瘤组织表达显著高于正常脑组织及Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤组织(P<0.05)。(2)Western Blot:BAG3蛋白在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级别胶质瘤表达量,显著高于正常脑组织(P<0.05),且相对于Ⅱ级胶质瘤,在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中表达显著增高(P<0.05),而在Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤组织中表达量之间无显著性差异(P>0.05)。(3)三维Matrigel transwell转移小室实验,S187A-BAG3蛋白过表达U87细胞侵袭Matrigel模拟基质膜的细胞数显著高于U87细胞和S187D-BAG3过表达U87细胞。结论:BAG3蛋白胶质瘤组织中表达量高,且在Ⅳ级胶质瘤组织中,BAG3蛋白的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ级及正常脑组织,且S187位点磷酸化能抑制U87细胞的侵袭。     

丽水市中心医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的明确丽水市中心医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征,为临床抗感染治疗提供实验依据。方法收集2011年3月至2015年10月丽水市中心医院分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌（CR-KP）。采用Vitek2-compact系统鉴定菌株并联合纸片扩散法（K-B法）检测其药敏,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR法扩增KPC基因,测序后利用BLAST比对确定基因型;肠杆菌科基因间重复序列分型法（ERIC-PCR）联合多位点序列分型（MLST）鉴定菌种同源性;进而探讨产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征。结果共收集到70株CR-KP,其中68株改良Hodge试验阳性,扩增产物测序结果均为blaKPC-2基因。ERIC-PCR结果显示,70株KPC型肺炎克雷伯菌分为A、B、C、D、E5个克隆群分别为63株(90.0%)、3株、2株、1株、1株;MLST分成6个ST型,其中ST11型63株（90.0%),ST35型2株,ST1型2株,ST592、ST1883、ST494型均1株。结论丽水市中心医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的主要克隆群为ST11型,是我院流行感染的主要原因。     

γ干扰素基因多态性在子痫前期患者中的表达及对妊娠结局的影响

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)基因多态性在子痫前期患者中的表达及对妊娠结局的影响。方法 选择2017年6月至2018年10月承德市中心医院子痫前期患者71例为试验组,选择同期健康孕检的妊娠患者69例为对照组。两组入院后均取外周静脉血3 m L,血清分离后采用单碱基延伸法PCR扩增IFN-γ基因SNP位点;利用单碱基延伸法分析IFN-γ基因5个SNP位点的基因型;采用酶联免疫吸附试验测定两组不同基因型下IFN-γ水平;记录两组胎死宫内、新生儿窒息、新生儿透明膜病、肝功能损害、急性心衰及DIC发生率。结果 试验组子痫前期患者SNP基因位点rs2069705、rs1861493、rs2193050、及rs2069718基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05);试验组子痫前期患者SNP基因位点rs2430561基因频率高于对照组(P<0.05);试验组rs2430561中A等位基因频率低于对照组(P<0.05);试验组rs2430561中T等位基因频率高于对照组(P<0.05);试验组TT、AT、AT+AA基因位点下IFN-γ水平高于对照组(P<0.05);试验组子痫前期患者胎死宫内、新生儿窒息、新生儿透明膜病、肝功能损害、急性心衰及DIC发生率均高于对照组(P<0.05)。结论 IFN-γ基因中rs2430561位点是子痫前期的易感基因位点,并且TT基因型下患者血清γ干扰素呈高表达,能影响患者妊娠结局。     

福建省两个汉族瘢痕疙瘩家系与染色体18q21．1的连锁分析

目的：探讨福建省两个汉族瘢痕疙瘩家系是否与18q21．1存在连锁关系。方法：收集来自福建省不同地区的两个汉族瘢痕疙瘩家系,分别命名为A和B家系,从中选出26名具有较高遗传学研究意义的成员作为研究对象,采集他们的外用静脉血样,提取基因组DNA。设定与瘢痕疙瘩形成关系密切的SMAD2、SMAD4、SMAD7及PIAS2基因为导致家系发病的候选基因,选取这些基因所在的染色体18q21．1区域内与其紧邻的微卫星标记D18S1312、D18S1327、D18S547、D18S1291;对这些微卫星位点进行PCR扩增,产物片断基因分型和连锁分析。结果：A家系微卫星标记D18S1291LOD。为0．89,D18S1312LODZMX。为0．82,D18S547LODZMX为0．75,可以排除连锁：在0=0．0～0．10时,D18s1327标记的所有LOD值都小于-2,排除连锁。B家系微卫星标记DI8S1291LODⅢ为0．84,D18S1312LODM为0．78,D18S547LODZMX为0．63,可以排除连锁;在O=0．0～0．10时,D18S1327标记的所有LOD值都小于一2,排除连锁。结论：本研究提示这两个来自福建的汉族瘢痕疙瘩家系的易感基因位点不在染色体18q21．1区域。