慢病毒介导FGFR1 沉默对肺癌细胞 增殖和凋亡的影响

目的 探讨慢病毒介导成纤维生长因子受体1（FGFR1）沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法 构建慢病毒表达载体LV-shFGFR1,对其进行包装和病毒颗粒制备。将A549 肺癌细胞分为干扰组、 空载体组及对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting 检测各组细胞FGFR1 mRNA 和蛋白 相对表达量,MTT 比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术和Hoechest 染色检测细胞凋亡情况。结果 ① 3 株 肺癌细胞中,A549 细胞的FGFR1 mRNA 相对表达量高于H3255 和A-427 细胞（P <0.05）。② 3 组A549 细 胞中FGFR1 mRNA 和蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异 无统计学意义（P >0.05）;干扰组低于对照组（P <0.05）。③干扰组、空载体组、对照组0、12、24、48 和 72 h 的A549 细胞增殖情况比较,不同时间点、各组间、随时间变化趋势均有差异（P <0.05）。④ 3 组A549 细胞凋亡率比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）;干 扰组高于对照组（P <0.05）。结论 慢病毒介导FGFR1 沉默抑制A549 肺癌细胞增殖,同时促进肺癌细胞凋亡, 提示FGFR1 可能参与肺癌细胞的发生、发展过程。     

食管鳞状细胞癌患者microRNA-127-3p 的 表达水平及临床意义

目的 探讨miR-127-3p 在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及其临床意义。方法 选取 2013 年2 月—2015 年2 月于湖南省人民医院和长沙市中心医院行外科手术的80 例ESCC 患者癌组织及癌 旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-127-3p mRNA 相对表达量,利用免疫组织化学法 检测SKI 蛋白在患者癌组织及癌旁组织标本中的表达,并对所有患者进行≥ 3 年的随访。同时检测ESCC 细 胞株Eca109 和Kyse150 及正常人食管上皮细胞株Het-1a 中miR-127-3p 的表达水平。结果 免疫组织化 学染色结果表明,癌组织中SKI 蛋白表达阳性率较癌旁组织升高（P <0.05）;ESCC 细胞株Eca109、Kyse150 中miR-127-3p 相对表达量低于正常人食管上皮细胞株Het-1a（P <0.05）;临床分期Ⅲ期患者miR-127- 3p 低表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期（P <0.05）,有淋巴结转移和饮酒史患者miR-127-3p 低表达率高于无淋巴 结转移和无饮酒史患者（P <0.05）,miR-127-3p 低表达患者的中位无进展期较高表达患者短（P <0.05）。 结论 miR-127-3p 通过靶向调控SKI 蛋白的表达参与ESCC 的发生,其低表达可能参与ESCC 的侵袭及转 移过程,并显著影响患者的预后。     

抑制USP22基因对人结直肠癌细胞增殖的影响

目的 利用RNA干扰技术探讨泛素特异性肽酶22（USP22）对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法 免疫荧光检测结直肠癌组织中USP22的表达;Western blotting检测体外培养的HCT-116、SW480、HC-29结直肠癌细胞株中USP22的表达,筛选出表达量最高的细胞作为研究细胞。设计、合成针对USP22特异性siRNA,同时设置阴性对照siRNA,利用脂质体转染结直肠癌细胞后,Western blotting检测siRNA抑制效率;通过MTT法检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞的周期及凋亡;Western blotting检测周期相关蛋白CyclinB1、p21、p53、CDK2的表达。结果 结直肠癌组织中USP22表达量与癌旁组织比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,结直肠癌组织中USP22表达量升高。SW480细胞中USP22的表达量最高,因此作为靶细胞进行后续研究。与对照组比较,USP22 siRNA能够降低USP22的表达（P?<0.05）。USP22抑制后,与对照组比较,能够抑制SW480细胞的增殖,促使SW480细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞周期进程,增加细胞凋亡率（P?<0.05）,进而抑制细胞增殖（P?<0.05）;同时,与对照组比较,CyclinB1、CDK2的表达量降低（P?<0.05）,p53和p21的表达量升高（P?<0.05）。结论 USP22抑制后,能够抑制结直肠癌细胞的增殖,其机制可能与抑制细胞周期进程、促进细胞凋亡有关。     

胃癌组织中microRNA-144-3p 水平 及与临床病理特点和预后的关系

目的 探讨胃癌组织中microRNA-144-3p（miR-144-3p）水平,以及与临床病理特点和预后 的关系。方法 选取2011 年1 月—2013 年12 月在义乌市中心医院进行手术切除的100 例胃癌患者胃癌组织 及其癌旁组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应测定胃癌和癌旁组织中miR-144-3p 水平。结果 胃癌 组织中 miR-144-3p 低于癌旁组织（0.53±0.12） VS（ 1.00±0.11）（P <0.05）。不同临床分期、淋巴结转移及 分化程度胃癌患者miR-144-3p 水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）;不同年龄和性别胃癌患者miR- 144-3p 水平比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。miR-144-3p 高表达者5 年总生存率和无病生存率高于 低表达者（P <0.05）。Cox 多因素分析结果显示,miR-144-3p 低表达[Rl ^ R=3.627（95% CI ：1.514,8.783）]、 临床分期[Rl ^ R=1.627（95% CI ：1.073,4.735）]、淋巴结转移[Rl ^ R=4.025（95% CI ：1.043,8.931）] 及分化程 度[Rl ^ R=2.042（95% CI ：1.098,6.427）] 为影响胃癌预后的危险因素。结论 胃癌组织中miR-144-3p 水平 降低,其与临床分期、淋巴结转移、分化程度及预后关系密切。     

整联蛋白 α亚基1基因单核苷酸多态性与非贲门胃癌 发病风险的关联性分析

目的：探讨整联蛋白α亚基1（ITGA1）基因单核苷酸多态性（SNP）与非贲门胃癌发病的关联性,阐明ITGA1基因多态性在非贲门胃癌发病中的作用。方法：采用病例-对照研究设计,在内蒙古自治区包头市汉族人群中选取288例非贲门胃癌患者为病例组,社区体检281人为对照组。采用TaqMan方法对2组研究对象ITGA1基因rs1862610、rs2432143和rs2447867位点的SNP进行基因分型,采用Haploview 4.0软件构建单体型,并采用非条件性Logistic回归计算比值比（OR）及其95%可信区间（95％CI）,以评估各等位基因和基因型频数分布及单体型与非贲门胃癌发病风险的关联性。结果：2组研究对象ITGA1基因rs1862610、rs2432143和rs2447867位点的SNP与非贲门胃癌发病风险无关联（P>0.05）;rs1862610和rs2432143位点的SNP存在强连锁不平衡（D’=1）,构成单体型块,与携带单体型CT者比较,携带单体型CC者非贲门胃癌的发病风险升高（CC vs CT：OR=1.42,95% CI：1.02~1.99）。结论：在内蒙古自治区包头市汉族人群中ITGA1基因多态性可能在非贲门胃癌的发病中起一定作用,携带SNP rs1862610-rs2432143 CC单体型者非贲门胃癌的发病风险升高。     

女性膀胱癌患者腹腔镜膀胱全切术与开放膀胱全切术的倾向性评分匹配比较

目的:比较女性膀胱癌患者腹腔镜膀胱全切术和开放膀胱全切术两种术式的围手术及肿瘤学预后差异。方法:回顾性分析2006—2017年于北京大学第一医院泌尿外科行根治性膀胱全切术的女性膀胱癌患者91例,将腹腔镜膀胱全切患者以1 :1的比例运用倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)方法与开放膀胱全切患者进行匹配,匹配因素包括年龄、体重指数(body mass index,BMI)、美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesio-logists,ASA)评分、T分期及N分期,比较匹配前后两组患者的围手术及肿瘤学特征,应用Kaplan-Meier法比较匹配前后两组间总生存时间(overall survival,OS)、肿瘤特异生存时间(cancer specific survival,CSS)、无进展生存时间(progression free survival,PFS)。采用COX多因素回归分析校正匹配因素,进行敏感性分析。结果:共纳入行开放膀胱全切术患者65例,腹腔镜膀胱全切患者26例,中位随访时间为38个月(四分位距1869个月)。与开放膀胱全切组相比,腹腔镜膀胱全切组患者年龄更小(P<0.001),术前ASA评分更低(P=0.018),匹配后,22例开放膀胱全切患者与腹腔镜膀胱全切患者匹配成功。匹配前,腹腔镜膀胱全切组术中失血量更少(P=0.005),术中输血率更低(P<0.001),清扫淋巴结数目更多(P=0.035),围手术期并发症发生率较低(P=0.015),两组间OS(P=0.698)、CSS(P=0.942)、PFS(P=0.837)差异无统计学意义;匹配后,腹腔镜膀胱全切组术中失血量仍较开放膀胱全切组更少(P=0.009),术中输血率更低(P=0.001),围手术期并发症发生率较低(P=0.040),但清扫淋巴结数目两组间差异无统计学意义,两组间OS(P=0.432)、CSS(P=0.429)、PFS(P=0.284)差异亦无统计学意义。COX多因素回归分析显示,手术方式并不是女性膀胱癌患者OS(HR 1.134, 95%CI 0.335~3.835,P=0.839)、CSS(HR 1.051,95%CI 0.234~4.719,P=0.949)、PFS(HR 0.538,95%CI 0.138~2.095,P=0.371)的独立预测因子。结论:腹腔镜膀胱全切术术中出血量少、术中输血率低、围术期并发症少,但本研究并无证据表明女性膀胱癌患者接受腹腔镜膀胱全切术的预后优于开放膀胱全切术。     

羧基末端截短型乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌与癌旁组织中的表达及其在术后预后中的作用

目的 探讨肝细胞癌（HCC）患者肝癌组织和癌旁组织中羧基末端截短型乙型肝炎病毒X蛋白（Ct-HBx）的表达及其与患者术后预后的关系。方法 采用免疫组织化学染色法检测462例肝癌组织、配对的263例癌旁组织和配对的25例癌栓组织中Ct-HBx蛋白的表达,分析其与临床病理参数的关系,探讨Ct-HBx蛋白的表达与HCC患者术后预后的关系。结果 Ct-HBx蛋白表达在配对的263例肝癌组织和癌旁组织中阳性率分别为43.73%（115/263）和11.79%（31/263）;多因素Cox风险回归模型分析结果显示年龄、门静脉癌栓（PVTT）、术前天冬氨酸转氨酶（AST）、术前甲胎蛋白（AFP）、主瘤旁微小子灶、术前巴塞罗那临床肿瘤（BCLC）分期和术后抗病毒治疗是HCC患者术后复发的独立危险因素（P均<0.05）,门静脉癌栓、术前AFP、肿瘤包膜、术前BCLC分期和Ct-HBx蛋白表达是HCC患者术后生存的独立危险因素（P均<0.05）。在263对配对样本中,肝癌组织中Ct-HBx蛋白的表达与性别、糖类抗原19-9（CA19-9）、术后抗病毒治疗有关（P均<0.05）。肝癌组织和癌旁组织中Ct-HBx蛋白均为阴性表达的患者术后3年无瘤生存率高于Ct-HBx蛋白在肝癌组织阴性表达且在癌旁组织阳性表达的患者（P=0.050 1）。结论 当HCC患者肝癌组织中Ct-HBx蛋白表达呈阴性时,癌旁组织中Ct-HBx蛋白的表达情况可能与术后预后有关,可作为预测术后肿瘤生存和复发的标志物。     

环状RNA在肺部疾病中的研究进展

肺部疾病是临床常见病,其发病率逐年升高且治疗难度日益增大,严重威胁人类的生命健康。高通量测序和基因芯片技术的长足发展使得被学术界忽略已久的环状RNA（circRNA）再度成为研究热点。CircRNA在生物体内均有广泛表达,对生物功能发挥着重要的调控作用,并具有高度的特异性、稳定性和保守性,在疾病的诊疗方面潜力巨大。本文总结了circRNA在肺部疾病中的研究进展,为肺部疾病的诊治提供一定的理论依据。     

术前天冬氨酸转氨酶与血小板比值指数预测原发性肝癌肝切除术后肝衰竭的价值

目的 探讨术前天冬氨酸转氨酶与血小板比值指数（APRI）预测原发性肝癌患者发生肝切除术后肝衰竭（PHLF）的价值。方法 回顾性分析2013年9月至2016年12月在广西医科大学附属肿瘤医院接受首次肝切除术治疗的原发性肝癌患者资料,采用logistic回归分析和受试者工作特征（ROC）曲线评估Child-Pugh评分、终末期肝病预后模型（MELD）评分、白蛋白-胆红素（ALBI）评分及APRI预测PHLF的能力。结果 纳入本研究的1 108例原发性肝癌肝切除术患者中,共有217例（19.58%）发生PHLF。Logistc回归分析显示,Child-Pugh评分、MELD评分、ALBI评分及APRI是PHLF的预测因素（P均<0.05）;ROC曲线分析显示,术前APRI[曲线下面积（AUC）为0.745,95%置信区间（CI）：0.709~0.781,P<0.001]预测PHLF发生的能力明显优于Child-Pugh评分（AUC为0.561,95%CI：0.516~0.605,P=0.005）、MELD评分（AUC为0.650,95%CI：0.610~0.691,P<0.001）和ALBI评分（AUC为0.662,95%CI：0.621~0.703,P<0.001）。根据约登指数得到术前APRI的最佳截断值为0.55,此时APRI预测PHLF的灵敏度和特异度分别为71.9%和68.5%,APRI>0.55的患者PHLF的总体发病率及PHLF A、B、C各等级的发病率均高于APRI ≤ 0.55的患者（P均<0.05）。结论 术前APRI预测原发性肝癌患者发生PHLF的能力优于Child-Pugh评分、MELD评分及ALBI评分,对于原发性肝癌的临床治疗决策具有一定的指导意义。     

军地融合共建新型医疗联合体探讨——以福建中医药大学附属第三人民医院为例

目的 探讨绝经前乳腺癌化疗致闭经(CIA)的影响因素,了解化疗后卵巢功能的变化规律及CIA与绝经的关系。 方法 回顾性收集300例接受化疗(至少4个周期)的绝经前乳腺癌的临床资料,记录患者的年龄、病理类型、肿块分期、腋窝淋巴结转移数、激素受体、人表皮生长因子受体-2(HER-2)、化疗方案、放疗、内分泌治疗、靶向治疗、月经变化等情况和血清性激素水平[卵泡剌激素(FSH),黄体生成素(LH),雌二醇(E2)]并进行分析。采用ROC曲线、Fisher精确概率检验及卡方检验分析各因素与CIA之间的关系。使用Kaplan-Meier生存分析统计CIA发生时间与性激素水平达到绝经时间的差异。 结果 204 例患者出现CIA,年龄与CIA发生具有明显相关性,曲线下面积为0.899(P<0.001,95%CI:0.863～0.935),年龄影响CIA的最佳临界值为43 岁。CIA的发生与病理类型、肿块分期、腋窝淋巴结转移数、雌激素受体(ER)、孕激素受(PR)、HER-2状态无关、化疗方案、是否放疗、曲妥珠单抗靶向治疗、内分泌治疗无关(P>0.05)。CIA患者中,年龄≤45 岁者更易恢复月经(91.4% vs 35.8%,P<0.001),月经恢复的中位时间为6.7 月(3.0～11.3 月); 绝经更多见于年龄>45 岁者(1.4% vs 50.0%,P<0.001)。Kaplan-Meier分析显示,CIA的发生时间明显早于性激素水平达到绝经的时间(2.6月 vs 13.6月,P<0.001); 在46～50岁、>50岁两个年龄组中,CIA均明显早于性激素水平达绝经的时间[(2.6月 vs 17.2月,P<0.001),(1.9月 vs 12.1月,P<0.001)]。 结论 年龄是CIA发生、月经恢复的独立且具有预测意义的重要影响因素。绝经多发生在确诊乳腺癌时年龄>45岁的患者,月经恢复多见于≤45岁患者。CIA的发生明显早于性激素水平达绝经状态,这一时间间隔对乳腺癌患者出现CIA后绝经状态的判断具有重要的参考价值,对合理选择内分泌治疗药物具有重要的临床意义。