Purification and characterization of a novel peptide with antifungal activity from Bothrops jararaca venom.

Different peptides have been isolated from a wide range of animal species. It is has become increasingly clear that due to the development of antibiotic-resistant microbes, antibacterial and antifungal peptides have attracted the attention in recent years, in order to find new therapeutic agents. In this work, a novel peptide with high inhibitory activity against fungi growth have been isolated from the venom of the Brazilian snake Bothrops jararaca. A Sephacryl S-100 gel filtration column was employed for further separation of proteins. The FV fraction with high antifungal activity was named Pep5Bj, pooled and submitted to reverse-phase chromatography in HPLC. The fraction containing the isolated peptide inhibited the growth of different phytopathogenic fungi (Fusarium oxysporum and Colletotrichum lindemuthianum) and yeast (Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae). The peptide minimal inhibitory concentration is comparable to other known antifungal peptides, like insect defensins and cecropins, found in the last years in a large diversity of animals. We investigate F. oxysporum cells membrane permeabilization using SYTOX Green uptake, an organic compound that fluoresces upon interaction with nucleic acids after penetration in cell with compromised plasma membranes. When viewed under fluorescence optical microscopy, F. oxysporum cells exposed to Pep5Bj display strong SYTOX Green fluorescence in the cytosol, especially in the nuclei. The SYTOX Green data suggested that this effect is related to membrane permeabilization. The molecular masses of this peptide was obtained by MALDI-TOF spectrometry and corresponded to 1370Da.     

多重聚合酶链反应快速诊断感染性眼内炎的研究

目的 探讨多重聚合酶链反应（MPCR）快速诊断细菌性、真菌性眼内炎及混合感染的价值。 方法 MPCR法检测常见致病性细菌和真菌菌株，并检测38例患者41只眼（双眼3例，单眼35例）眼内液标本，与细菌和真菌培养结果比较。 结果 MPCR法5 h即可检测出标本中微量细菌和真菌，41份标本MPCR检测阳性34份（82.9％），其中细菌阳性26份，真菌阳性6份，细菌和真菌均为阳性2份，MPCR阳性率明显高于细菌或真菌培养 （χ2＝9.60,P＜0.05）。 结论 MPCR速度快、敏感性和特异性高，有助于细菌性和真菌性眼内炎的快速明确诊断。 （中华眼底病杂志，2004，20：81-83）     

Distribution of naturally occurring quinones

Angiosperms, fungi (including lichens), and bacteria are the main sources of natural quinones. Small numbers are present in algae, ferns, conifers, sponges, echinoderms, other marine animals, and arthropods. In angiosperms quinones have some chemotaxonomic value at the genus and family level but more surveys are required.Based on a lecture given at the 16th LOF Symposium, 27 October 1989, Utrecht, the Netherlands.     

革兰染色法检查阴道真菌的临床应用

实验室诊断真菌一般采用盐水湿片法，南于各种原因的影响，常使检验难以辨别，极易发生误诊，我们日常工作中采用革兰染色法检查阴道真菌。取得良好的效果。     

Diagnosis of Cryptococcosis: Comparison of Various Methods to Detect Cryptococcus Neoformans

Summary: The diagnosis of cryptococcal meningitis may be difficult to establish when few organisms are present in the cerebrospinal fluid. For this reason, we determined which of several different visual and cultural methods were the most sensitive for the detection of Cryptococcus neoformans. Gram stain and India ink preparations required that 10⁵ organisms per ml be present before these methods were reliably positive; centrifugation increased the sensitivity of these assays 10-fold. Culturing a loopful of the sample required that 10³ organisms per ml be present to yield growth; centrifugation of the sample enhanced the sensitivity of the culture by 100-fold. Clearly the most sensitive assays, both detecting fewer than 1 organism per ml, were culture of a membrane filter through which the entire sample had been passed and culture of the entire sample in a flask using biphasic medium. Zusammenfassung: Die Diagnose der Crytococcus-meningitis kann Schwierigkeiten bereiten, wenn nur wenige Erreger im Liquor cerebrospinalis vorhanden sind. Aus diesem Grunde wurden Untersuchungen durchgeführt urn festzustellen, welche optische oder kulturelle Methode die höchste Nachweisempfindlichkeit für Cryptococcus neoformas besitzt. Die Gramfärbung und die Aufschwemmung in chinesischer Tube benötigen 10⁵ Zellen/ml um verläßlich positive Befunde zu ergeben. Durch Zentrifugierung des Liquors konnte die Empfindlichkeit auf das 10-fache gesteigert werden. Bei der Abimpfung einer vollen Impföse war es erforderlich, daß das Untersuchungsmaterial mindestens 10³ Organismen/ml enthielt, damit in der Kultur Wachstum entstand. Mit der Zentrifugierung des Materials wurde die Empfindlichkeit bei dieser Methode auf das 100-fache erhöht. Als empfindlichste Nachweismethoden erwiesen sich die Membranfiltermethode, bei der die gesamte Probe filtriert und anschließend kultiviert wird, sowie die Kultivierung der gesamten Probe in einer Kulturflasche mit biphasischem Nährmedium. Mit beiden Methoden lassen sich weniger als ein Organismus/ml entdecken.     

Control of Growth of Saprophytic Fungi in Routine Mycological Cultures: Reduktion des Wachstums saprophytischer Pilze in mykologischen Routinekulturen

Summary: Two different procedures for controlling the growth of saprophytic fungi were compared in 276 routine cultures. Washing the skin lesions with ethanol-ether reduced the growth of these fungi by 17% when compared to the reduction in growth found when cycloheximide was added to Sabouraud's glucose agar. Investigations to ascertain whether or not ethanol-ether had an antifungal effect were carried out. In 316 cultures skin lesions were treated in two different ways and the efficiency of ethanol-ether could indirectly be shown to be a combined mechanical and chemical mode of action limited to the skin surface.
Zusammenfassung: Zwei verschiedene Methoden für die Reduktion des Wachstums saprophytischer Pilze wurden bei 276 mykologischen Routinekulturen verglichen. Behandlung der Hautstelle vor der Materialentnahme für die Kulturen mit Äthanol-Äther reduzierte das Wachstum der saprophytischen Pilze um 17 Prozent mehr als die Zugabe von Cycloheximid zum Sabouraud Glucose Agar. Der Effekt der Äthanol-Äther-Vorbehandlung ist als eine kombinierte mechanische und chemische Wirkung ausschließlich an der Hautoberfläche anzusehen.     

Some Dermatophytes and other Keratinophilic Fungi from Denmark

Summary: Twenty samples were examined for keratinophilic fungi using the hair-baiting ToKaVa method. Nine samples of soil and one of animal faeces were sprinkled with sterile hair, whilst 10 specimens of keratinised material were placed on sterilised soil. Fifteen species were found of which 4 were dermatophytes, and 7 recorded for the first time in Denmark. Neither zoo- nor anthropophilic dermatophytes were found, and none of the fungi have been recorded as having caused human mycoses in Denmark.
Zusammenfassung: Zwanzig Proben wurden mit Hinblick auf keratinophile Pilze untersucht. Neun Erdproben und eine Probe mit Tierfäzes wurden mit sterilem Haar bestreut, und gemäß der "Haar-Köder"-Methode von ToKaVa untersucht. Zehn andere Proben, aus natürlichem keratinisiertem Material bestehend, wurden auf keimfreier Erde inkubiert. Nach Inkubierung konnten fünfzehn Species bestimmt werden, davon sieben erstmalig in Dänemark. Vier der fünfzehn waren Dermatophyten. Man fand weder zoo- nodi anthropophile Dermatophyten und keine der gefundenen Pilz-species sind in Dänemark als Erreger humaner Mykosen beschrieben.     

真菌引起支气管哮喘发展和加重的免疫学机制

支气管哮喘（简称哮喘）是常见的气道慢性炎症性疾病,多种环境因素可引起哮喘恶化加重,其中真菌感染是一个很重要的因素。有很多证据显示哮喘患者存在真菌致敏,且在真菌致敏和哮喘严重度之间存在强的相关性。近年来很多研究主要从真菌对免疫细胞和上皮细胞的影响两个方面阐释了真菌引起哮喘加重的免疫学机制。此免疫学机制的阐明对于探索治疗重症哮喘的新途径有重要的意义。