云南萝芙木根中吲哚生物碱及其抗菌活性

目的 研究云南萝芙木Rauvolfia yunnanensis根中的吲哚类生物碱化学成分及抗菌活性,明确该植物抗菌活性成分。方法 采用硅胶柱色谱、RP-C₁₈、Sephadex LH-20、半制备HPLC等方法进行分离纯化,结合波谱数据及文献参数对化合物进行结构鉴定,并采用微量肉汤稀释法对单体化合物进行抗菌活性评价。结果 从云南萝芙木根醋酸乙酯部位共分离得到20个吲哚类生物碱化合物,分别鉴定为维诺任碱（1）、霹雳萝芙木碱（2）、四叶萝芙木新碱（3）、萝加灵（4）、西特斯日钦碱（5）、缝籽木醇（6）、柯楠醇（7）、二氢柯楠醇（8）、毛茶碱（9）、异毛茶碱（10）、佩立任碱（11）、10-羟基-16-表-花菊醇（12）、育亨宾（13）、降马枯星碱B（14）、洛柯碱（15）、阿枯米定碱（16）、去乙酰阿枯米灵（17）、利血平（18）、哈尔满碱（19）、梅林诺宁F（20）。其中化合物20对白色念球菌表现出较好的抗菌活性,最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）值为3.12μg/mL,与临床抗真菌药物氟康唑的MIC值相同。化合物1、11对大肠杆菌,化合物11、13、20对枯草芽孢杆菌均表现出一定的抗菌活性,MIC值为6.25～12.50 μg/mL,活性与植物源抗菌药物小檗碱相当。结论 化合物20为首次从萝芙木属中分离得到,化合物6、8～13、16～18均为首次从该植物中分离得到,部分单体化合物表现出潜在抗菌活性。     

37种滇产中草药体外抗菌活性筛选

目的测定37种云南中草药的80%乙醇提取物的体外抗菌活性。方法用回流和冷浸(11种)2种提取方法制备37种云南中草药醇提物,用琼脂扩散法进行体外抑菌试验;用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)。结果 37种云南中草药的醇提物中,有33种对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌有不同程度的抑制活性;其中山乌龟、云南勾儿茶等14种中草药对标准金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,抑菌圈为15～20 mm;对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌圈为8～23 mm,MIC为128～512μg·mL-1,MBC为128～>1024μg·mL-1。结论山乌龟、云南勾儿茶、算盘子等6种中草药对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均具显著抑菌效果,部分中草药对铜绿假单胞菌和大肠埃希菌也有一定的抑菌效果,呈现一定的广谱抗菌活性。     

In vitro effects of active components of Polygonum Multiflorum Radix on enzymes involved in the lipid metabolism

Ethnopharmacology relevance

Raw and processed Polygoni Multiflori Radix (PMR and PMRP) are used in the prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), hyperlipidemia or related diseases. In our previous research, 2, 3, 5, 4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-d-glucoside (TSG) displayed the most important role in the total cholesterol (TC) lowering effect among all the chemical constituents of Polygonum multiflorum. Emodin and physcion displayed more favorable triglyceride (TG) reducing effects than TSG. However, there are few researches focus on the approach and mechanism of how do Polygonum multiflorum exhibit good lipid regulation activity. The targeted sites of active substances of Polygonum multiflorum are still not clearly elucidated. This research pays close attention to how major chemical components of Polygonum multiflorum affect the TC and TG contents in liver cells.

Materials and methods

In this research, a sensitive, accurate and rapid in vitro model, steatosis hepatic L02 cell, was used to explore target sites of active chemical substances of Polygonum multiflorum for 48 h. Steatosis hepatic L02 cell was exposed to emodin, physcion and TSG, respectively. The contents of four key enzymes in the pathway of synthesis and decomposition of TC and TG were investigated after exposure. Meanwhile, the contents of lipid transfer protein were also tested. The diacylgycerol acyltransferase 1 (DGAT1) controlled the biosynthesis of TG from free fatty acids while 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMG-CoA reductase) limited the biosynthesis of TC. Hepatic triglyceride lipase (HTGL) and cholesterol 7α-hydroxylase (CYP7A) played the key role in the lipolysis procedure of TG and TC.

Results

The synthesis of TC and TG in steatosis L02 cells were apparently increased in the model group compared to the control group. Intracellular contents of HMG-CoA reductase and DGAT1 increased 32.33% and 56.52%, while contents of CYP7A and HTGL decreased 21.61% and 47.37%. Emodin, physcion and TSG all showed down-regulation effects on HMG-CoA reductase, while up-regulation effects on CYP7A. The most remarkable effect on HMG-CoA reductase was found on emodin. Emodin could reduce the DGAT1 content from 438.44±4.51 pg/mL in model group to 192.55±9.85 pg/mL (100 μm). The content of HTGL in 300 μm physcion group was 3.15±0.15 U/mL, which was more significantly effective than the control, lovastatin and fenofibrate group.

Conclusions

TSG could raise the content of CYP7A and then promote the lipolysis of cholesterol. Moreover, TSG also showed the best LDL-reducing effect. Emodin could inhibit HMG-CoA reductase and DGAT1, which were key enzymes in the synthesis of TC and TG. Physcion increased the content of HTGL, and then could boost the lipolysis of triglyceride. At the same time, physcion showed the best VLDL-reducing effect. In view of the above conclusions, we contributed the lipid regulation activity to an overall synergy of TSG, emodin and physcion.     

饮片规格对何首乌化学成分溶出和肝细胞毒性的影响

根据不同规格何首乌的煎煮成分对肝细胞毒性的差异,探讨何首乌饮片规格对其安全性的影响。该研究通过建立何首乌8种主要化学成分的含量测定方法,测定不同规格何首乌水煎液样品中各化学成分的含量,并以其对正常人L02肝细胞的抑制率作为肝毒性的评价指标,采用多元相关分析,试图找出与毒性相关的化合物。结果显示不同规格何首乌饮片成分溶出差异较大,何首乌打粉饮片的肝细胞毒性显著强于何首乌块状饮片;通过多元相关分析发现了3个与何首乌肝毒性密切相关的成分。结果揭示了饮片规格与何首乌肝细胞毒性的关系,其中粉状规格饮片毒性相对较大,有一定的肝损伤风险,应予以高度重视。     

中药内服治疗腰椎骨性关节炎近10年文献潜在用药规律探讨

目的:探讨治疗腰椎骨性关节炎的内服中药用药规律,为腰椎骨性关节炎临床中的辨证论治和遣方用药提供相应的理论依据。方法:检索近10年内服中药治疗腰椎骨性关节炎的临床文献,通过统一的纳入标准、排除标准,合并和删除重复文献,分析腰椎骨性关节炎的内服中药用药规律。结果:从693篇有效文献中总结出使用频率最多的前30味中药依次是:当归、川芎、甘草、杜仲、牛膝、熟地黄、白芍、独活、红花、茯苓、肉桂、秦艽、细辛、没药、黄芪、桑寄生、桃仁、地龙、防风、乳香、续断、党参、全蝎、鸡血藤、附子、威灵仙、赤芍、木瓜、山茱萸、丹参。结论:近10年文献中内服中药治疗腰椎骨性关节炎的功效主要以活血化瘀、补益肝肾、强筋健骨、祛风散寒除湿、补气养血为主。     

生物测定法用于中药质量评价的探索研究——以夏枯草抗氧化活性与总酚酸含量相关性的研究为例

研究不同来源及不同部位夏枯草的抗氧化活性,并对其所含原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸5种酚酸类成分含量进行测定,探讨夏枯草抗氧化活性与总酚酸含量间的相关性,为制定科学合理的质量标准服务。以夏枯草50%甲醇提取液为研究对象,分别采用DPPH和HPLC测定夏枯草的抗氧化活性及原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸5种酚酸类成分的含量。DPPH采用夏枯草50%甲醇提取液0.5 m L与0.1 mmol·L~(-1)DPPH·乙醇溶液反应60 min,于517 nm波长处测定吸光度,用清除率及IC50进行抗氧化活性评价。HPLC采用Epic C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,280 nm进行检测。采用偏最小二乘法对多批不同产地和不同部位夏枯草的抗氧化能力与其中5种酚酸类成分的总含量间的相关性进行分析。夏枯草50%甲醇提取液与0.1 mmol·L~(-1)DPPH·乙醇溶液反应的量效范围为0.300~1.65 g·L~(-1)(药材),原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸的进样量分别在0.007 84~0.980,0.011 5~1.44,0.008 64~1.08,0.080 0~1.00,0.079 8~0.998μg与各自峰面积积分值成良好的线性关系。5种成分的平均加样回收率分别为97.76%,96.88%,100.3%,102.1%,104.5%,RSD分别为1.8%,1.6%,1.7%,0.62%,0.75%。夏枯草各部位的抗氧化能力与总酚酸含量和在一定的药材质量范围内具有良好的线性相关性。因此,在确定的药材质量范围内,采用DPPH生物测定法结合HPLC含量测定法共同用于夏枯草药材的质量控制,可考虑作为一种新的尝试用于夏枯草质量标准的修订。     

七叶一枝花甾体皂苷种类及含量差异研究进展＊

重楼是我国传统的名贵中药，七叶一枝花为历版《中国药典》收载的重楼药材两个基原植物之一，具有清热解毒、消肿止痛、活血化瘀等功效，其主要活性成分为甾体皂苷类物质。由于重楼市场需求量剧增和七叶一枝花成药时间较长，导致大量依靠人工种植。然而，人工种植过程中产地、采收年限和采收月份都会影响七叶一枝花的甾体皂苷含量。本文系统地总结了七叶一枝花中主要活性成分甾体皂苷的种类，以及不同产地、不同生长年限及不同采收月份的七叶一枝花根茎中甾体皂苷含量差异的研究现状，以期为进一步研究七叶一枝花品质差异、野生资源驯化及规范化种植提供参考。     

绝经后女性骨质疏松症的影响因素及中医证型分布规律初探

目的:观察分析绝经后女性骨质疏松症的影响因素并总结中医证型分布规律。方法:选取2010年3月至2013年3月在我科诊治符合入组条件的绝经后骨质疏松症患者238例,随机分为对照组(骨密度正常组),观察组(骨质疏松组)。通过对患者年龄、绝经年龄、绝经年限、身高、体重等资料的收集,进行统计分析。观察组经我科副主任以上职称医师诊断,判定病例各自分属证型,然后进行统计分析。结果:2组病例在年龄、绝经年龄、绝经年限、体重指数方面比较中,差异有统计学意义(P0.05);在证型分布规律可以看出气滞血瘀证和肾精不足证患者所占比重大于脾肾阳虚证及肝肾不足证。结论:患者年龄的增大、绝经年限的增长、体重指数偏低等因素与绝经后骨质疏松症关系密切。中医证型分布依次为气滞血瘀证肾精不足证脾肾阳虚证肝肾不足证。在临床中可适当加入活血化瘀、滋补肾精、温补脾肾阳气、滋补肝肾等中药,值得进一步研究和总结归纳。     

中药酸味的药性表达及在临证配伍中的应用

对中药五味中"酸"味的概念、功效内涵、来源以及与药性理论的内在联系进行了归纳。阐述应用电子舌仿生技术及化学分析手段进行酸味物质基础研究的思路和模式,提出酸味的表征方式及其物质基础拆分的研究方法,并总结了酸味中药的临床应用与配伍规律,为酸味药性的表达及临床合理应用提供研究思路和理论依据。     

中国-老挝传统药物在传染性疾病治疗中的应用比较和前景分析＊

老挝是中国依山带水的友好邻邦，其传统医药受中医文化影响较深，在药材选用、临床治疗等方面具有相似相通之处，且受益于自身独特的生物多样性，老挝传统医药亦颇具创新之处。在“一带一路”的倡议下，中老在医药领域开展了广泛的合作，极大地促进了两国传统医药的发展。本文总结了传统医药在中老两国常见传染性疾病中的应用和效果评价，并分析了传统医学交流的现状和发展前景。中老传统医药的“交流互鉴”将推动两国传统医药更高水平的发展，为走向世界、融入主流医学奠定基础。