D101大孔树脂对丹酚酸B分离工艺的优化

 目的探讨D101树脂对丹酚酸B分离的最佳工艺。方法丹参提取液经过D101树脂吸附后,以不同乙醇浓度溶液洗脱,采用HPLC测定丹酚酸B的含量。一次正交试验考察丹参提取液浓度、树脂用量、时间等对树脂吸附的影响;二次正交试验考察乙醇浓度、洗脱液用量、流速等对树脂解吸的影响;并绘制丹酚酸B的洗脱曲线。结果树脂用量对丹酚酸B吸附量影响显著,最佳吸附条件为:药材树脂比1:3、色谱柱径高比1:5、药液浓度为原液、上样时间24 h;最佳解吸条件根据考察指标有所不同,以得率为指标时最佳条件为:乙醇浓度70%、洗脱速度2 mL·min^-1、洗脱液用量12倍柱体积;以纯度为指标时最佳条件为:乙醇浓度70%、洗脱速率0.5 mL·min^-1、洗脱液用量8倍柱体积;提高乙醇浓度有利于解吸。结论D101树脂可作为分离丹酚酸B较好分离材料,优化的分离工艺是可行的。     

栀子标准汤剂量值传递规律研究

目的 研究栀子饮片到标准汤剂的量值传递规律。方法 收集23批栀子饮片,制备标准汤剂,测定出膏率,建立饮片和标准汤剂的HPLC指纹图谱,采用三重四级杆飞行时间质谱（triple quadrupole time-of-flight mass spectrometry,Triple-Q-TOF/MS）技术对标定的共有峰进行成分鉴定,对采用对照品比对确认的成分进行含量测定,以出膏率、指纹图谱共有峰传递数及峰面积比值变化、成分转移率为指标,分析栀子饮片到标准汤剂的量值传递规律。结果 栀子饮片指纹图谱标定共有峰26个,其中25个传递到了标准汤剂,共有峰个数传递率96.15%,26个共有峰的成分均得到鉴定,其中7个环烯醚萜类成分栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、羟异栀子苷、山栀苷、京尼平苷酸、去乙酰车叶草酸甲酯（DAAME）、鸡矢藤次苷甲酯（SME）,2个西红花苷类成分西红花苷I、Ⅱ,2个黄酮类成分芦丁和异槲皮苷,1个单环单萜类成分jasminoside B,1个有机酸类成分绿原酸共计13个成分采用照品比对确认,标准汤剂和饮片共有峰面积比值与成分转移率呈现较好的正向直线关系,7个环烯醚萜类成分合计平均转移率70.90%,其中主要成分栀子苷平均转移率77.16%,西红花苷I、Ⅱ、芦丁、异槲皮苷、jasminoside B、绿原酸平均转移率分别为47.09%、39.56%、63.25%、51.95%、61.42%、75.70%,标准汤剂平均出膏率为28.91%。结论 阐明了栀子标准汤剂量值传递规律,为栀子配方颗粒及含栀子经典名方制剂研究奠定了基础。     

糖尿病肾病不同中医辨证分型患者中CDKN2A，CDKN2B，IGF2BP2和CDKAL1基因表达研究

目的：研究糖尿病肾病不同中医辨证分型的患者中CDKN2A,CDKN2B,IGF2BP2和CD—KAL1基因的表达量。方法：提取血液样本中的mRNA,并以此为模板进行反转录得到cDNA,以Real—TimePCR方法测定目的基因的表达量。结果：建立了这4个基因的定量方法,测定了50例正常人和53例糖尿病肾病患者中的基因表达量。结论：本研究在糖尿病肾病不同中医辨证分型的患者中测定了4个基因的表达量水平,对这些基因的表达量与糖尿病肾病中医辨证分型的关系进行了研究,为糖尿病肾病中医的临床诊断提供了量化指标,并同时指出基因研究对于中医中药的临床诊断和治疗具有深远的意义。     

槲皮素对脂多糖刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响

目的 观察槲皮素对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定不同浓度槲皮素对RAW264.7细胞活性的影响.将细胞分为五组:A组(对照组)、B组(LPS干预组)、C组(LPS+槲皮素50 μmol/L)、D组(LPS+槲皮素150 μmol/L)和E组(LPS+槲皮素250μmol/L).real-time测定各组细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(Myd88)、NF-κB (p65) mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平.结果 槲皮素在0～250 μmol/L浓度范围内对RAW264.7细胞活性没有影响.同对照组相比,槲皮素可有效降低LPS引起的TLR4、MyD88、NF-κB (p65)的mRNA表达和细胞上清液中IL-6、TNF-α分泌水平,并呈剂量依赖性(P＜0.01).结论 槲皮素可能通过抑制TLR-Myd88-NF-κB传导通路的活化,减少巨噬细胞炎症因子的分泌.     

绵萆薢中两个新二芳基庚酮类化合物的分离和结构鉴定

目的：研究绵萆薢（Dioscorea spongiosa）的化学成分。方法：利用大孔吸附树脂、硅胶柱层析、制备薄层色谱法进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果：从绵萆薢中分离得到5个化合物，分别鉴定为（3R，5S，7S）-1，7-二苯基-3，7-环氧-5-羟基-1-庚酮（命名为绵萆薢素A，化合物1）、（3S，5S，7S）-1，7-二苯基-3，7-环氧-5-羟基-1-庚酮（命名为绵萆薢素B，化合物2）、（＋）-丁香树脂醇（化合物3）、胡椒醇（化合物4）、芝麻素酮（化合物5）。结论：化合物1、2为新化合物，化合物3、4和5是3个首次从薯蓣属分得的木脂素类化合物。     

藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及机制探讨

目的:研究藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法:60只雄性Wistar大鼠按体质量随机分成正常对照组、模型组、易善复(95 mg/kg)阳性对照组及波棱瓜子总木脂素高(400 mg/m L)、中(200 mg/m L)、低(100 mg/m L)剂量组。各给药组每日上午9点给予2 m L相应药物,0.5 h后,除正常对照组外各组给予56度白酒灌胃,连续造模8 w后,测定各组大鼠血清ALT、AST及肝脏GSH-Px、MDA、SOD、GSH、CAT、TG、ADH、ALDH2水平。荧光定量PCR法测定大鼠肝微粒体CYP2E1 mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)测定肝微粒体CYP2E1蛋白表达。观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,除低剂量组TG及高剂量组GSH-Px差异无统计学意义(P>0.05)外,波棱瓜子总木脂素各组大鼠血清ALT、AST水平显著降低;肝组织MDA、TG、ADH水平及肝微粒体CYP2E1 mRNA和蛋白表达显著降低;肝组织SOD、GSH、GSH-Px、CAT、ALDH2水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE显示与模型组比较波棱瓜子总木脂素各组肝组织破坏程度较轻。结论:藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤有保护作用。     

知母多糖提取物生物活性的研究

目的:研究知母多糖对O2-.和.OH两种自由基的清除作用以及抑制蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-1B活性的能力,为知母多糖药物及功能性食品开发提供理论依据。方法:采用Fenton体系和邻苯三酚法测定知母多糖提取物对O2-.和.OH的清除作用。对知母多糖提取物分别进行膜分离以及层析柱分离,用酶标仪测定分离所得提取物以及不同浓度下知母多糖溶液对PTP-1B活性的抑制能力。结果:知母多糖提取物具有良好体外抗氧化性以及较好的抑制PTP-1B活性的能力。结论:知母多糖提取物是一种良好的氧自由基清除剂以及PTP-1B抑制剂。     

中药黄曲霉毒素B1的含量考察

为制定中药ＡＦ－Ｂ１含量限度提供依据。方法：间接竞酶联免疫吸附法。结果：样品ＡＦ－Ｂ１含量在１．１４－３．７２μｇ／ｋｇ之间。结论：制定中药ＡＦ－Ｂ１含量限度是必要的。     

慢性乙型肝炎中医证候聚类分析研究

目的探讨四川地区慢性乙型肝炎中医证候规律,为该病的中医客观化研究提供参考依据。方法采用横断面研究方法,根据课题组前期制定的慢性乙型肝炎中医证候规律研究病例报告表,记录四川地区8家子课题临床单位收集的1064例慢性乙型肝炎患者的四诊信息,运用K—means聚类分析的方法,探索慢性乙型肝炎证候特征规律。结果利用K-means聚类分析对1064例慢性乙型肝炎患者中医证候进行研究,结合专业知识,经专家讨论后,最终确定8类切合临床的证型,由多到少依次为脾胃湿热（326例,30．6％）、肝胆湿热（193例,18．1％）、肝脾湿热（158例,14．8％）、肝郁脾虚（92例,8．6％）、肝郁化热（89例,8．4％）、脾虚湿困（74例,7．0％）、湿热夹肝肾阴虚（73例,6．9％）及阳虚夹血瘀证（59例,5．5％）。结论四川地区慢性乙型肝炎的主要证型为脾胃湿热、肝胆湿热、肝脾湿热、肝郁脾虚、肝郁化热、脾虚湿困、湿热夹肝肾阴虚及阳虚夹血瘀证。     

华蟾素治疗慢性乙型肝炎病毒携带者临床研究

采用华蟾素治疗慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者147例,每日肌肉注射4ml,30天为1疗程,用药1～3个疗程。结果治疗组HBsAg、HBeAg、PHSA-R、DNAP阴转率分别为21.09%、38.89%、63.64%、50%,明显高于对照组(143例,以维丙肝、山豆根或甘草甜素治疗)的2.1%、10.87%、33.33%及7.7%(P<0.001～0.02)。抗-HBS、抗-HBe的阳转率前者为19.29%及23.45%,亦明显高于后者的4.26%及7.14%(P<0.001)。表明华蟾素对HBV复制有较明显的抑制作用。