睾丸混合性生殖细胞肿瘤临床病理分析

目的:探讨原发性睾丸混合性生殖细胞肿瘤(MGCT)的临床病理特征。方法:对我院13例原发性睾丸MGCT患者的临床病理资料进行回顾性分析,并结合相关文献进行讨论。结果:睾丸MGCT占我院同期睾丸生殖细胞肿瘤的24.1%(13/54),患者年龄2~53岁,平均28.3岁。全部病例均发生于单侧睾丸,左侧6例,右侧7例,左右侧比为0.86∶1。睾丸MGCT病理形态多样,肿瘤成分包括胚胎性癌(11例,84.6%)、精原细胞瘤(8例,61.5%)、畸胎瘤(6例,46.2%)、绒毛膜癌及卵黄囊瘤(均为4例,23.1%)。其中9例(69.2%)包含2种不同的生殖细胞肿瘤成分,3例(30.8%)包含3种不同的肿瘤成分,1例(7.7%)包含5种不同的肿瘤成分。结论:睾丸MGCT非常少见,好发于青壮年男性,不同的肿瘤成分其生物学行为、临床治疗和预后不同,因此准确的病理诊断非常必要,免疫组化标记对病理诊断与鉴别诊断具有重要作用。     

热休克蛋白70-2基因在大鼠隐睾中的表达及意义

目的 :探讨Hsp70 2基因表达在大鼠隐睾生精细胞中的作用。方法 :采用 2 2日龄Sprague Dawley雄性大鼠复制单侧隐睾模型 ,运用免疫组织化学SP法检测Hsp70 2和cdc2 基因在大鼠隐睾侧和对侧睾丸组织中的表达 ;运用生物素 dUTP 酶标亲和素测定法检测睾丸生精细胞凋亡。结果 :术后第 7d ,与对侧睾丸相比 ,隐睾侧Hsp70 2表达下降显著 (P <0 .0 1) ,cdc2 表达无显著性变化 (P >0 .0 5 ) ,生精细胞凋亡显著性增加 (P <0 .0 1)。术后第 14d ,隐睾侧生精细胞少见 ,Hsp70 2和cdc2 表达呈阴性。结论 :隐睾可以引起生精细胞发育停止和凋亡增加 ,这可能与Hsp70 2表达下降或不表达有关     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心、盐析及ＤＥＡＥ－纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果：纯化的酶经ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲＭｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛，ＤＬ－甘油醛，Ｄ－葡萄糖醛酸，Ｄ－木糖，Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖。     

旋转通气培养法建立小鼠睾丸体外培养模型

目的通过探索适宜的培养条件,建立小鼠睾丸器官培养模型。方法利用旋转通气培养法在体外培养睾丸,优化培养条
件,并与Transwell小室培养法进行形态学比较。HE染色观察睾丸组织结构的变化,BrdU染色法观察睾丸在体外的细胞增殖,
放射免疫法观察体外培养睾丸的睾酮分泌能力,免疫组化法观察睾丸中功能蛋白的表达。结果通过培养结局的对比,旋转通
气培养法培养的睾丸组织形态更完整。睾丸大小以0.3~0.8 mm3为宜。各组精原细胞增殖指数呈上升趋势,Sertoli细胞增殖指
数呈下降趋势：3 d组精原细胞增殖指数的增加与1 d组相比有统计学差异（P<0.05）,5 d组Sertoli细胞增殖指数的减小与1 d组
相比有统计学差异（P<0.05）。睾酮分泌量随培养天数的增加而减少且差异均有统计学意义（P<0.05）。培养3 d后,Leydig细胞
胞浆内可见3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）、细胞色素P450 17α羟化酶（P450c17）、胆固醇侧链裂解酶（P450Scc）蛋白的表达,
Sertoli细胞胞浆内可见波形蛋白（Vimentin）表达。结论利用旋转通气培养法成功建立睾丸器官体外培养的模型。
     

单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织CGRP和LDH的测定

目的：了解降钙基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）浓度在单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织中不同时段的变化,阐明CGRP与对侧睾丸早期损伤之间的联系。方法：将30只青春期前SD大鼠随机分为假手术组、扭转复位组和扭转切除（不复位）组,每组10只。假手术组作为对照;扭转复位组和扭转切除组依Turner法建立左侧睾丸扭转模型,在扭转4h后,前者行复位固定术,后者行切除术。三组分别于实验完成后4h、24h各处死大鼠5只,取右侧睾丸组织行CGRP及乳酸脱氢酶（actatedehydrojgenase,LDH）浓度检测。结果：扭转切除组4h与24h时CGRP浓度分别为（712.4±23.1）μmol/L与（733.0±30.0）μmol/L,LDH浓度分别为（417.2±25.9）U/L与（458.1±23.5）U/L;而扭转复位组的CGRP在4h与24h时分别为（852.3±33.9）μmol/L与（861.7±29.8）μmol/L,LDH分别为（690.0±28.8）U/L与（706.7±32.3）U/L;显示CGRP与LDH浓度在扭转复位组均有不同程度升高（P〈0.05）,但各指标在扭转切除组与假手术组的相比中未显示明显的统计学差异。结论：在单侧睾丸扭转复位后,对侧睾丸组织可能存在缺氧状态,CGRP的反应性升高可能起一定保护作用。     

低剂量地西他滨增强T细胞对宫颈癌细胞杀伤活性研究

目的：研究低剂量地西他滨是否可增强T细胞对宫颈癌细胞杀伤活性,并探讨其可能的作用机制。方法 CCK-8检测低剂量地西他滨对宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测低剂量地西他滨处理后宫颈癌细胞凋亡及周期的变化;CCK-8检测T细胞对低剂量地西他滨处理后宫颈癌细胞的杀伤作用,实时定量PCR法检测地西他滨处理后宫颈癌细胞癌/睾丸抗原(cancer testis antigen,CTA)及FasL的mRNA表达的变化。结果10 nmol/L地西他滨对宫颈癌细胞增殖、凋亡没有显著影响,100 nmol/L地西他滨一定程度上抑制细胞增殖。10 nmol/L地西他滨虽不直接抑制细胞增长,但使宫颈癌细胞对T细胞的杀伤效应更为敏感,以效靶比为10∶1时最显著。10 nmol/L地西他滨处理后宫颈癌细胞BORIS、NY-ESO-1、MAGE-A1/A3/A4等CTA及FasL的mRNA水平显著上调(P＜0.05)。结论低剂量地西他滨可抑制Hela及SiHa细胞的生长及存活,增强T细胞对Hela及SiHa细胞的杀伤能力,是一个潜在的免疫治疗辅助药物。     

Mast cells in testicular biopsies of infertile men with 'mixed atrophy' of seminiferous tubules

Mast cells in the bilateral testicular biopsies of 30 patients with a 'mixed atrophy' of seminiferous tubules were analysed. Seven biopsies from vasectomized patients served as controls. With regard to their characteristic location within testicular tissue, two groups of mast cells could be distinguished, in both control and infertile patients: 'interstitial' mast cells (located between Leydig and other interstitial cells as well as in the vicinity of blood vessels) and 'peritubular' mast cells (located in the close proximity of the tubular lamina propria or incorporated in the lamina propria itself). Morphometric data indicated a significant increase in the number and volume of mast cells in infertile patients when compared with controls. In the biopsies of infertile patients that were analysed both 'interstitial' and 'peritubular' mast cells showed a significant increase in their number and volume, although it appeared that 'peritubular' mast cells increased at a higher rate than 'interstitial' mast cells. A significant negative correlation was found between the following variables: volume and number of mast cells, testis volume and the status of spermatogenesis evaluated by Johnsen's scoring. It was concluded that the increased presence of mast cells is closely associated with an impairment of spermatogenesis.