自身抗体联合检测在早期诊断青少年1型糖尿病的价值

目的:探讨胰岛细胞抗体(ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、锌转运体8自身抗体(ZnT8A)联合检测在青少年1型糖尿病(T1DM)的早期诊断价值。方法:选取某院首诊青少年T1DM患者90例,并抽取45例健康人为对照组,统计分析联合抗体检测对T1DM的诊断效能。结果:T1DM组ICA、GADA和ZnT8A阳性率明显高于对照组,T1DM组三项联合抗体阳性率最高(75.56%);自身抗体阴性组与阳性组空腹C肽和餐后2hC肽水平有明显差异(P<0.05);且联合检测诊断效能最高(AUC=0.854,P=0.000)。结论:ICA、GADA、ZnT8A联合检测有助于提高青少年T1DM的早期检出率和诊断效能。     

注射用脑蛋白水解物(Ι)对血管性痴呆大鼠的神经保护作用机制

目的 研究注射用脑蛋白水解物（Ι）对血管性痴呆大鼠的神经保护作用机制。方法 采用改良两血管阻断法制备血管性痴呆（VaD）大鼠模型,假手术组仅分离颈总动脉不阻断血管。将大鼠随机分为假手术组、模型组、注射用脑蛋白水解物（Ι）低、中、高剂量（5、10、20 mg/kg）组和脑蛋白水解物注射液（Cerebrolysin,阳性药,10 mg/kg）组。尾iv给药,每天1次,连续给药2周;假手术组和模型组给予等体积生理盐水。给药结束后,腹主动脉采血分离血清,分离大鼠皮层制备匀浆,ELISA法检测VaD大鼠血清中神经生长因子（NGF）和胰岛素样生长因子2（IGF-2）水平、皮层中γ-氨基丁酸（GABA）水平,比色法检测皮层中谷氨酸（Glu）水平。结果 与模型组比较,注射用脑蛋白水解物（Ι）显著升高VaD大鼠血清中NGF、IGF-2水平、皮层中GABA水平,显著降低VaD大鼠皮层中Glu水平;其升高IGF-2和GABA水平的作用优于同剂量Cerebrolysin。结论 注射用脑蛋白水解物（Ι）提高VaD大鼠学习记忆能力的作用机制,可能与升高机体NGF、IGF-2水平,调节兴奋性及抑制性氨基酸类神经递质平衡有关。     

131I-PAMAM(G5.0)介导靶向肽在甲状腺髓样癌模型中的实验研究

目的 评价新型分子靶向探针131I-PAMAM（G5.0）-SR、131I-PAMAM（G5.0）-GP及131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP[其中,PAMAM（G5.0）:第五代聚酰胺-胺;SR:丝氨酸-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸-脯氨酸-组氨酸-脯氨酸（SRESPHP,简称SR）;GP:甘氨酸-脯氨酸-亮氨酸-脯氨酸-亮氨酸-精氨酸（GPLPLR,简称GP）]在荷瘤甲状腺髓样癌（MTC）模型中的靶向性。 方法 采用高效液相色谱法纯化和分析靶向肽SR、GP及SR/GP,分别将其与修饰后的PAMAM（G5.0）共价连接,合成前体药物PAMAM（G5.0）-SR、PAMAM（G5.0）-GP及PAMAM（G5.0）-SR/GP。采用动态光散射粒度分析法检测PAMAM（G5.0）键合靶向肽前后的纳米粒径及Zeta电位。采用氯胺T法对修饰后的PAMAM（G5.0）、PAMAM（G5.0）-SR、PAMAM（G5.0）-GP、PAMAM（G5.0）-SR/GP进行131I标记,合成阳性对照组[131I-PAMAM（G5.0）]及实验组[131I-PAMAM（G5.0）-SR、131I-PAMAM（G5.0）-GP、131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP]的4种探针。通过薄层色谱法分别测定探针的标记率、放射化学纯度及稳定性。经模型鼠腹腔注射阴性对照组（Na131I）、阳性对照组及实验组探针后,分别于4、8、12、24及48 h进行SPECT/CT显像,并计算靶/非靶值（T/NT）,同时处死裸鼠取肿瘤及重要脏器测定放射性,以每克组织百分注射剂量率（%ID/g）表示。组间同一时间点T/NT、组内不同时间点T/NT及组间24 h肿瘤放射性摄取值的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。 结果 纯化后的靶向肽SR、GP和SR/GP的纯度均达99%。PAMAM（G5.0）键合SR、GP、SR/GP前后的纳米粒径分别为4.47、5.70、4.71、5.95 nm,Zeta电位分别为+37.95、+20.02、+28.34、+24.37 mV。131I标记4种探针的标记率均>75%,放射化学纯度均>90%,48 h的体外稳定性显示,放射化学纯度均在85%以上。SPECT/CT图像显示,实验组探针在不同时间的T/NT均较对照组有增高趋势:131I-PAMAM（G5.0）-GP 在4 h的T/NT（6.03±1.45）与阳性对照组（2.18±0.39）、阴性对照组（1.36±0.00）比较,且差异均有统计学意义（t=3.235,P=0.033;t=3.843,P=0.019）;而131I-PAMAM（G5.0）-SR在8、12、24 h的T/NT（5.12±1.65、4.82±0.09、3.41±1.01）均较阴性对照组（1.50±0.00、1.43±0.65、1.34±0.81）高,且差异均有统计学意义（t=4.004,P=0.017;t=3.388,P=0.027;t=4.180,P=0.009）。实验组组内比较,131I-PAMAM（G5.0）-SR在24 h的T/NT（3.41±1.01）较131I-PAMAM（G5.0）-GP（2.10±0.67）高,差异有统计学意义（t=3.990,P=0.016）。注射131I-PAMAM（G5.0）-SR的肿瘤放射性摄取在24 h[（1.80±0.18）%ID/g]均较实验组其他探针、阴性对照组及阳性对照组高,但差异无统计学意义（F=3.366,P=0.059）。T/NT及肿瘤放射性摄取的达峰时间:131I-PAMAM（G5.0）-GP和131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP 为4 h,131I-PAMAM（G5.0）和131I-PAMAM（G5.0）-SR为8 h。131I-PAMAM（G5.0）-GP的放射性洗脱较快,12 h的T/NT较4 h下降约57%。 结论 SR及GP提高了131I-PAMAMM（G5.0）对MTC的靶向性,131I-PAMAM（G5.0）-GP靶向MTC肿瘤新生血管使其在瘤体的摄取及代谢较快,有望应用于MTC SPECT显像,而131I-PAMAM（G5.0）-SR对MTC细胞具有很好的靶向性和滞留性,有望应用于MTC的靶向诊治及预后评估。     

多西他赛或培美曲塞联合铂类治疗吉非替尼治疗失败NSCLC的临床比较

目的 探讨多西他赛与培美曲塞分别联合铂类治疗吉非替尼治疗失败NSCLC患者的疗效及不良反应.方法 选取吉非替尼治疗失败NSCLC患者110例,随机数字法分为A组(n=55)和B组(n=55),分别在铂类应用基础上加用多西他赛或培美曲塞辅助治疗.比较两组患者近期疗效、总生存、无进展生存、EORTC QLQ-C30评分和KPS评分改变以及严重不良反应发生率等.结果 两组患者客观缓解率(objective response rate,ORR)和疾病控制率(disease control rate,DCR)比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).B组患者无进展生存时间长于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05).两组总生存时间比较差异无统计学意义(P＞0.05).两组治疗后EORTC QLQ-C30评分和KPS评分均高于治疗前,且B组治疗后各项评分高于A组(均P＜0.05).B组Ⅲ～Ⅳ级白细胞减少、血红蛋白减少、血小板减少、恶心呕吐、皮疹及肝功能损伤发生率低于A组(均P ＜0.05);两组Ⅲ～Ⅳ级腹泻和脱发发生率比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 多西他赛或培美曲塞联合铂类治疗吉非替尼治疗失败NSCLC患者疗效接近,但培美曲塞联合铂类方案可有效延长无进展生存时间,提高生活质量,以及减少严重不良反应发生.     

红景天苷对NMDA介导的小鼠视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的：探讨红景天苷（Sal）对视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的抑制作用。方法：实验研究。36 只C57BL6J小鼠随机分为空白组、模型对照组、不同浓度Sal实验组,每组6 只,均以右眼为实验眼。空白组仅注射0.9%PBS溶液,模型对照组和实验组玻璃体腔注射N-甲基-D-天（门）冬氨酸（NMDA）1.5 μl建立RGCs损伤模型;建模前48 h,模型对照组注射1.5 μl 0.9% PBS溶液,实验组玻璃体腔注射不同浓度Sal（0.1、0.4、2、8 mmol/L,1.5 μl）。建模5 d后制备视网膜标本,观察视网膜RGCs存活及凋亡情况,Western Blot法检测视网膜中Caspase-3、Caspase-8 蛋白的表达。数据采用单因素方差分析。结果：HE染色显示空白组视网膜RGCs无变化,模型对照组RGCs显著减少,不同浓度Sal实验组RGCs细胞核染色数目较模型对照组逐渐增加,并呈浓度依赖性;经视网膜平铺片测定RGCs 存活情况,发现空白组RGCs正常存活,模型对照组仅少量RGCs存活,不同浓度Sal组RGCs存活率较模型对照组提高,各组小鼠RGCs阳性细胞数比较差异有统计学意义（F=212.0,P < 0.001）。同时,8 mmol/L浓度的Sal实验组Caspase-3、Caspase-8 蛋白表达明显低于模型对照组,差异有统计学意义（F=168.3,P < 0.001）。结论：Sal可以抑制NMDA介导的RGCs凋亡,对RGCs损伤有保护作用。     

正常雏鸡耳蜗中谷氨酸免疫反应分布

目的：证实谷氨酸在耳蜗毛细胞－听神经传入过程中的递质作用。方法：用半薄切片单克隆抗体免疫组织化学技术,研究正常雏鸡基底乳头及螺旋神经节的谷氨酸免疫反应。结果：高、矮毛细胞浆均呈Ｇｌｕ－ＩＲ阳性,毛细胞下神经纤维着色较淡,支持细胞的反应阴性,高毛细胞反应较矮毛细胞反应强;螺旋神要节细胞呈圆形或椭圆形,胞浆Ｇｌｕ－ＩＲ阳性,胞核不着色,结论：Ｇｌｕ可能作为小鸡耳蜗传入神经递质（或调质）而起作用。     

托吡酯对抽动-秽语综合征患儿血浆谷氨酸和门冬氨酸含量的影响

目的：观察托吡酯（TPM）对抽动-秽语综合征（TS）患儿血浆兴奋性氨基酸中谷氨酸（Clu）和门冬氨酸（Asp）含量的影响。方法：选择40例TS患儿（治疗组）,予以TPM治疗至少12周。分别在治疗前及治疗12周后检测TS患儿血浆Glu和Asp的含量,并评估其治疗效果。选择我院体检正常儿童30例作对照（对照组）。结果：治疗组TS患儿治疗前血浆Glu和Asp含量较对照组明显增加（P〈0．01）。应用TPM治疗12周后,患儿血浆Glu和Asp含量较治疗前明显下降（P〈0．01）;同时患儿耶鲁综合抽动严重度量表（YGTSS）评分指标运动性抽动分数、发声性抽动分数和综合损害分数均显著降低（P〈0．01）。结论：兴奋性氨基酸可能参与佟的发病过程。TPM治疗TS患儿的临床疗效确切,能明显降低患儿YGTSS评分,作用机制可能通过降低血浆兴奋性氨基酸的含量。     

2型糖尿病患者血清GAD-Ab、ICA、IAA与胰岛素释放功能的关系

目的：2型糖尿病患者血清谷氨酰脱羟酶抗体（GAD-Ab）、胰岛细胞抗体（ICA）、胰岛素自身抗体（IAA）与胰岛素释放功能的关系。方法：对2型糖尿病患者和体检中心健康体检者进行5个时相点75g葡萄糖耐量试验和同步胰岛素释放试验,并对0min时相点的血清进行GAD-Ab、ICA、IAA检测。结果：（1）在筛查人群248例2型糖尿病患者中GAD-Ab阳性为95例,阳性率为38．3％;正常对照组阳性为1例,阳性率为2．3％,两组之间差异有统计学意义;糖尿病组ICA阳性有14例,阳性率为5．6％;对照组为0例,两组比较差异有统计学意义;糖尿病组IAA阳性有14例,阳性率为5．65％,对照组为1例,阳性率为2．3％,两组之间比较差异无统计学意义。（2）2型糖尿病不同抗体阳性的胰岛素释放水平,在GAD-Ab、ICA、IAA都是阳性时I0、Imax、M／Fi、Si都是最低的。在GAD-Ab阳性或GAD-Ab与ICA、IAA其中一个呈阳性时,与GAD-Ab为阴性的ICA或IAA阳性组比较其I0、Imax、M／Fi、Si都较低,差异无统计学意义,而单一ICA或IAA阳性之间的比较差异无统计学意义,但与三个抗体全阴性组比较,明显偏低,差异有统计学意义,发现抗体阳性的2型糖尿病患者,特别是GAD-Ab阳性的患者与I0、Imax、M／Fi、Si水平呈显著负相关。结论：2型糖尿病GAD-Ab、ICA和IAA抗体阳性与胰岛素释放指标水平呈负相关,检测抗体水平可一定程度地反映胰岛素释放功能。     

骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠中枢α-氨基羟甲基恶唑丙酸受体蛋白表达的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠海马和杏仁核α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体蛋白谷氨酸受体(GluR)1,2表达的影响,探讨BMSCs移植治疗大鼠脊髓损伤的潜在抗慢性应激作用.方法 选择成年雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为对照组、模型组、治疗组,每组16只.模型组、治疗组采用改良Allen法建立大鼠下胸段(T10)脊髓损伤模型.造模后7d,于L4～L5间隙蛛网膜下腔向对照组及治疗组注射100μl含1.0×106BMSCs的Hank缓冲液混悬液,模型组注射同体积Hank缓冲液.术前、术后评估大鼠后肢运动功能.每组于移植后第14,28天处死一半动物,灌注后取脑,冰冻切片后行GluR1、GluR2免疫组织化学染色.结果 BMSCs移植后,治疗组动物后肢运动功能持续恢复.移植术后14 d,GluR1阳性细胞数,模型组和治疗组在海马CA1区均高于对照组(P ＜0.05,0.01);GluR2阳性细胞数有类似趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).移植术后28 d,GluR1阳性细胞数,模型组在CA1、CA3、DG区均高于对照组,在CA1、CA3区亦高于治疗组(P＜0.05,0.01),模型组和治疗组在DG区均高于各自移植后14 d阳性细胞数(P＜0.05,0.01);GluR2阳性细胞数,治疗组在基底外侧杏仁核(BLA)高于对照组(P＜0.05),在其他区各组表现出与GluR1表达类似的趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BMSCs移植可改善大鼠下胸段脊髓损伤模型的后肢运动功能,并对其中枢AMPA受体GluR1/2表达有调节作用,表现出潜在的抗慢性应激作用.     

糖皮质激素对大鼠大脑皮层突触体高亲和摄取L—谷氨酸的快速,非基因组效应

本研究采用大鼠大脑皮层突触体，观察糖皮质激素（ＧＣ）对于Ｎａ＋依赖高亲和摄取３Ｈ－Ｌ谷氨酸（孵育４ｍｉｎ）的影响。发现ＧＣ包括皮质酮硫酸盐（Ｂ－ＳＯ４）、氢化可的松琥珀酸盐（Ｆ－ｓｕｃ）、地塞米松磷酸盐（ＤＥＸ－ＰＯ４）及皮质酮（Ｂ）均促进突触体摄取谷氨酸，且呈一定浓度依赖性。Ｂ－ＳＯ４１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，谷氨酸摄取较对照组增加２５．６％，Ｂ－ＳＯ４、Ｆ－Ｓｕｃ及Ｂ最低有效剂量均为１０－７ｍｏｌ／Ｌ，ＤＥＸ－ＰＯ４最低有效剂量为１０－６ｍｏｌ／Ｌ。孵育２ｍｉｎ后即见Ｂ－ＳＯ４（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）促进突触体摄取谷氨酸，孵育４ｍｉｎ后Ｂ－ＳＯ４的作用达高峰。１０－６ｍｏｌ／Ｌ睾酮及孕酮也有促进摄取谷氨酸的作用，而去氧皮质酮及１７β－雌二醇硫酸盐对突触体摄取谷氨酸没有显著影响，ＧＣ的作用有一定甾体特异性。ＧＣ胞内受体阻断剂ＲＵ４８６本身对谷氨酸摄取没有影响，但可部份阻断Ｂ的促进作用。由于已从神经元上离断下来的突触体不再受基因组机制影响，本实验中ＧＣ快速促进突触体摄取谷氨酸是非基因组机制介导的，其详细机制及潜在生理意义有待进一步探讨。