冠脉循环中血小板活化状态对冠心病致病作用的研究

目的：探讨冠脉循环中血小板活化状态在冠心病（ＣＨＤ）发病学中的意义。方法：用放免等方法对受试冠状静脉窦（ＣＳ）及升主动脉（ＡＯ）血行血小板膜表面α－颗粒膜蛋白（α－ＧＭＰ－１４０）和循环内皮细胞（ＣＥＣ）等测定。结果：ＣＨＤ患冠脉循环中α－ＧＭＰ－１４０含量和ＣＥＣ浓度均明显升高（Ｐ〈０．０１）,以急心肌梗塞（ＡＭＩ）组为明显,冠脉狭窄愈严重,二升高愈明显,病灶多发比单发升高明显。结论：ＣＨＤ患冠脉循环中血小板高度激活,在ＣＨＤ的发生发展中有一定的意义。     

脑缺血再灌注期间海马CA1区微管运动蛋白活性变化

研究脑缺血再灌注期间海马ＣＡ１区锥体细胞微管运动蛋白活性的变化。方法沙土鼠前脑缺血再灌注,脑缺血１０ｍｉｎ。将２０只土鼠随机分为４组：假手术组、再灌注Ⅰ组（再灌注６ｈ）、再灌注Ⅱ组（再灌注４８ｈ）、再灌注Ⅲ组（再灌注９６ｈ）。采用免疫组织化学方法结合计算机图像分析测定脑缺血再灌注期间海马神经元微管运动蛋白活性。结果脑缺血再灌注期海马ＣＡ１区微管运动蛋白活性明显下降,在再灌注６ｈ,４８ｈ,９６ｈ时期     

新城疫病毒NP蛋白的真核表达载体的构建

目的 研究新城疫病毒核衣壳蛋白基因的生物学作用及其抗人喉鳞癌的作用。方法 利用含有新城疫病毒Ｖ４株核衣壳蛋白基因ｃＤＮＡ的原核质粒ｐＵＶＮＰ４及真核质料ｐｃＮＤＡ３,采用基因重组技术构建了含有ＣＭＶ含动子、ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的表达新城疫病毒核衣壳蛋白的真核表达质粒。结果 酶切分析表明重组质粒中含有新城疫病毒Ｖ４株核衣壳蛋白基因。结论 重组质粒为表达新城疫病毒核衣壳蛋白基因的真核质粒。     

定向克隆构建RAB5A基因真核细胞表达载体

目的 探讨ＲＡＢ５Ａ作为蛋白质人胞信号传导调控者在肿瘤转移中的作用及影响。方法 采用双酶切、定向克隆技术建立了人ＲＡＢ５Ａ基因真核细胞表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（－）０ＲＡＢ５Ａ。结果 测定分析证实了ＲＡＢ５Ａ基因正向插入ｐｃＤＮＡ３．１（－表达载体,免疫组化分析表明转染了ｐｃＤＮＡ３．１（－）－ＲＡＢ５Ａ表达载体的ＡＧＺＹ８３－ａ细胞系细胞内的荧光亮度明显强于转染前,蛋白电泳显示近２３ＫＤ的蛋白质     

c-erbB2蛋白在大鼠睾丸中的分布

用免疫组织化学方法观察基因基白c-erbB2在大鼠睾丸中的分布。结果：未成年大鼠睾丸生精上皮细胞和间质细胞中均未见c-erbB2免疫染色阳性颗粒,成年大鼠睾丸曲细精管中的圆形精子细胞,精子和残体均可见c-erbB2蛋白存在。提示原癌基因c-erbB2的活性可能参与精子形成的调控。     

BMP对异种骨移植局部TNF-α和IL-6基因表达的调节

观察骨形态发生蛋白在异种骨移植局部对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的调节作用。方法将含有一定抗原性的牛松质骨载体与不同剂量的牛ＢＭＰ复合,植入小鼠股部肌袋,于术后５,１０和２０ｄ取材,制备石蜡切要用核酸分子原位杂交的方法,定性定位检测植骨局部ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达情况,通过图像分析,确定ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度,分析植骨局部不同计量ＢＭＰ对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强     

非NMDA受体拮抗剂对大鼠牙髓伤害性刺激诱导的延髓Fos表达

目的 研究兴奋性氨基酸非ＮＭＤＡ受体在牙髓伤害性信息传递中的作用,为揭示牙痛的产生机制打下基础。方法 将实验动物随机分为４组。第１组单纯给予机械穿髓刺激;第２组预先侧脑室注射非ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＣＮＱＸ,再给予相同的穿髓刺激;第３组只行ＣＮＱＸ侧脑室注射,不予穿髓刺激;第４组为正常对照组。动物存活相同时间后取延髓做Ｆｏｓ蛋白免疫组化反应。观察３组动物Ｆｏｓ免疫反应阳性细胞的数量与第１组比较没有显著     

抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达

目的 构建抗前列腺特异抗原（PSA）单链抗体（scFv)/人羧肽酶A(hCPA)融合基因,为前列腺癌的抗全导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法 在已克隆抗PSAscFv和hCPA基因的基础上,用加端PCR分别在scFv基因的3′端和hCPA基因的5′端加上部分连接肽（linker)基因序列,回收后混合。应用重叠延伸拼接法,将抗PASscFv基因和hCPA基因通过linker序列串联为scFv/hCPA融合基因;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。结果 序列测定结果表明,构建的抗PSAscFv/hCPA融合基因中scFv和hCPA序列均正确,scFv和hCPA间有18bp的linker序列,推导的氨基酸序列为GSGGSG,与设计的序列相符,融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白并以SDS-PAGE分析,在Mr为94000左右出现一条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的34%。结论 成功构建并原核表达了抗PSAscFv/hCPA融合基因。     

正常及突变MyBPC与肌凝蛋白结合功能的对比研究

目的　比较正常及突变 My BPC与肌凝蛋白的结合功能 .方法　重叠 PCR法制备正常及突变 My BPC的表达载体 ,大肠杆菌 BL- 2 1中表达并提纯蛋白 . 10 0 μL 含 2 .2 μmol· L- 1肌凝蛋白溶液中 ,分别加入不同浓度 My BPC蛋白 ,经离心、 SDS- PAGE,密度法测定两者的结合率 .结果　3774D1 8,32 2 3S1 4 0 结合率分别为 (6 8.2 0± 1.72 ) % ,(2 4.41±2 .10 ) % ,较正常 My BPC (82 .70± 2 .44 ) %显著降低 (n=5 ,P<0 .0 1) .结论　为家族性肥厚型心肌病突变基因的“肽类毒剂”致病学说提供了依据     

胰岛素样生长因子-Ⅰ及胰岛素样生长因子结合蛋白-3与胎儿宫内发育的关系

目的 检测孕妇静脉血、脐血中胰岛素样生长因子－Ⅰ (IGF－Ⅰ )及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平,探讨 IGF－Ⅰ、 IGFBP-3与胎儿宫内发育的关系。方法 采用美国 DSL公司试剂盒。总计 81例孕妇,其中正常孕妇 38例,妊娠糖尿病孕妇 20例,正常妊娠分娩巨大儿孕妇 23例,采用放射免疫方法测定。 结果 正常组及巨大儿组孕妇静脉血 IGF-I与新生儿体重呈正相关 (r=0.653, r=0.640,两组 P均