计算法测定肾小球滤过率的临床应用价值

目的 :探讨采用 WCP公式计算方法测定肾小球滤过率 (GFR)的临床应用价值。方法 :采用 99m Tc DTPA清除率测定 6 6例不同疾病住院患者 GFR(Tc GFR) ,并测血清肌酐 (SCr)及尿素氮 (BU N) ,同时以 WCP公式、Robert公式计算 GFR(WCP GFR,Robert GFR) ,以 Cockcroft/ Gault公式计算内生肌酐清除率 (CG CCr) ,所得数据进行对比研究及相关性分析。结果 :除肾功能正常者 CG CCr与 BU N无显著相关外 ,肾功能不全及肾功能正常者的 WCP GFR、Robert GFR、CG CCr均分别与 Tc GFR呈显著正相关(P均 <0 .0 1) ,与 BU N、SCr呈显著负相关 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;与 Robert GFR、CG CCr比较 ,WCPGFR始终与 Tc GFR最接近 (P均 >0 .0 5 ) ;WCP GFR、Robert GFR、CG CCr与 Tc GFR的平均差绝对值逐渐增大 ,三者间差异显著 (P均 <0 .0 5 )。结论 :WCP GFR、Robert GFR、CG CCr均能在一定程度上准确反映 GFR,而以 WCP GFR更准确 ,且简便、快速、安全而廉价 ,可代替 Tc GFR应用于临床     

白细胞介素-12基因再修饰基因瘤苗免疫小鼠的脾细胞过继治疗肝癌

目的　探讨白细胞介素 (IL) 2和B7 1双免疫基因转染肝癌细胞瘤苗免疫小鼠后获得的脾淋巴细胞经mIL 12基因修饰后治疗小鼠肝癌的可行性和疗效。方法　用 2 0 0PFU 细胞滴度的重组腺病毒载体 (Adv)将人IL 2和B7 1基因共同转染小鼠肝癌Hepal 6细胞株 ,经 80mg L丝裂霉素 (MMC)处理制备成肝癌细胞瘤苗 ,免疫同系小鼠后分离其脾淋巴细胞 (SLC) ,转染mIL 12基因 (Adv滴度 2 0 0PFU 细胞 )后注射入直径 1cm的小鼠皮下移植肝癌内 ,观察抗瘤效果。结果　转mIL 12基因SLC治疗组小鼠瘤体增加值最小 ( 0 .0 8± 0 .0 5 )cm3,与各对照组比差异有显著性 [(转染BGFP基因SLC、未转染SLC和生理盐水注射组分别为 ( 3 .46± 0 .15 ) ,( 3 .5 6± 0 .2 3)和( 8.12± 0 .5 4)cm3,P <0 .0 5 ]。结论　IL 2和B7 1双基因修饰肝癌瘤苗诱导小鼠产生的免疫脾淋巴细胞可能成为一种新的过继免疫治疗效应细胞及携带IL 12基因的载体细胞 ;基因治疗、特异性主动免疫和过继性细胞免疫治疗结合将有更优越的抗瘤效果。     

天花粉蛋白对荷人肝癌裸小鼠的抑癌作用

目的 探讨天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对荷人肝癌裸小鼠的抑癌作用。方法 采用人肝癌原位移植模型。将24只裸小鼠分为TCSⅠ组、TCSⅡ组、TCSⅢ组和对照组，TCS剂量分别为0．2mg／kg、0．4mg／kg、0．6mg／kg，对照组用生理盐水0．2ml／只腹腔注射，共10次。第21天称瘤重和裸小鼠体重，计算抑癌率。应用免疫组织化学技术，检测瘤组织中Ki67的表达。结果 对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组平均瘤重分别为0．99g、0．81g、0．22g和0．20g。用药组瘤重与对照组相比有显著性差异(P＜0．05)。TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组抑癌率分别为18．18％、77．78％、79．80％。对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组平均鼠重增加为2．22g、1．22g、0．28g、一2．37g。用药组与对照组鼠重变化有显著性差异(P＜0．05)。对照组、TCSⅠ组、TCSⅡ组和TCSⅢ组Ki67蛋白阳性表达百分率分别为31．33％、29．92％、10．25％和9．67％。TCSⅠ组Ki67百分率与对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。TCSⅡ组和TCSⅢ组Ki67百分率与对照组相比有显著性差异(P＜0．05)。结论 TCS对荷人肝癌裸小鼠的移植瘤有明显的抑癌作用。TCS抑制肿瘤细胞增殖可能是其抑癌的机制之一。     

白细胞对早期糖尿病视网膜病变作用的研究

目的探讨白细胞在早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管中粘附、堆积及其与视网膜微血管形态学变化的关系。方法健康成年雄性Wistar大鼠90只，随机分成正常对照组和链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）诱导的糖尿病组各45只（3、7、14 d组各5只，30、90、180 d组各10只）。取大鼠右眼制备视网膜消化铺片，进行形态学观察及白细胞共有抗原（leukocyte common antigen, CD45）单克隆抗体免疫组织化学研究。结果正常对照组视网膜毛细血管中有少许CD45阳性细胞；糖尿病发生3 d后，CD45的表达明显增加，病程第14 d达高峰，以后基本稳定。病程90 d时，视网膜毛细血管已出现节段性膨大、囊样扩张及闭锁等形态学改变；病程180 d时，上述病变进一步加重。结论白细胞粘附发生在糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy, DR）的早期阶段，是DR在微血管水平病理变化的开端。白细胞粘附可能作为视网膜微血管形态学改变的基础，在DR的发生发展中起着重要作用。(中华眼底病杂志,2003,19:344-347)     

人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。     

胰腺黏液非囊性癌9例临床分析

目的探讨胰腺黏液非囊性癌的组织学特点、生物学特征、治疗方法及预后。方法回顾性分析复旦大学附属中山医院普外科2000~2005年间收治的9例胰腺黏液非囊性癌病人的临床特点、影像学改变、病理学特征、治疗经过及随访资料。9例胰腺黏液非囊性癌病人,男7例,女2例,年龄平均(63·1±8·7)岁。肿瘤位于胰头8例,胰体尾1例。行胰十二指肠切除术8例,其中4例合并扩大淋巴结清扫术,1例行胰体尾切除。结果术后病理报告:瘤体平均4·3cm×4·3cm×4·4cm。镜下见8例胰头肿瘤均侵犯十二指肠,侵犯肠系膜上静脉4例。肿瘤侵犯神经3例,淋巴结转移2例。镜下肿瘤表现明确的间质黏液湖及其上漂浮较少的恶性上皮细胞。随访8例,死亡5例。术后存活5~23个月,平均存活11个月,均死于肿瘤复发和肝转移。结论胰腺黏液非囊性癌应是胰腺恶性肿瘤的一个独立的类型,其生物学特征有待进一步研究。     

术中输注氨基酸对硬膜外阻滞复合全麻开胸手术患者围术期体温的影响

目的评价术中输注氨基酸对硬膜外阻滞复合全麻食管癌和贲门癌手术患者围术期深部体温和代谢的影响。方法择期食管癌和贲门癌手术患者21例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为3组(n =7):从麻醉诱导开始至手术结束,分别静脉输注氨基酸混合液240kJ·h-1(AA组)、等容量乳酸钠林格氏液(LR组)、葡萄糖溶液240kJ·h-1(GLU组)。麻醉诱导前至术后2h每5分钟测定鼓膜温度,于麻醉诱导前即刻、手术开始后1h和术后1h检测指尖血糖,采用4分表法评价术后2h内寒战的发生情况,采用间接测热仪测定术前与术后氧耗。结果与麻醉诱导前即刻比较,术后30min LR组和GLU组氧耗降低,AA组氧耗升高(P<0.01),术后2h LR组、GLU组鼓膜温度降低(P<0.05),AA组差异无统计学意义(P>0.05);与LR组和GLU组比较,AA组术后2h内寒战发生例数减少(P< 0.05),术后30min氧耗增多(P<0.05),LR组与GLU组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论硬膜外阻滞复合全麻开胸手术患者术中静脉输注氨基酸可通过提高基础代谢率,缓解围术期深部体温降低,减少术后寒战发生,而输注葡萄糖不产生此效应。     

免疫组化在恶性间皮瘤鉴别诊断中的应用价值

目的 对恶性间皮瘤进行免疫组化的对比性研究,以进一步评价它们在恶性间皮瘤鉴别诊断中的价值。方法 采用免疫组织化学染色(LSAB)法对22例恶性间皮瘤和20例对照组腺癌组织进行EMA、CEA、CK、vimentin、间皮细胞(M-cell)等5种单克隆抗体的标记。结果 恶性间皮瘤的阳性率分别为 M-cell 91％,CEA 9％,vimentin 73％,CK82％,EMA64％;而腺癌的阳性率为分别为M-cell5％,CEA 85％,vimentin 15％,CK100％,EMA 100％。结论 在恶性间皮瘤和腺癌的鉴别诊断中,M-cell和CEA是较理想的标记物,尤其是M-cell,CEA和vimentin三种抗体联合应用更具有价值。而在恶性间皮瘤和其他梭形细胞肿瘤的鉴别诊断中,还应联合使用CK和EMA。     

视网膜特异性表达人血管内皮生长因子 基因载体的构建

目的构建在视网膜组织特异性表达的人血管内皮生长因子（VEGF）₁₆₅基因。方法用聚合酶链反应(PCR)方法从BLAB/C鼠全基因组扩增能在视网膜组织特异性表达的rho启动子，经限制性内切酶纯化后克隆于质粒pcDNA^3.1+-VEGF₁₆₅中，建立重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅，通过限制性内切酶酶切分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅,由jetPEI介导转染人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞，并通过免疫组织化学染色以及绘制细胞生长曲线检测在人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞中VEGF蛋白的表达。结果在人视网膜色素上皮细胞中，重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅比质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅的VEGF蛋白表达强，在人脐静脉内皮细胞，两者的表达量无明显差别。结论pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅载体的构建为进一步研究VEGF在视网膜新生血管形成中的致病机理提供基础材料，并为进一步建立视网膜特异性表达VEGF转基因鼠模型建立了基础。(中华眼底病杂志,2005,21:106-109)