重症肌无力患者周围血中CD4+T淋巴细胞亚群的研究

目的研究ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞的功能亚群在重症肌无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）发病中的作用。方法采用免荧光双标记技术和流式细胞仪对３９例ＭＧ患者和１８例健康对照者周围血中ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞的两个亚群（ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ－）的百分率进行测定。结果ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ＋亚群的百分率在ＭＧ组和ＡＣｈＲＡｂ阳性组明显低于对照组和ＡＣｈＲＡｂ阴性组；而ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ－细胞的百分率在ＭＧ组和ＡＣｈＲＡｂ阳性组显著高于对照组和ＡＣｈＲＡｂ阴性组。结论表明ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞的两个功能不同亚群在ＭＧ患者体内发生了异常改变，与ＡＣｈＲＡｂ的产生有关。     

茶树油微囊乳液对水蛭的驱避效果研究

  目的  将茶树油制备成微囊乳液, 评价其对水蛭的驱避效果并阐明驱避机理。  方法  以吐温20作为增溶剂制备茶树油水溶液。司盘80作为乳化剂制备得茶树油乳液,以明胶、海藻酸钠作为囊材,采用复凝聚法制备茶树油微囊,对微囊的粒径、形貌及结合方式等进行表征。将微囊分散到茶树油乳液中即得茶树油微囊乳液。采用滤纸圈法、水中驱避试验考察比较茶树油微囊乳液、茶树油水溶液、空白微囊及阳性药物驱蚊酯对日本医蛭在不同环境中的驱避作用及茶树油微囊乳液的驱避时长。以体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽S转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)活性变化为指标,阐明茶树油微囊乳液对水蛭的驱避机理。  结果  优化得到复凝聚产率较高的明胶与海藻酸钠最佳配比处方,成功制备粒径分布不均一、包封率较高的微囊。根据正交设计筛选出最优处方,制备得分散均匀、稳定均一茶树油微囊乳液。药效学实验表明其驱避时间长、驱避效率高。茶树油微囊乳液通过提高水蛭体内AchE活性、抑制GST及CarE活性发挥驱避作用。  结论  茶树油微囊乳液可避免茶树油挥发, 延长驱避水蛭的有效作用时间, 为天然精油作为驱避剂研发提供新思路, 具有广阔的市场前景。      

益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍大鼠的干预效应

目的：观察益智仁水提取物对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍的改善效果。方法：实验于2005—03／04在大连大学医学院动物室和神经科学实验室完成。选择健康成年Sprague—Dawley纯种大鼠50只，在温度为（22&;#177;3）℃的环境中适应两天后，随机数字表法分成对照组、模型组、益智仁低剂量组（120mg／kg）、益智仁中剂量组（240mg／kg）、益智仁高剂量组（480mg／kg）．每组10只，雌雄各半。益智仁低、中、高剂量组，每天分别灌胃120mg／kg、240mg／kg、480mg／kg益智仁水提取物，对照组和模型组灌胃等量的生理盐水，连续给药21d。末次给药后1h采用Y迷宫进行学习记忆行为训练，训练前15min模型组及益智仁低、中、高剂量组腹腔注射东莨菪碱1mg／kg，对照组腹腔注射等体积生理盐水，每只动物每天训练20次，连续训练7d，以正确反应率达到90％作为学会的标准，并记录各组的训练次数（达到学会标准所需的次数）。行为实验结束后，立即麻醉后断头处死大鼠，在冰块上快速分离双侧海马，准确称重，按重量体积比加9倍生理盐水制成10％脑组织匀浆，2000r／min离心10min，采用乙酰胆碱酯酶测定试剂盒测定乙酰胆碱酯酶活性，采用双缩脲蛋白测定试剂盒测定海马脑蛋白含量，主要观察Y迷宫行为实验各组大鼠达标所需的训练次数、海马乙酰胆碱酯酶活力及海马脑蛋白含量。数据以x^-&;#177;s表示，组间比较采用t检验。结果：各实验组大鼠全部进入结果分析。①益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠学习记忆能力的影响：益智仁低、中、高剂量组达标所需训练次数显著低于模型组[（58．6&;#177;15．0，55．0&;#177;13．8，67．6&;#177;8．7）次，（136．3&;#177;16．8）次，（P〈0．01）]，模型组大鼠达标所需训练次数显著高于对照组（P〈0．01）。②益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马乙酰胆碱酯酶活力的影响：益智仁低剂量组和中剂量组海马乙酰胆碱酯酶活力显著低于模型组[（28．5&;#177;9.3，22．2&;#177;7．2）μkat／g，（47．2&;#177;18．8）μkat／g，（P〈0．05）]；模型组海马乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照组（P〈0．05）。③益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马脑蛋白含量的影响：与模型组相比，益智仁低剂量组、中剂量组脑蛋白含量显著增高（P〈0．05）；与对照组相比，模型组大鼠海马脑蛋白含量显著降低（P〈0．05）。结论：益智仁水提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性，减少乙酰胆碱分解，提高海马脑蛋白含量，对东莨菪碱所致记忆获得障碍具有显著的改善作用。     

益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍大鼠的干预效应

目的:观察益智仁水提取物对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍的改善效果。方法:实验于2005-03/04在大连大学医学院动物室和神经科学实验室完成。选择健康成年Sprague-Dawley纯种大鼠50只,在温度为(22±3)℃的环境中适应两天后,随机数字表法分成对照组、模型组、益智仁低剂量组(120mg/kg)、益智仁中剂量组(240mg/kg)、益智仁高剂量组(480mg/kg),每组10只,雌雄各半。益智仁低、中、高剂量组,每天分别灌胃120mg/kg、240mg/kg、480mg/kg益智仁水提取物,对照组和模型组灌胃等量的生理盐水,连续给药21d。末次给药后1h采用Y迷宫进行学习记忆行为训练,训练前15min模型组及益智仁低、中、高剂量组腹腔注射东莨菪碱1mg/kg,对照组腹腔注射等体积生理盐水,每只动物每天训练20次,连续训练7d,以正确反应率达到90%作为学会的标准,并记录各组的训练次数(达到学会标准所需的次数)。行为实验结束后,立即麻醉后断头处死大鼠,在冰块上快速分离双侧海马,准确称重,按重量体积比加9倍生理盐水制成10%脑组织匀浆,2000r/min离心10min,采用乙酰胆碱酯酶测定试剂盒测定乙酰胆碱酯酶活性,采用双缩脲蛋白测定试剂盒测定海马脑蛋白含量,主要观察Y迷宫行为实验各组大鼠达标所需的训练次数、海马乙酰胆碱酯酶活力及海马脑蛋白含量。数据以x±s表示,组间比较采用t检验。结果:各实验组大鼠全部进入结果分析。①益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠学习记忆能力的影响:益智仁低、中、高剂量组达标所需训练次数显著低于模型组(58.6±15.0,55.0±13.8,67.6±8.7)次,(136.3±16.8)次,(P<0.01),模型组大鼠达标所需训练次数显著高于对照组(P<0.01)。②益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马乙酰胆碱酯酶活力的影响:益智仁低剂量组和中剂量组海马乙酰胆碱酯酶活力显著低于模型组(28.5±9.3,22.2±7.2)μkat/g,(47.2±18.8)μkat/g,(P<0.05);模型组海马乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照组(P<0.05)。③益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马脑蛋白含量的影响:与模型组相比,益智仁低剂量组、中剂量组脑蛋白含量显著增高(P<0.05);与对照组相比,模型组大鼠海马脑蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论:益智仁水提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性,减少乙酰胆碱分解,提高海马脑蛋白含量,对东莨菪碱所致记忆获得障碍具有显著的改善作用。     

重度有机磷农药中毒的抢救治疗体会

有机磷农药对人的毒性主要是对乙酰胆碱酯酶的抑制，引起乙酰胆碱的蓄积，使胆碱能神经受到持续冲动，导致先兴奋后衰竭的一系列毒蕈碱样、菸碱样和中枢神经系统等症状；严重者可因昏迷和呼吸衰竭而死亡。有机磷毒物引起的急性中毒是临床上的急症，在抢救治疗上必须采取有力的综合措施：①要反复有效的洗胃，防止继续中毒，彻底清除胃黏膜皱襞内夹杂的毒液和被毒液渗透的食物残渣，减少毒液的吸收。并且可清除一部分血液里通过胃黏膜渗透入胃腔的毒物；②同时迅速建立静脉通道，给予足量的抗毒持效药物。解磷定是胆碱酯酶复活剂。肟类化合物能使被抑制的胆碱酯酶恢复活性。     

用乙酰胆碱酯酶的组织化学定位法对怡乐村并殖吸虫神经系统的观察

应用乙酰胆碱酯酶定位技术对怡乐村并殖吸虫后尾蚴、不同发育时期的童虫及成虫神经系统进行整体染色观察。结果表明:后尾蚴体内仅具有两个孤立的神经节。而童虫和成虫体内神经系统的发育顺序为:两个中枢神经节由粗大的神经连合连接,并向后伸出一对后腹神经干,向前伸出二对前腹和咽神经干,向后伸出后侧和后背二对神经干,从中枢神经节向前伸出二对前背和前侧神经干与前腹神经干汇合于口吸盘处形成神经网,从后腹神经干也伸出分支入腹吸盘,在后行的3对神经干中,以后腹神经干最粗大,并在体后1/5处汇合,另二对则在体后部逐渐变细消失。在后3对神经干间,有横向神经纤维相连。在腹侧,横向纤维间有纵行分支伸出相连,构成神经网。     

乙酰胆碱受体抗体与全身型重症肌无力手术预后的关系

目的比较乙酰胆碱受体抗体(ACh R-Ab)阳性全身型重症肌无力(MG)与ACh R-Ab阴性全身型MG患者胸腺切除术的疗效。方法将124例于胸外科接受胸腔镜胸腺扩大切除术的全身型MG患者,根据术前血清ACh R-Ab表现,分为ACh R-Ab阳性组(81例)和ACh R-Ab阴性组(43例),比较两组患者的完全稳定缓解率。结果两组患者的性别、手术时年龄、术前病程、首发症状及胸腺病理类型等基本情况组间比较差异无显著性。术后ACh R-Ab阳性组失访1例,阴性组失访2例,共完成随访121例患者,随访时间15~84个月,其中ACh R-Ab阳性组80例,随访(44.9±19.9)个月,ACh R-Ab阴性组41例,随访(48.2±20.3)个月。术后完全稳定缓解率ACh R-Ab阳性组(48.8%)显著高于ACh R-Ab阴性组(26.8%),χ2=5.372,P=0.020。术后总有效率ACh R-Ab阳性组为95.0%,ACh R-Ab阴性组为90.2%,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.993,P=0.319)。完全稳定缓解率的Kaplan-Meier生存曲线提示,随着术后随访时间的延长,完全稳定缓解率逐渐升高;Log-rank法比较两组之间的完全稳定缓解率均逐渐升高(P=0.03)。结论血清ACh R-Ab阳性患者胸腺扩大切除术后完全稳定缓解率优于ACh R-Ab阴性患者,随着随访时间的延长,完全稳定缓解率逐渐升高,但两组患者的总有效率类似。     

α3β2与α3β4烟碱型乙酰胆碱受体α和β亚基不同配比的药理活性研究

目的:比较α和β亚基不同配比形成α3β2和α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)敏感性的差异。方法:体外转录获得α和β亚基的cRNA,采用显微注射将3种不同配比(α∶β分别为1∶10、1∶1和10∶1)的cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压钳检测受体表达情况。利用激动剂乙酰胆碱(ACh)和拮抗剂α-芋螺毒素Reg IIA(α-CTx Reg IIA)检测在3种配比条件下形成受体药理活性的差异。结果:对于α3β2 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的半数有效浓度(EC50)分别为91.2μmol/L、104.4μmol/L和130.6μmol/L,α-CTx Reg IIA的半数抑制浓度(IC50)分别为40.2 nmol/L、36.4 nmol/L和42.3 nmol/L。对于α3β4 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的EC50分别为44.0μmol/L、110.0μmol/L和230.0μmol/L,α-CTx Reg IIA的IC50分别为226.8 nmol/L、71.5 nmol/L和49.4 nmol/L。结论:α3和β4亚基比例的改变会导致α3β4 nAChR结构和药理活性的改变。α3和β2亚基比例的改变对α3β2 nAChR结构和活性没有影响。     

美国神经性毒剂救治研究进展

神经性毒剂除了在早期抑制乙酰胆碱酯酶（ AChE）外,也导致长期的进行性神经炎和迟发神经退行性病变。近年来,美国国立卫生研究院资助了多项神经性毒剂中毒机制和治疗药物的研究,旨在快速高效对抗神经性毒剂急性中毒及远后效应。正在研制的治疗药物主要包括AChE靶向药物、广谱重活化剂和生物清除剂、抗炎及神经保护药。     

αB-芋螺毒素VxXXIVA与α9α10乙酰胆碱受体结合特性的研究

αB-芋螺毒素VxXXIVA（αB-VxXXIVA）是我们从海南产菖蒲芋螺（Conus vexillum）中发现的一个新超家族毒素肽,是α9α10乙酰胆碱受体（nAChR）亚型的特异阻断剂。αB-VxXXIVA仅含有简单的4个半胱氨酸模式（C1-C2C3-C4）,其活性最强异构体的二硫键连接方式是Cys1-Cys2和 Cys3-Cys4。存在于外周神经系统中的α9α10 nAChR是治疗神经痛、癌症化疗、乳腺癌和肺癌的新靶点,具有很重要的临床意义。具有独特结构的αB-VxXXIVA与α9α10 nAChR之间的结合特性尚不清楚。为此,本文对αB-VxXXIVA与α9α10 nAChR受体之间的结合位点和电压依赖性进行了研究。发现它与具有竞争性结合特性的α-芋螺毒素的结合位点有部分重叠,但又完全不相同,是一个新的微位点,其结合活性随膜电压的升高而不会改变,不具有电压依赖性。该研究结果将为αB- VxXXIVA作为工具药开发、α9α10 nAChR受体结构与功能的研究、以及基于该受体为药靶的药物设计提供理论基础。