电刺激小脑顶核对缺血性脑白质病病人认知及执行功能的影响

目的 探讨电刺激小脑顶核(FNS)对缺血性脑白质病(WMIL)病人认知功能及执行功能的影响.方法 选取核工业四一六医院2018年2月至2019年2月66例WMIL病人,随机数字表法分为基础组和研究组,均给予降低颅压、平衡体内水电解质、服用降脂降压、脑蛋白水解物类脑保护剂等常规治疗,研究组另施予FNS 1日1次,持续电刺...     

间充质干细胞通过调控巨噬细胞极化实现免疫应答的研究现状

间充质干细胞(MSC)是一种具有自我更新及多向分化潜能的多能干细胞,是细胞移植治疗的研究热点。既往认为,MSC主要通过细胞替代达到治疗疾病的目的。近年多项研究结果表明,MSC在调控免疫应答、抑制炎症反应中,也具有重要作用。新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)是引起新生儿死亡和伤残的重要原因。对HIE采取MSC移植治疗,可减轻缺血缺氧引起的炎症损伤,加速神经修复。然而,MSC的免疫调控作用并不是与生俱来的,而与局部炎症微环境密切相关,在不同水平炎症因子的刺激下,MSC可表现出截然不同的免疫作用。深入探讨MSC的免疫调控机制,有助于进一步对其临床应用进行研究。笔者拟就炎症微环境刺激下,MSC的免疫调控作用及其机制进行阐述。     

微小RNA在新生儿缺血缺氧性脑病中的表达

微小RNA(miRNA)是一类高度保守的内源性小分子RNA。miRNA主要通过选择性结合mRNA调控基因表达。目前研究结果表明，中枢神经系统存在大量miRNA，并参与神经细胞的正常生长、发育，以及组织损伤修复、肿瘤发生、神经退行性变等多种病理、生理过程。笔者拟就新生儿缺血缺氧性脑病(HIE) miRNA谱系的最新研究进展进行阐述，探讨其miRNA特异性表达，对新生儿HIE诊断和预后判断的意义，旨在为该病的相关诊治研究提供参考。     

Activation of acetylcholine receptors and microglia in hypoxic-ischemic brain damage in newborn rats

Objective: We previously showed that acetylcholine receptor (AChR) agonist reduced hypoxic-ischemic brain damage in the newborn rats. To further investigated the interaction between hypoxia and chorinergic anti-inflammatory pathway, we examined the effect of AChR antagonist on brain damage and to see the relation between microglial activation and protective effect of AChR agonist. Study design: Seven-day-old Wistar rats were divided into 2 groups, one receiving AChR antagonists to see if they have deleterious effects on hypoxic-ischemic brain damage, and the other receiving AChR agonist, carbachol, to investigate the emergence of microglia in the hippocampus. Rats were subjected to left carotid artery ligation followed by 8% hypoxia. Brains were analyzed histologically and immunohistochemically. Results: Antagonists of AChRs significantly enhanced brain damage in 1-h hypoxia-ischemia. In particular, the nicotinic AChR antagonist showed a marked enhancement of brain damage compared to the saline controls (p < 0.01). The hippocampal CA1 was most vulnerable to any AChR antagonists, while the cortex was least vulnerable and only responsive to a higher dose of non-selective nAChR antagonist. Carbachol showed significantly less accumulation of microglia in the hippocampus than the saline controls (p < 0.01) in hypoxia–ischemia. Conclusion: An AchR-responsive pathway in the brain plays an important role in modifying perinatal brain damage, in which microglial accumulation may be involved.     

低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制

目的　探讨全身低温对缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机理。方法　结扎 7日龄Wistar大鼠左侧颈总动脉后吸入 7 7%氧气 6 0min制成脑缺氧缺血 (HI)模型 ,随机分成低温组(30℃ ,n =18)和常温组 (36℃ ,n =18)给予维持恒定目标温度 10h。在HI后 2 4h ,每组 8只取脑进行匀浆用于半胱天冬酶 2 ,3(caspase 2 ,3)活性测定和Western蛋白印迹检查 ,其余每组 10只在HI后 72h处死 ,取脑进行石蜡包埋 ,冠状切片 10 μm用于活性caspase 3,凋亡诱导因子 (AIF) ,发夹寡核苷酸探针原位杂交 (HPP)检测凋亡及相关因子 ,微管相关蛋白 2 (MAP 2 )免疫组化染色用于计算脑梗塞体积和海马CA1神经元丢失 ,HE染色计算脑损伤积分。结果　常温组在HI后 2 4h损伤侧大脑半球caspase 2 ,3的活性 [(2 7 7± 14 7)、(94 9± 5 3 1) pmol/(min·mg蛋白 ) ]均明显高于正常对照组 [(7 6± 0 7)、(12 9± 0 5 ) pmol/(min·mg蛋白 ) ]和低温干预组 [(7 9± 3 4 )、(2 1 1± 18 7)pmol/(min·mg蛋白 ) ],P <0 0 1;而低温组与正常对照组相比无明显差异。Western蛋白印迹结果显示低温组caspase 3的激活受到明显抑制。免疫组化显示常温组活性caspase 3及AIF的阳性细胞数(中位数 14 8 5 ;2 2 /视野 )明显高于低温组 (中位数 4 8 5 ;9/视     

高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型脑组织神经细胞凋亡抑制蛋白Bcl2、促凋亡蛋白Bax的表达和胞浆线粒体细胞色素C(CytC)水平的关系及高压氧(HBO)对其的影响。方法：新生7日龄健康SD大鼠随机分为4组:空白对照组(n=34),假手术组(n=33,分离左颈总动脉后不结扎直接缝合皮肤),HIBD组(n=30,分离并结扎左颈总动脉联合8%低氧暴露2h),HBO组[n=33,HIBD后行HBO治疗(2个绝对大气压,1h/d,连续7d)]。免疫组织化学法检测脑组织神经细胞Bcl2和Bax的表达,Westernblot检测神经细胞胞浆线粒体CytC的水平。结果：HBO组Bcl2阳性细胞较HIBD组明显增多,阳性表达率分别为64%和47%(P<0.05),但较空白对照组(82%)和假手术组(79%)低,(P均<0.05);HBO组Bax免疫阳性细胞表达率(67%)与HIBD组(77%)比较差异无显著性(P>0.05),但明显高于空白对照组(15%)和假手术组(36%),(P<0.01和P<0.05)。空白对照组和假手术组神经细胞胞浆仅有弱阳性的CytC表达,HIBD组胞浆CytC的表达最强,HBO组的表达较HIBD组减轻。结论：HBO治疗可能通过诱导脑组织神经细胞Bcl2蛋白的表达,减轻线粒体CytC的释放,从而减轻缺氧缺血性脑损伤后神经细胞的凋亡。     

不同时间窗内新生儿缺氧缺血性脑病分度的扩散加权成像研究

目的 探讨扩散加权成像(DWI)在不同时间窗内对足月新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)分度的可行性和应用价值.方法 回顾性分析77例临床确诊为HIE的常规MRI、DWI图像,根据日龄分为2组,其中早期病例组(≤7 d)38例、中晚期病例组(8~28 d)39例.对两组病例进行T1WI、DWI分度并与临床分度比较.结果 与临床分度结果 相比较,早期病例中:DWI对轻度、中度和重度HIE的诊断符合率分别为56.25%(9/16)、100%(14/14)和100%(8/8);T1WI对轻度、中度和重度HIE的诊断符合率分别为25%(4/16)、71.43%(10/14)和25%(2/8).DWI分度与T1WI分度无统计学差异(U=-1.899,P=0.058).中晚期病例中:DWI对轻度、中度和重度HIE的诊断符合率分别为8.33%(1/12)、28.57%(6/21)和66.67%(4/6);T1WI对轻度、中度和重度HIE的诊断符合率分别为75%(9/12)、95.24%(20/21)和100%(6/6).DWI分度与T1WI分度比较具有统计学差异(U=-3.778,P=0.000).结论 不同时间窗DWI和T1WI对HIE分度评价不同.DWI对早期HIE进行分度可行,并与临床分度具有较高的符合率,但与T1WI分度无统计学差异;而对中晚期HIE DWI分度明显不及T1WI分度.     

缺氧缺血对体外血脑屏障通透性的影响及其机制的研究

目的：探讨血脑屏障紧密连接（BBB-tight junction，BBB—TJ）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在缺氧缺血诱导的体外血脑屏障（BBB）模型通透性增加中的作用及相互关系。方法：ECV304与原代培养的星形胶质细胞共培养建立体外BBB模型。实验分为正常对照组（C组）、缺氧缺血组（H／I组）、BB-1101预处理组（P组）3组。透射电镜分别观察各组BBB-TJ变化；通过吖计数仪测定核素标记牛血清白蛋白（^125I-BSA）通透量检测BBB屏障功能。直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白Actin分布的改变，Westemblot检测Actin、Occludin、ZO-1和MMP-9表达量的改变。结果：电镜观察见C组内皮细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接，免疫荧光检测见细胞骨架蛋白Actin主要分布在细胞膜及细胞核周边。形成肌动蛋白丝带，轮廓内包含大量柬状排列有序的微丝结构，细胞间连接紧密。缺氧缺血后．H／I组细胞间连接开放，形成裂隙，而胞膜及胞核周边肌动蛋白丝带模糊、部分断裂，并有应力纤维形成，出现细胞间裂隙，BBB对岱I—BSA通透性明显增高，与C组和P组比较，差异有显著性（P〈0．01），同时ZO-1的表达量显著减少，MMP-9的表达显著增多，而Occludin和Actin的表达量无改变。BB-1101预处理后，P组细胞BBB-TJ破坏减少．周边肌动蛋白丝带重新出现，细胞间裂隙较少，岱I-BSA通透量较H／I组明显下降（P〈0．01）．MMP-9的表达较H／I组也明显减少（P〈0.01）。结论：（1）缺氧缺血能促使BBB—TJ的开放进而导致BBB通透性增加；（2）BBB-TJ的开放可能与BBBActin的重组及ZO-1的表达量降低有关；（3）缺氧缺血能增加MMP-9的表达：（4）MMP-9与缺氧缺血时BBBActin的重组及ZO—1的表达减少相关。     

磁敏感加权成像评估早产儿脑损伤及预后

目的 探讨SWI对早产儿缺血缺氧性脑损伤早期诊断及预后评价的价值。方法 选取109例临床有明确围产期窒息史,于出生7天内首次接受MR检查的早产儿,2周及6个月后行MR复查,分析影像学表现。结果 109例早产儿存在不同程度脑损伤。其中单纯局灶性脑白质损伤34例,同时伴有生发基质-脑室内出血19例,单纯严重弥漫性脑白质损伤22例,同时伴有生发基质-脑室内出血14例,小脑、丘脑出血各8例,脑白质出血4例。脑白质损伤T1WI呈点片状高信号,T2WI呈低信号,DWI呈等高信号,SWI呈等、稍高信号;出血灶在T1WI为高信号,SWI为低信号。2周后MR复查示20例脑实质出血灶进展为软化囊腔。6个月后再次复查,34例单纯局灶性脑白质损伤和33例生发基质-脑室内出血患儿,SWI未明确显示病灶;22例严重弥漫性脑白质损伤和20例脑实质出血患儿,SWI清晰显示软化灶。结论 SWI对早产儿脑损伤的早期诊断和预后评价具有重要临床意义。     

多巴胺受体调节对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后焦虑样行为的影响

目的 观察缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠远期黑质酪氨酸羟化酶（TH）的表达及焦虑样行为的变化以及多巴胺（DA）受体拮抗剂干预对其远期焦虑样行为的影响。方法 将120 只7 日龄（P7）SD大鼠分为正常对照组、假手术组、HIBD 组及HIBD+DA 受体拮抗剂组。Rice 法制作HIBD 模型;假手术组予右侧颈总动脉分离,但不予结扎和低氧处理;HIBD+DA 受体拮抗剂组在造模前后予腹腔注射DA 受体拮抗剂,其余组予等量的生理盐水腹腔注射。各组分别于P14、P21 及P28（n=10）进行高架十字迷宫（EPM）实验检测动物的焦虑样行为及应用免疫组织化学方法测定其大脑黑质TH 的表达。结果 P21 及P28 时HIBD 组开放臂停留时间（OT）及开放臂次数比率较正常对照组、假手术组及HIBD+DAR 组增高（P<0.05）,且HIBD+DAR 组OT较正常对照组增高（P<0.05）。P14、P21 及P28 时HIBD 组及HIBD+DAR 组TH 水平均低于正常对照组及假手术组,且HIBD 组低于HIBD+DAR 组（P<0.05）。结论 初生时给予DA 受体拮抗剂能改善HIDB 对青春期焦虑样行为的异常作用并能减轻多巴胺能神经元的损伤。