壳聚糖关节腔注射对膝骨性关节炎关节功能的影响对比研究

目的观察外源性壳聚糖对膝骨性关节炎关节功能的影响,并与透明质酸钠比较。方法将42例膝骨性关节炎随机分为壳聚糖组20例(26膝)和透明质酸钠组22例(28膝),患膝关节腔注射1%壳聚糖2m l或1%透明质酸钠2m l,1个月内注射3次为1个疗程,1年内4个疗程。测定治疗后1、4、7、12个月关节功能指数,检测关节液中IL-1、IL-6和TNF-α水平改变。结果壳聚糖组治疗、4、7、12个月后的关节功能指数分别为8.6±1.8、7.3±1.7、5.6±1.9,显著好于治疗前,第1、4、7、12个月有效率分别为19.2%、42.3%、50.0%和65.4%,但与透明质酸钠组比较无显著区别。两组患者关节液IL-1、IL-6和TNF-α水平均显著低于治疗前。结论外源性壳聚糖与透明质酸钠均能有效缓解膝骨性关节炎的临床症状。     

长效人白细胞介素4拮抗剂的研究

目的：研制保留白细胞介素4受体（IL-4R）结合能力,但不具有激活下游信号活性的人白细胞介素4（IL-4）突变体M5,并通过抗体Fc融合延长其体内半衰期,为变态反应病药物研发提供基础。方法全基因合成人IL-4突变体M5,将其克隆到pBV220表达载体,在大肠杆菌DH5α中表达M5蛋白。同时构建嵌合基因M5-IgG1 Fc,并克隆到pPICZαA载体中,电转化糖基工程毕赤酵母GJK01,经甲醇诱导,分泌表达M5-IgG1 Fc融合蛋白。利用CTLL-2／IL-4R细胞测定纯化所得M5蛋白、M5-IgG1 Fc融合蛋白的IL-4拮抗活性,最后利用ELISA试剂盒检测比较两者在小鼠体内的清除速度。结果由大肠杆菌DH5α表达的M5蛋白和糖基工程酵母GJK01表达的M5-IgG1 Fc融合蛋白都具有IL-4拮抗活性,它们在CTLL-2／IL-4R细胞上拮抗IL-4（5．6×10-2 nmol／ml）的EC50分别为（0．31±0．05）和（0．77±0．03）nmol／ml。小鼠体内M5蛋白在注射后0．5 h时达峰,其在血液中的含量为5．8×10－2 nmol／ml,而在2 h时血药浓度已下降为峰值的2．8％,在8 h时低于ELISA试剂盒的检测限。 M5-IgG1 Fc融合蛋白在注射后0．5 h时血液中浓度也达到峰值,为4．7×10－2 nmol／ml,120 h时其血药浓度下降为峰值的4．3％,而168 h时低于ELISA试剂盒的检测限。结论 M5蛋白具有IL-4拮抗作用。由糖基工程酵母表达的M5-IgG1 Fc融合蛋白不仅具有IL-4拮抗活性,而且在小鼠体内具有较长的半衰期,为下一步将其研发为治疗变态反应病的药物提供了理论基础。     

一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达

目的 选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因－TSF，在大肠肝菌表达，细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的C－末端13肽和TSP1的429－459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白－TSF。采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白。采用MTT方法测定TSF及其相关性GST－TSF，PF4（58－70），TSP1（429－459）等对血管内皮细胞，平滑肌细胞，QGY7721人肝癌细胞，HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的TSF融合基因，克隆到pGEX-2T载体，转化E .coli JM109，获得了TSF蛋白的高效表达。建立了TSF蛋白的纯化复性方法，获得了GST－TSF融合蛋白及TSF蛋白。TSF，GST－TSF，PF4（58－70）和TSP1（429－59）均特异抑制血管内皮细胞的生长，其中TSF的活性最强，活性大小次序为TSF＞GST－TSF＞PF4（58－70）＞TSP1（429－459）。结论 融合表达蛋白－TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。     

运动员心音图异常及其病理生理学探讨

第４心音在临床上可帮助诊断心脏的早期病理性改变，运动员出现第４心音可能与运动引起的心血管功能变化有密切的关系。本文通过对３０名不同专项运动员第４心音发生率、时限和振幅的分析并与临床病理性第４心音进行对比。结果发现：运动员第４心音与临床病理性第４心音有较大差异，其发生率、时限和振幅都远较临床为低。作者认为，结合其它物理检查，第４心音的出现有可能作为观察和判断运动员的机能状态，早期查明心血管病变及过度训练的重要指标之一。     

胸腺因子对严重胸外伤患者血清IL-6、TNF-α的影响

探讨白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在胸腺因子对严重胸外伤治病条件下的变化,认为严重胸外伤早期血清IL-6、TNF-α含量明显升高,胸腺因子具有降低血清中IL-6、TNF-α含量水平、预防ARDS及感染的发生。     

慢性心力衰竭患者CD4+CD25+调节性T细胞检测及意义

目的:探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)水平及意义。方法:采用流式细胞分析法,检测42例CHF患者(CHF组)和16例正常对照者(对照组)外周血CD4 CD25 Treg/CD4 T细胞比例。结果:CHF患者外周血CD4 CD25 Treg/CD4 T细胞比例[(12.2±3.8)%]显著低于对照组[(16.3±5.2)%]。CD4 CD25 Treg/CD4 T比例在缺血性心脏病者[(12.6±4.1)%]与非缺血性心脏病者(12.0±3.7%)间差异无统计学意义,但心功能NYHA分级Ⅲ~Ⅳ级者[(10.4±3.2)%]比例明显低于Ⅰ~Ⅱ级者[(13.3±3·8)%]。结论:CHF患者外周血Treg比例减少,且与心功能有一定关系。CD4 CD25 Treg比例降低可能打破了外周免疫耐受,参与了心力衰竭的发生发展。     

双膝关节置换术后早期心肾损伤及固有免疫的变化

目的 观察一期序贯双侧全膝关节置换手术后早期心肾功能损伤、全身炎症反应及可能的固有免疫调节机制.方法 选取2013年3月 ～6月在解放军总医院第一医学中心骨科住院、术中使用止血带的一期序贯双侧全膝关节置换手术患者15例,采用自身对照研究的方法,利用流式细胞技术观察术前24 h及术后4 h外周血CD14+单核细胞和中性粒...     

1084例女性TRACP、CTX-1、BALP、BGP、钙磷代谢指标 与BMD相关性

目的研究女性抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP)、I型胶原交联C-末端肽（CTX4)、骨碱性磷酸酶（BALP)、骨钙素 (BGP)、25著维生素D3(25( OH) D3)、甲状旁腺素（PTH)、降钙素（CT)与股骨颈BMD的相关性。方法采用Discovery WA型 骨密度仪检测股骨颈BMD,采用酶标免疫分析仪检测TRACP、CTX4、BALP、BGP、25 ( OH) D3、PTH、CT。将1084例受试者检 测结果按5岁为年龄段分组,应用SPSS 13. 0分析软件进行统计分析。结果25 (OH) D3、PTH、CT在35 ~ 50岁年龄段各组间 不存在差异;50岁以后25 (OH) D3开始下降,与丽D呈正相关;CT降低出现在65 ~ 79岁年龄段,与丽D显著正相关。35 ~ 45岁年龄段TRACP、CTX4与BMD呈负相关,而BALP、BGP与BMD呈正相关;50 -60岁年龄段BALP、BGP明显升高, TRACP、CTX4、BALP、BGP均与BMD呈负相关;65岁以后BALP、BGP开始下降,BALP、BGP与骨密度呈正相关,TRACP、CTX- 1与骨密度呈负相关。结论TRACP、CTX4、BALP、BGP、25 ( OH) D3、PTH、CT监测骨代谢水平为骨质疏松诊断、鉴别诊断提 供了分子生物学依据。     

LPS/TLR4信号通路在肝胆管结石病中的作用及机制研究进展

肝胆管结石病属于肝胆疾病中常见疾病之一。已证实胆道感染、胆汁淤积、上皮间质转化是该疾病发生发展的重要因素,近年来有研究发现LPS/TLR4通路介导的炎症在这些因素的致病过程中起重要作用。笔者对LPS/TLR4信号通路在肝胆管结石病中的潜在作用及相关机制进行综述,旨在为肝胆管结石病发病机制及防治的研究提供新的思路。     

严重创伤后氧对T细胞功能的影响

目的 探讨严重创伤后病人T淋巴细胞转化活性及CD4 T、CD8 T细胞活性变化,CTLA-4分子水平在严重创伤转归、干预治疗等方面的意义.方法 将133例病人分为创伤对照组46例、高流量吸氧组44例、高压氧组43例,创伤对照组患者入院后给予常规治疗;高流量吸氧组患者辅以5 L/min,120 min/d吸氧治疗;高压氧组患者辅以高压氧治疗(压力2 ATA,60 min/d).于3、7 d时间点,对各组分别进行T淋巴细胞转化活性、T淋巴细胞亚群及CTLA-4分子水平的测定.结果 与创伤对照组比较,高流量吸氧组和高压氧组患者的T淋巴细胞转化活性增高,CD4 T细胞数明显增多(P＜0.01),CD4 /CD8 细胞比值明显增加(P＜0.01),T细胞表面和总CTLA-4分子表达明显降低(P＜0.01);与高流量吸氧组相比,高压氧组患者的T淋巴细胞转化活性增高,CD4 T细胞数明显增多(P＜0.05),CD4 /CD8 细胞比值明显增加(P＜0.01),T细胞表面和总CTLA-4分子表达降低(P＜0.05).结论 氧能够明显提高T淋巴细胞转化活性,使CD4 T细胞增多,CD4 /CD8 细胞比值明显增加,并且明显降低T细胞表面和总CTLA-4分子的表达.