Human myeloma light chains with increased molecular weight: high frequency among lambda chains

The discovery of a human myeloma protein comprising a kappa L-chain with an increased mol. wt of 30,000) (Bouvet et. al., 1980) prompted investigations on the incidence of such heavier L-chains among other human myeloma proteins. In 105 samples examined, 34 were found to have L-chains heavier than normal (23,000-24,000), ranging from 25,000 up to 31,000, and five of lighter mol. wt (21,000-22,000). These mol. wt abnormalities were detected by electrophoresis in sodium dodecyl sulfate 10% polyacrylamide gels (SDS-PAGE) after reduction with 2-mercaptoethanol. The mol. wt of three of the heavier kappa or lambda chains was also estimated by filtration through a Sephadex G100 column and by sedimentation equilibrium. All three methods indicated a mol. wt increase of about 15-25% as compared with the usual mol. wt. The distribution of the high mol. wt chains among all L-chains examined was found to be 11 out of 62 kappa chains (17.7%) and 23 out of 43 lambda chains (53%) (P less than 0.001). A preferential association of such L-chains with H-chains producing multiple bands in SDS-PAGE (P less than 0.01) and an association between multiple L-chain and multiple H-chain band (P less than 0.05) were also observed. In contrast, no abnormal L-chain was found in immunoglobulins from normal subjects. Spontaneous degradation of the normal H-chains sometimes yielded fragments of 30,000 mol. wt. These fragments were easily distinguishable from abnormal L-chains. The nature of extra mol. wt in heavy L-chains was investigated for the presence of carbohydrate moiety. Four large and three normal size L-chains were examined for amino-sugar and sialic acid content. A small amount (one residue per molecule) of amino-sugar was detected only in two normal and two heavy L-chains, whereas sialic acid was only found in the heaviest (27,000-30,000) L-chains (Lh) and in small percentage (one or two residues per molecule). Total sugar estimation in one Lh chain indicated a proportion not exceeding three or four residues per L-chain (mol. wt 1,000) and this is insufficient to explain the 15-25% (3,600-6,000) mol. wt increase. It is therefore possible that, at least in some heavy myeloma L-chains, an additional peptide is expressed. Whatever the nature of the increase it would be of interest to elucidate whether this is a marker of malignant process or of an intermediate step of normal Ig synthesis.     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过IκBα的降解活化NF-κB

目的　阐明鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化核转录因子NF κB的机制。方法　利用强力霉素Dox诱导表达LMP1的鼻咽癌细胞株Tet on LMP1 HNE2为实验模型 ,首先应用免疫印迹方法测定Dox诱导后不同时相LMP1的表达动力学以及IκBs蛋白量及功能的改变。进而用间接免疫荧光法检测NF κB的亚细胞定位。最后采用瞬间共转染及报道基因活性分析分析NF κB的活性。结果　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,Dox处理 15分钟后LMP1的表达迅速升高并维持与较高水平直至 12 0分钟。LMP1的诱导性表达导致IκBα的磷酸化并降解 ,但IκBα蛋白总量无改变。继IκBα的磷酸化并降解 ,NF κB(P6 5 )自胞浆易位至胞核且活性升高。IκBα的显性负性突变子抑制NF κB(P6 5 )的核易位及报道活性。LMP1的诱导性表达并未引起IκBβ蛋白水平变化。结论　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,EB病毒LMP1通过IκBα的磷酸化并降解激活核转录因子NF κB的活性 ,并且 ,LMP1诱导的NF κB活性能被IκBα的显性负性突变子完全抑制。IκBβ在此信号传导途径中无改变。LMP1表达前后IκBα蛋白总量维持恒定可能是由于NF κB的活化迅速启动了IκBα的重头合成这一自身调节环路所致。     

牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的: 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法: 采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P. gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P. gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果: P. gingivalis 感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH 氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P. gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论: P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P. gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。     

核因子-κB p65在宫颈癌组织中的表达及意义

 目的　探讨NF κBp6 5蛋白在宫颈鳞癌及宫颈腺癌组织中表达的意义。 方法　采用免疫组织化学方法 ,用NF κBp6 5单克隆抗体检测 6 4例宫颈鳞癌组织 ,6例宫颈腺癌组织 ,11例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)组织 ,16例慢性宫颈炎组织中NF κBp6 5的表达。 结果　NF κBp6 5在宫颈鳞癌和腺癌中的阳性表达明显高于CIN和慢性宫颈炎组织 ,有淋巴转移的癌组织中NF κBp6 5的阳性表达率高于无淋巴转移的癌组织。结论　NF κBp6 5蛋白在宫颈癌的发生发展中起重要作用     

肉桂醛促进子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的机制

【目的】探讨肉桂醛对子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的影响及其作用机制。【方法】选取肉桂醛作用子宫内膜癌RL95-2细胞,噻唑蓝（MTT）比色法检测子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖活性和肉桂醛的IC50,Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测RL95-2细胞的凋亡百分率,Western blot检测肉桂醛对RL95-2细胞Cleavedcaspase-3、Caspase-3、NF-κB、IL-6和IGF-R蛋白表达的影响。【结果】肉桂醛可降低子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖率,与药物浓度和作用时间有关;与溶剂对照组比较,肉桂醛组（0.29、0.59和1.20mg/mL）作用48h后RL95-2细胞的凋亡百分率明显增高（P<0.01）,出现典型的凋亡小体,Cleavedcaspase-3蛋白的表达明显增加（P<0.01）,Caspase-3蛋白的表达无明显变化（P>0.05）,而NF-κBp65、IL-6和IGF-R蛋白的表达均明显降低（P<0.05）。【结论】肉桂醛可降低RL95-2细胞NF-κB·p65、IL-6和IGF-R蛋白的表达,促进RL95-2细胞的凋亡,从而起到抗子宫内膜癌作用。     

哈萨克族食管癌患者中Lrig1通过MEK-ERK信号通路调控NF-κB及MMP-2表达

  目的  探讨Lrig1、NF-κB及MMP-2在哈萨克族食管癌患者中的表达与PI3K-AKT、MEK-ERK信号通路及与临床病理指标之间的关系。  方法  采用RT-PCR方法检测48例哈萨克族食管癌患者组织中Lrig1、NF-κB、MMP-2表达, 探讨NF-κB、MMP-2的表达与Lrig1的关系。纳入PI3K及MEK信号通路的关键基因PI3K、AKT1、MEK1、MEK2、MEK5、ERK1、ERK2, 研究Lrig1调控NF-κB、MMP-2基因表达的通路。  结果  转录水平mRNA检测显示在肿瘤组织及远端正常组织中NF-κB（P < 0.001, P= 0.014）、MMP-2（P=0.003, P=0.045）的表达与Lrig1 mRNA表达相关; 蛋白水平Western blot检测显示Lrig1与NF-κB、MMP-2可能呈负相关。在肿瘤组织中MEK5（P < 0.001）及ERK2（P=0.009）的表达与Lrig1相关; PI3K在正常组织中（P < 0.001）的表达与Lrig1相关。Lrig1、MMP-2及NF-κB协同表达率为52.1%（25/48）, 其协同表达与淋巴结转移相关（P=0.020）。  结论  NF-κB、MMP-2与Lrig1协同表达促进食管癌患者的淋巴结转移, Lrig1可能是通过MEK-ERK信号通路调控相关基因表达。      

参附注射液对心肌缺血再灌注老年大鼠NF-κB p65及COX-2表达的影响

目的：探讨参附注射液对心肌缺血再灌注老年大鼠心肌组织NF-κB p65及COX-2的影响。方法：健康Wistar老年大鼠30只,18月龄,随机分为3组,假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、参附注射液组（SF组）,每组10只。采用结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注模型。观察参附注射液对缺血再灌注老年大鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-KB）、天门冬氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）溢出量的影响;运用免疫组化法观察心肌缺血再灌注后心肌组织细胞中NF-κB p65的活性及COX-2的蛋白表达。结果：参附注射液能显著减少I/R老年大鼠血清中CK-KB、AST、LDH的溢出量。与S组比较,I/R组心肌组织NF-κB p65的活性增高,COX-2的蛋白表达明显增加（P〈0.05）。SF组中NF-κB p65、COX-2显著下降（P〈0.05）。结论：NF-κB p65和COX-2在心肌缺血再灌注中均有高水平表达,提示炎症参与了心肌缺血再灌注,机制可能是NF-κB p65通过对COX-2的转录调控发挥了重要作用;参附注射液可抑制NF-κB p65活性,降低COX-2的蛋白表达水平,减轻I/R心肌炎症反应,对心肌起保护作用。     

微创穴位埋线对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者临床疗效、外周血NF-κB活性和TNF-α、IL-8水平的影响

目的:观察微创穴位埋线治疗慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)稳定期患者的临床疗效、外周血NF-κB活性和TNF-α、IL-8水平的影响。方法:选取2014年2月—2014年12月在上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院呼吸科门诊就诊的慢阻肺稳定期患者60例,随机分为埋线组和对照组,每组30例。对照组给予西医常规治疗,埋线组在对照组治疗的基础上加用微创穴位埋线治疗。观察两组患者临床疗效、外周血NF-κB活性和TNF-α、IL-8水平。结果:埋线组有效率为86.67%,对照组有效率为76.67%,两组比较无统计学意义(P0.05);埋线组治疗后CAT评分、m MRC评分优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);埋线组治疗后外周血NF-κB活性较对照组显著下降,差异有显著统计学意义(P0.01);两组治疗前后TNF-α和IL-8水平比较,无统计学意义(P0.05)。结论:微创穴位埋线联合常规西医治疗对慢阻肺稳定期患者外周血中NF-κB的活性具有明显抑制作用。     

皮肤鳞状细胞癌NF-κB p65表达的临床价值

目的：研究NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中表达的临床诊断价值。方法选择30例皮肤鳞状细胞癌患者以及10例健康体检者。比较两组患者的NF-κB p65蛋白阳性表达率,分析NF-κB p65蛋白的表达与皮肤鳞状细胞癌患者的临床病理特征之间的关系。结果皮肤鳞状细胞癌患者体内的NF-κB p65蛋白阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义（P﹤0.05）。皮肤鳞状细胞癌组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率与侵袭深度、分化程度、临床分期、淋巴结转移、远端转移相关,差异有统计学意义（（P﹤0.05）;与性别、年龄、肿瘤大小无关,差异无统计学意义（（P﹥0.05）。正常皮肤组织鳞状上皮细胞核基本未见p65表达,胞质p65表达阳性;癌前病变中,病变鳞状上皮细胞细胞核见散在p65弱表达,胞质弱阳性;高度恶性鳞状细胞癌组织病变鳞状上皮细胞细胞核可见较多p65表达,胞质呈弥漫性阳性,血管内皮细胞胞核表达,胞质散在弱阳性。结论 NF-κB p65蛋白参与皮肤鳞状细胞癌的形成和发展,随患者病情的进展,NF-κB p65蛋白的阳性表达率越高。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对环境细颗粒物诱导的大鼠肺部损伤的保护作用

目的： 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠（STS）对大气细颗粒物（PM_2.5）诱导的大鼠肺部损伤的保护作用及可能机制。方法： 24只清洁级雄性SD大鼠,随机分为4组,每组6只,分别为对照组（生理盐水）、PM_2.5染毒组（模型组）、丹参酮ⅡA磺酸钠组（STS组）、地塞米松组（阳性对照）。采用气管滴注PM_2.5悬液染毒,除对照组外,其余3组染毒剂量均为5.4 mg/kg,每3 d滴注1次,共10次,于染毒第1天起STS组和地塞米松组分别以浓度15 mg/kg和0.5 mg/kg腹腔注射,每天1次,持续28 d。末次染毒后24 h采用整体体积描记法（WBP）检测大鼠呼吸频率（f值）和被迫呼吸间隙（Penh）;末次染毒后2 d,经腹主动脉采血2 mL,流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群;处死大鼠后灌洗左肺,收集肺泡灌洗液5 mL,ELISA法测定肺泡灌洗液中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）含量;Western blot检测肺组织核因子κB （NF-κB）蛋白表达。结果： 与对照组相比,模型组呼吸f值和Penh值均明显升高（P<0.01）;CD4⁺细胞百分率和CD4⁺/CD8⁺比值降低（P<0.05）;肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高（P<0.01）;肺细胞浆中P65含量降低而胞核中p-P65含量升高（P<0.01）。与模型组相比,STS组f值和Penh值均降低（P<0.05或P<0.01）;CD4⁺细胞百分率和CD4⁺/CD8⁺比值均升高（P<0.01或P<0.05）;IL-1β、TNF-α、IL-6浓度降低（P<0.01或P<0.05）;细胞浆中P65含量升高而胞核中p-P65含量降低（P<0.01）。结论： STS对PM_2.5诱导的大鼠肺部炎症有抑制作用,并具有调节肺功能和免疫功能的作用。