乳腺癌C-erbB-3、C-erbB-4和C-erbB-2癌基因蛋白的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌C蛳erbB蛳3、C蛳erbB蛳4和C蛳erbB蛳2癌基因蛋白的表达及临床意义。方法用免疫组织化学(LSAB)法检测C蛳erbB蛳3、C蛳erbB蛳4和C蛳erbB蛳2在44例乳腺癌中的表达,采用χ2检验进行统计学处理。结果C蛳erbB蛳3、C蛳erbB蛳4和C蛳erbB蛳2的表达与组织学分级呈正相关性,随乳腺癌组织学分级的升高而升高,在Ⅰ级和Ⅲ级间有显著性差异(P<0.05)。有淋巴结转移组C蛳erbB蛳3、C蛳erbB蛳4的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组,二者之间差异有显著性(P<0.01)。C蛳erbB蛳3与C蛳erbB蛳2阳性表达率具有相关一致性。结论对乳腺癌患者同时进行C蛳erbB蛳3和C蛳erbB蛳2的检测,有助于判断其恶性程度及预后。     

双歧杆菌对实验性大肠癌化bcl-2及bax基因表达的影响

目的 通过观察大肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因的蛋白表达水平,探讨双歧杆菌的抑瘤途径及机制.方法 采用免疫组化SP法检测了40只裸鼠大肠癌移植瘤bcl-2及bax基因的蛋白表达率及表达强度.结果 双歧杆菌注射组大肠癌移植瘤bcl-2蛋白表达率及阳性细胞密度均低于肿瘤对照组,bax基因的表达情况则相反.结论 双歧杆菌可使大肠癌裸鼠移植瘤的bcl-2基因表达下调,bax基因表达增强,最终诱导肿瘤细胞凋亡,实现其抗瘤目的.     

CerbB-2、P53、ER、PR在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨CerbB-2、P53、ER和PR在乳腺癌的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法对198例乳腺癌组织标本进行CerbB-2、P53、ER和PR检测。结果阳性表达率:CerbB-2 为37．37％(74／198),P53为28．79％(57／198),ER为44．95％(89／198),PR为49．49％(98／198); CerbB-2和P53阳性表达率与有无淋巴结转移、临床分期有关(P<0．01);CerbB-2、P53共同阳性表达与淋巴结转移有关(P<0．01)。结论联合检测乳腺癌CerbB-2、P53、ER和PR基因袁达对判断预后和指导内分泌治疗有实用价值。     

MDM2基因在急性白血病中作用的研究

目的：分析ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达增高的原因。方法：用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、点杂交和逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法研究４１例不同类型急性白血病和两个相关的白血病细胞系ＭＤＭ２基因的扩增和ｍＲＮＡ表达。结果：发现５１．２％的患者ＭＤＭ２基因的ｍＲＮＡ表达水平明显增高，所有患者及两个细胞系均未发现有ＭＤＭ２基因扩增。结论：可能在急性白血病中ｐ５３基因可由于ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ的过度表达而抑制其蛋白的生物活性。ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达水平与急性白血病的ＦＡＢ分型以及患者的染色体核型无明显相关性，可能与疾病的预后有关。     

低温冻存时间对肿瘤组织生物大分子的影响

目的:探讨低温冻存时间对生物大分子DNA、RNA及蛋白质的影响,观察经长期低温冻存的肿瘤样本是否仍可满足科研的需求。方法:选择上海交通大学医学院附属瑞金医院上海消化外科研究所肿瘤样本库内2002至2006年间收集的手术切除胃癌标本20对(包括肿瘤组织及配对正常组织),用于提取组织总蛋白质和核酸,二喹啉甲酸(BCA)法测定蛋白浓度,采用凝胶电泳鉴定RNA、DNA完整性。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测核转录因子-κB(NF-κB)亚单位P65的mRNA表达;蛋白印迹(Western blot)法检测NF-κB蛋白表达。另随机抽取46例胃癌标本,检测其NF-κBP65的单核苷酸多态性(SNP)位点变异。结果:所有抽提DNA的吸光度比值(A260/A280)均在1.7～2.1间,电泳条带清晰,可检测出SNP位点变异。与保存1～2年者相比,储存3年或以上的标本NF-κBP65 mRNA与蛋白表达均有下调(P=0.03,P<0.01)。结论:组织样本低温保存在5年范围内,其DNA分子的完整性与质量均未受影响;RNA与蛋白质分子在低温保存1～2年内尚不影响癌基因表达的分析结果,但低温保存3年或以上的标本中RNA及蛋白质均有不同程度降解。     

携带AFP增强子反义c-fms真核表达载体的构建及其临床意义

目的 构建人肝癌细胞中高效特异表达的反义c-fms真核表达载体,观察其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法 采用PCR法扩增人c-fms癌基因第571位酪氨酸为中心的DNA片段,将其反向克隆人pcDNA3载体（命名pAS);将扩增的人甲胎蛋白（AFP）增强子核心区克隆人pAS（命名pAEAS)。磷酸钙法将空载体pcDNA3及反义真核表达载体pAS、pAEAS分别转导入HepG2肝癌细胞及HeLa宫颈癌细胞,观察细胞生长速度及凋亡。结果 人反义c-fms基因片段及AFP增强子核心区片段,测序结果与Genbank中登录的序列一致。导入反义基因的HepG2肝癌细胞生长速度较对照细胞明显减慢（P＜0．05）,pAEAS抑制作用较pAS强（P＜0．05,pcDNA3组、pAS组、pAEAS组HepG2肝癌细胞凋亡率分别为5．25％、14．7％、31．2％（P＜0．01）,pAEAS组细胞DNA出现梯状凋亡带。在HeLa宫颈癌细胞中,pAS及pAEAS组生长速度减慢,但二者差异无显著性（P＞0．05）,pcDNA3组、pAS组、pAEAS组细胞凋亡率分别为3．99％、8．27％、8．86％（P＜0．05）,DNA均未出现梯状凋亡带。结论 携带AFP增强子的人反义c-fms真核表达载体对AFP阳性肝癌细胞生长有选择性抑制作用,可诱导凋亡,是一种新的肝癌基因治疗方法。     

LncRNAs在肾癌中的作用机制及免疫治疗发展趋势

随着生物信息学技术的进步、高通量测序的应用,发现了大量的功能性的lncRNAs.它可以表现为抑癌基因、致癌基因甚至是同一LncRNAs在不同的环境及组织中表现出抑癌、致癌双重功能,并参与肿瘤的发生发展.研究表明,LncRNAs在肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移以及肿瘤的转移及耐药等多种生物学进程中起着关键性的作用,因而有望成为肿瘤生物标记物以及药物治疗新靶点用于肿瘤诊断、治疗、预后预测.     

幽门螺杆菌感染诱导胃黏膜上皮细胞凋亡及端粒酶逆转录酶表达

目的研究幽门螺杆菌（Hp）根除前后胃黏膜上皮细胞凋亡和端粒酶逆转录酶（hTERT）表达及其与bcl-2、c-myc蛋白表达的关系。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术及免疫组化染色方法检测39例却Hp性患者根除治疗及21例却阴性患者对症治疗前后胃黏膜上皮细胞凋亡、hTERT、bcl-2、c—myc蛋白表达的变化。结果治疗前却阳性者胃黏膜上皮细胞凋亡指数为16．2％，显著高于却阴性者（P〈0．05）；却阳性者hTERT、c—myc蛋白表达显著高于却阴性者（53．8％比23．8％；53．8％比28．6％，P〈0．05）。邯根除者治疗后胃黏膜上皮细胞凋亡、hTERT及bcl-2、c—myc蛋白表达与根除前相比均显著下降（16．9％比9．0％；59．3％比22．2％；59．3％比25．9％；59．3％比14．8％，P〈0．01），且与却阴性对照组相比差异无统计学意义（P〈0．05）；而邯未根治组及对照组上述指标均无显著变化。治疗前bcl-2、c—myc蛋白与hTERT呈显著正相关，秩相关系数r分别为0．269、0．474（P〈0．05）。结论却感染诱导细胞凋亡及hTERT过度表达，使胃黏膜不稳定性增加。根除却可纠正细胞凋亡失调，使hTERT表达下降或消失，从而降低胃癌发生的可能性。bcl-2及c—myc蛋白对hTERT表达可能具有调控作用。     

重组神经生长因子受体基因在受体缺乏的神经母细胞瘤细胞系中的表达

神经母细胞瘤是儿童期的常见恶性肿瘤之一。临床上,半数以上神经母细胞瘤有明显的N-myc癌基因扩增。神经生长因子(NGF)可使某些神经母细胞瘤细胞分化成神经元样的细胞。但对有N-myc扩增的神经母细胞瘤则可能因NGF受体缺乏而无明显促分化反应。本研究运用重组DNA技术将人NGF受体基因重组到有N-myc扩增,且NGF受体表达很低的神经母细胞瘤系(IMR-32)中,经克隆化培养、筛选,建立了稳定的细胞系—IMR-32/NGFR和对照细胞系IMR-32/NEO。经用抗NGFR的单克隆抗体检测用Flow cytometry技术证实IMR-32/NGFR系中有明显的NGF受体表达,而其母系IMR-32和空病毒对照系IMR-32/NEO则无表达迹象,说明NGF受体表达在IMR-32/NGFR系中是特异的,并能同抗NGFR单克隆抗体特异结合。用Northern B10ting技术亦测得IMR-32/NGFR中NGFR的mRN A明显表达。而其母系IMR-32和对照系IMR-32/NEO则无明显表达。这说明IMR-32/NGFR系中NGFR在mRNA水平上亦是特异的。N-myc和K-ras癌基因在IMR-32、IMR-32/NEO、IMR-32/NGFR三系中无明显变化。在NGF处理后,形态上三系均无明显的分化迹象。但IMR-32/NGFR在神经原纤维轻链的表达上轻度增高。c-fos癌基因的表达见于所有三个细胞系,IMR-32/NGFR略强些。这些说明,在恢复了NGFR基因和表达之后,对N-myc和K-ra     

Genetic deregulation of the PIK3CA oncogene in oral cancer

The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt signaling pathway is one of the most commonly deregulated pathways in human cancers. PI3K comprises a catalytic (p110α) and regulatory subunit (p85), and p110α is encoded by the PIK3CA gene. Here, we summarize the known genetic alterations, including amplifications and mutations, of the PIK3CA oncogene in oral cancer. We discuss in detail PIK3CA mutations and their mutual exclusivity with pathway genes in addition to the incidence of PIK3CA mutations in relation to ethnicity. We describe the constitutive activation of PI3K signaling, oncogenicity, and the genetic deregulation of the PIK3CA gene and its association with oral cancer disease stage. We emphasize the importance of therapeutically targeting the genetically deregulated PIK3CA oncogene and its signaling. We also discuss the implications of targeting Akt and/or mTOR, which are the downstream effectors of PI3K that may possibly pave the way for molecular therapeutic targets for PIK3CA-driven oral carcinogenesis. Furthermore, this critical review provides a complete picture of the PIK3CA oncogene and its deregulation in oral cancer, which may facilitate early diagnosis and improve prognosis through personalized molecular targeted therapy in oral cancer.