腺病毒介导KDR启动子的胸苷激酶基因对血管内皮细胞的靶向杀伤作用

目的: 体外实验评估腺病毒介导KDR启动子-胸苷激酶系统(HSV-tk)杀伤血管内皮细胞的作用. 方法:采用新型AdEasy系统,构建受KDR启动子和巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSV-tk基因的AdKDR-tk和AdCMV-tk,在293细胞中包装、扩增后,体外分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC)和不表达KDR的人鼻咽癌细胞株CNE-2,用丙氧鸟苷(GCV)处理受染细胞,并以MTT法检测其细胞增殖情况. 结果:病毒滴度均为1×1013 pfu/L. 在感染复数(MOI)为100的条件下,GCV浓度由0增至50 mg/L时感染含AdKDR-tk的HUVEC细胞和CNE-2细胞存活率从(89.4±4.6)%和(91.5±4.4)%分别下降至(22.9±4.7)%和(71.4±2.9)%(P＜0.01),而感染AdCMV-tk的HUVEC细胞和CNE-2细胞存活率从(89.9±6.2)%和(90.8±5.7)%分别下降至(12.8±2.6 )%和(18.8±6.1)%(P＞0.05). 结论:腺病毒介导KDR启动子-胸苷激酶系统具有特异性杀伤血管内皮细胞作用.     

紫草酥油膏在皮肤外科中的应用

紫草属于多年生草本植物,生于荒山田野、路边及干燥多石山坡的灌木丛中,来源广泛,具有凉血、活血、解毒透疹之功效。本文介绍以紫草为主要原料,配合酥油熬制而成的紫草酥油膏在皮肤外科中的应用。1资料与方法1.1临床资料本组病例中烫伤15例,男9例,女6例,年龄3～58岁,浅Ⅱ度创面8例,深Ⅱ度创面7例,烫伤部位颜面部6例,四肢9例,合并胸腹部烫伤1例;皮     

Cronobacter新属(阪崎肠杆菌)检测分型方法的研究进展

本文对Cronobacter新属的以VRBG琼脂、NA+α-MUG、DFI、ESIA或ESPM等选择性分离培养基进行分离培养的传统培养方法和基于16SrRNA序列、基因组重复序列、16S-23SrDNA ITS、tRNA-glu和23SrDNA之间DNA序列、gluA、rpsU与dnaG及ompA等目标区域的分子生物学检测分型方法进行了综述。     

螺体内毛毕属吸虫尾蚴季节消长观察

毛毕属吸虫属于动物血吸虫,其尾蚴可引起人体变态反应性皮炎〔1-5〕。为了解毛毕属吸虫尾蚴季节变化规律及其成因,以确定调查尾蚴感染情况的最季节和制定正确的防治策略,我们于2 0 0 2年6月至2 0 0 3年5月,对耳萝卜螺感染毛毕属吸虫尾蚴季节消长情况进行了观察。1　材料与方法采样地点于淮南市郊的淮河水系支流窑河渔场。应用捕渔网具,逐月随机采集耳萝卜螺带回实验室,洗净、压破剥去螺壳,撕碎软体组织,滴加生理盐水,置解剖镜下检查毛毕属吸虫尾蚴。并调查河岸浅滩上禽粪污染情况和收集气温、雨量分布资料。2　结　　果2 1　采样地点的生态…     

浙贝母和平贝母中淀粉的结晶学、形态学和热性质研究及与马铃薯淀粉的比较

目的为了能够更加充分了解贝母属药用植物,通过各种分析方法对两种贝母——浙贝母和平贝母中所包含的淀粉的物理化学性质进行了研究。方法采用X射线衍射,扫描电子显微镜(SEM)以及热分析(TGA)的方法对两种贝母中淀粉的性质进行了比较。结果通过研究发现,两种贝母淀粉的晶体类型都为典型的B型,这与马铃薯淀粉的晶体类型是一致的。浙贝母和平贝母淀粉的结晶度分别为29.9%和20.1%,而马铃薯淀粉的结晶度为44.9%。从两种贝母淀粉的结晶度可以看出,平贝母淀粉中直链淀粉的量要高于浙贝母淀粉中直链淀粉的量。两种贝母淀粉的颗粒尺寸为5~40μm,而且他们都小于马铃薯淀粉的颗粒尺寸。两种贝母淀粉颗粒的形状是圆形的和椭圆形的。热稳定性表明由于植物来源的不同导致淀粉颗粒结构不同,从而热稳定性存在明显的差异。结论两种贝母淀粉由于来源不同,物理化学性质存在明显的差异。     

恒河猴实验性变态反应性脑脊髓炎MR波谱与组织病理及超微结构改变的对照研究

目的　研究非人类灵长类实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)磁共振波谱 (MRS)改变的组织病理学基础。方法　 9只恒河猴 ,用同源猴脑白质或纯牛髓鞘碱性蛋白 (MBP)与完全福氏佐剂(CFA)的混合剂皮下注射诱导EAE ,对其发病前后进行自身配对对照研究 ,定量分析N 乙酰天门冬氨酸 /肌酸 (NAA/Cr)、胆碱复合物 /肌酸 (Cho/Cr)的参数变化 ,通过光学显微镜及透射电镜观察相对应组织的病理及超微结构改变。结果　急、慢性EAE的MRS测定均有NAA/Cr下降 (t值分别为 68 66和5 69,P值均 <0 0 5) ,统计学上差异有显著性意义。两者超微结构均观察到了轴索的空泡样变性及脂褐素颗粒的增加 ;急性EAE组织学表现为明显的炎性反应、严重区域髓鞘破坏和消失。慢性EAE炎性反应较轻 ,以脱髓鞘改变为主。慢性EAE同时伴有Cho/Cr的增高 (t=3 48,P <0 0 5) ,统计学上差异也有显著性意义 ,超微结构具有明显的脱髓鞘改变。结论　MRS定量分析可用于判定EAE脑部病变分期及预测组织病理学改变特征     

腹腔镜胆囊切除术中肝中静脉及其属支误伤出血的防范及处理

目的探讨腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)中肝中静脉及其属支误伤出血的预防和处理方法。方法对我院2008年1月至2010年1月期间27例行LC时肝中静脉及其属支损伤破裂出血患者的临床资料进行回顾性分析。结果 27例患者均在腹腔镜下止血成功,其中17例通过腹腔镜下填塞压迫止血,6例通过腹腔镜下钛夹钳夹止血,4例通过腹腔镜下缝扎止血。3种止血方法中以腹腔镜下填塞压迫止血法的手术时间最短、术中出血量最少,分别为(90.26±12.46)min和(240.32±80.15)ml,但3种止血方法的手术时间及术中出血量之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LC中要尽量在正确的层次分离胆囊床,以减少肝中静脉及其属支的损伤。采取正确的止血措施或止血困难时及时中转开腹,对安全完成手术至关重要。     

格特隐球菌vgⅡ基因型的快速鉴定和序列分型研究

目的 建立一种核糖体基因内间隔区(igs)的特异性pcr扩增和序列分析方法,用于快速鉴定格特隐球菌vgⅡ基因型及其亚型.方法 选取新型和格特隐球菌核糖体igs区中可变度最高的1区为靶点,经clustalx 2多重比对后,设计特异性扩增格特隐球菌vgⅡ基因型的引物用于pcr分析.通过扩增新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌来评价引物的特异性,并对阳性扩增片段(vgⅡ基因型)进行测序和序列分型研究.结果 基于核糖体igs区的特异pcr引物扩增所有受试格特隐球菌vgⅡ基因型菌株均为阳性,而新型和格特隐球菌其余基因型以及其他致病酵母菌均为阴性.序列分型显示,在扩增片段的72、79和104 bp处存在3个多态性位点,可用于区分vgⅡ基因型中的不同亚型.结论 该研究建立的特异性pcr扩增方法可快速、准确地鉴定格特隐球菌vgⅡ基因型,对扩增片段的序列分型可初步筛查高致病性的vgⅡa亚型. abstract： objective to establish a pcr method for rapid identification and sequence typing of vg Ⅱ allele of the intergenic spacer region (igs) of cryptococcus gattii.methods since igs1 was of high sequence variation,multiple alignments were conducted by clustalx 2 in igs1 of cryptococcus gattii and cryptococcus neoformans,and then primer sets specific to genotype vg Ⅱ was designed for pcr analysis.the specificity of the primer pair was detected by amplification of the other genotypes in cryptococcus gattii,cryptococcus neoformans,and other pathogenic yeasts.the amplified fragments from vg Ⅱ genotype were sequenced and subtyped.results using the pcr analysis developed in this study,all vg Ⅱ genotype strains tested were amplified,whereas no amplification was obtained from other genotypes or yeast species involved herein.three polymorphic nucleotide sites at 72,79 and 104 bp in the fragment amplified could be used to distinguish sub-genotypes within vg Ⅱ genotype.conclusions the pcr analysis developed in this study can be used for rapid identification of genotype vg Ⅱ of cryptococcus gattii.the sequence typing based on the amplified fragment from igs1 may be performed for screening the highly virulent sub-genotype vgⅡ a.     

山姜属中药黄酮类成分提取及分离富集方法研究进展

山姜属中药黄酮类成分具有温中散寒、温胃止呕等功效。该类化合物提取方法有浸提法、热水提取法、碱水或碱醇提取法、溶剂回流提取法、辅助提取法、超临界流体与亚临界流体提取法,以乙醇浸提法提取为主;分离富集方法有沉淀法、萃取法、柱色谱法(硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、大孔吸附树脂)、制备色谱法及逆流色谱法,以大孔吸附树脂、聚酰胺柱色谱为主。而近年来出现的提取与分离方法是超临界流体或亚临界流体以及制备色谱与逆流色谱等提取分离方法,可快捷与简便地提取出山姜属中药黄酮类成分。     

热带地区某综合医院院内真菌感染情况调查

目的 探讨住院患者医院内真菌感染的分布特点及危险因素,为制定有效的防控措施提供依据。方法 采用回顾性分析方法,对解放军总医院海南医院2013年1月—2017年12月住院患者中医院内真菌感染病例406例进行回顾性分析。以同期住院患者医院内非真菌感染病例1 514例为对照组,对可能的影响因素用χ²检验先进行单因素分析,将单因素分析有统计学意义（P<0.05）的变量引入非条件Logistic回归分析中行多因素分析。结果 >60岁年龄段发生真菌感染的比例最高,占66.50%。>70~80岁患者中死亡例数所占的比例最高,占26.67%。真菌感染患者中以假丝酵母菌属感染为主,占88.04%。真菌感染部位以肺部感染居首位,占47.6%。侵袭性念珠菌感染白色念珠菌感染所占的比例最高,占47.07%。危险因素分析：单因素χ²检验显示,9个变量是影响真菌感染的危险因素（P<0.05）,将9个变量纳入非条件 Logistic回归分析中,按照OR值的大小,分别为抗菌药物使用种类、年龄、是否曾住ICU、侵入性操作、住院时间。结论 加强老年患者保护性隔离措施,加强病房环境消毒隔离,对于高龄、接受侵入操作治疗患者应加强病原学监测,严格掌握抗菌药物的使用指征,有助于控制医院内真菌感染。