乳糖酶在大肠杆菌中的高效表达与纯化

目的克隆并分析乳酸菌LacZ基因,构建其原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导融合蛋白表达,并纯化得到纯度较高的目的蛋白。方法采用PCR方法从乳酸菌中扩增出LacZ基因,测序和序列分析。将其克隆至克隆载体pGM-Tvector中,筛选阳性克隆后回收目的片段,将其克隆入原核表达质粒pGEX-6p-1,构建其重组表达质粒pGEX-6p-1/LacZ。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot分析鉴定,最后通过纯化得到单一的目的蛋白。结果 PCR扩增获得3024bp的LacZ基因,测序得知序列与GeneBank报道的序列一致,序列分析表明,该序列开放读码框有3024bp,推测肽链具有1008个氨基酸,蛋白分子量为114KDa,等电点为4.9。构建了重组表达质粒pGEX-6p-1/LacZ,IPTG诱导其高效表达出融合蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot分析鉴定出所表达蛋白的分子量为140KD,与融合蛋白的分子量一致。最后利用Glutathione Sepharose 4B对表达产物进行纯化,得到单一的目的蛋白。结论成功地构建了乳酸菌LacZ基因的原核表达质粒,通过序列分析并诱导表达,最后纯化得到单一的目的蛋白,为进一步生产低乳糖奶奠定基础。     

冠心病患者载脂蛋白M水平与瘦素和血脂的相关性

目的探讨冠心病(CHD)患者血清载脂蛋白M(apoM)水平与瘦素(Leptin)和血脂的关系。方法根据冠状动脉造影结果,将120例受试者分为CHD组(73例)和对照组(47例),应用酶联免疫吸附测定法检测受试者血清apoM和Leptin水平。分析apoM与Leptin、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI、载脂蛋白B、脂蛋白a[LP(a)]的相关性。结果73例CHD患者apoM的水平为(10.12±1.79)ug/ml,明显低于健康对照者(11.69±2.02)ug/ml(P0.01);apoM与Leptin、HDL-C呈正相关(P均0.01),与LDL-C、LP(a)呈负相关(P均0.05)。多元逐步回归显示apoM与Leptin的关系最密切。结论apoM可能参与CHD的形成与发展,是抑制动脉粥样硬化的保护性因子。     

异丙酚与异氟醚麻醉对上腹部手术围术期应激变化的影响比较

目的:比较异丙酚与异氟醚对上腹部手术患者围手术期应激变化的影响。方法:将60例拟行上腹部手术患者随机均分为异丙酚组(A组)和异氟醚组(B组),并分别应用异丙酚与异氟醚麻醉。分别于麻醉前5min(T1)、麻醉后60min(T2)和术后24h(T3)采集患者静脉血,应用放射免疫法测定血清生长激素、皮质醇含量及血糖水平并监测其血液流变学指标。结果:2组患者T2时间点血糖、皮质醇均显著升高,且B组血糖、皮质醇升高更为显著(P<0.05);2组患者T3时间点血糖、皮质醇均不同程度下降,且A组下降更为显著(P<0.05)。A组T2、T3时间点血液流变学指标下降与B组比较更为显著(P<0.05)。结论:异丙酚较异氟醚对机体内分泌系统的影响小,对围手术期强烈的应激反应抑制效果较好,且能有效降低血液黏度。     

海口市273例体检人群阴道中假丝酵母菌种类的初步研究

目的 研究妇科体检人群中阴道假丝酵母菌的分布情况.方法 将收集的273例妇检阴道拭子保存在含有抗生素的YEPD液体培养基中,然后接种到YEPD平板上分离培养.分离出的酵母菌通过菌落形态、制片革兰染色,乳酸酚棉蓝染色及显色培养基作初步鉴定;并通过芽管形成试验、厚膜孢子、假菌丝生成试验及DNA ITS序列分析进行菌种鉴定.结果 273例标本中分离出47株(17.2％)假丝酵母菌,其中白假丝酵母菌24株(51.1％),光滑假丝酵母菌13株(27.7％),克柔假丝酵母菌8株(17.0％),热带假丝酵母菌1株(2.1％),其他假丝酵母菌1株(2.1％).进一步分析显示,不同年龄段和不同妇科疾病的假丝酵母菌检出率差异均无统计学意义(P＜0.05).结论 体检人群外阴阴道中的假丝酵母菌致病菌种类以白假丝酵母菌为主,其次是光滑假丝酵母菌.假丝酵母菌感染与年龄、妇科疾病种类的关系不明显.     

海南省各医院麻醉科现状调查分析

麻醉是阻碍外科学发展的因素之一,提高麻醉质量,不仅要配备麻醉设备,还需要完善的人才培养及各种麻醉管理制度.为了解海南省各医院麻醉科的现状,为麻醉学科今后的发展及相关政策的制定提供基本数据,笔者对全省各医院麻醉科进行信函调查,现报告如下.     

手术确认表在患者安全管理中的应用

目的 探讨手术小组确认手术患者记录表在患者安全管理中的应用效果.方法 自行设计手术小组确认手术惠者记录表,内容包括手术患者身份、手术部位、手术方式以及麻醉与手术前实施"暂定"程序四部分.随机选择2008年10月为除局麻外择期手术患者实施手术的50个手术小组250人为观察对象,比较手术确认表应用前后确认手术患者执行率.结果 手术确认表应用后确认执行率均为100%,应用前为44.0%～100.0%,应用前后比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 手术小组确认手术患者记录表的应用有效提高了手术小组确认手术患者的准确性和依从性,确保手术患者安全.     

老年胫骨平台骨折内固定失效原因与对策

[目的]通过对老年胫骨平台骨折手术治疗失效的病例分析,探讨失效原因及防范对策.[方法]对1990年1月～2006年10月间经治的60例病人中的19例内固定失效病例,做回顾性总结分析.[结果]60例均获随访,随访时间最短18个月,最长48个月,平均随访32个月.膝关节功能按雍氏评级标准.有19例发生内固定失效,占31.7%.判定标准:关节面塌陷>3 mm和/或轴向对线不良>5°,关节脱位,螺钉钢板松动,螺钉穿出关节面.[结论]术前未对老年患者伤情进行正确诊断评估,未能正确判断骨折类型,手术适应证的掌握及内固定方式选择失当,手术操作中植骨术欠规范,复位固定未达到解剖要求等是造成内固定失效的主要原因.     

溶血磷脂酸对宫颈癌细胞增殖、黏附、迁移和凋亡的影响

目的: 研究溶血磷脂酸(LPA)对宫颈癌HeLa细胞增殖、黏附、迁移和凋亡的影响及其作用机制.方法: LPA作用于细胞后,细胞计数法观察细胞的增殖;MTT法测定细胞对顺铂的敏感性、流式细胞仪检测顺铂诱导的凋亡;transwell小室检测细胞迁移能力变化;黏附实验测定细胞黏附力;同时,观察抑制剂Y27632、 LY294002、 PD98059对LPA功能的影响.结果: LPA以时间和剂量依赖方式促进细胞增殖,MEK1抑制剂显著抑制LPA的促增殖作用;LPA以剂量依赖方式显著促进HeLa细胞的迁移、和对细胞外基质的黏附,Rho激酶抑制剂显著抑制LPA诱导的迁移和黏附;LPA保护顺铂诱导的细胞凋亡,PI3K抑制剂可显著阻止LPA此作用.结论: LPA可以通过多种信号传导通路途径促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和黏附,并抑制细胞凋亡.     

老年抑郁症脑神经环路改变的影像学研究进展

目的综述老年抑郁症脑神经环路的变化及影像改变中的应用。方法文献综述法。结果大量的研究表明,老年抑郁症患者存在神经解剖环路(边缘-皮质-纹状体-苍白球-丘脑通路)的改变。结论老年抑郁症核心症状是情感的障碍以及认知功能的改变,老年抑郁症患者神经解剖神经环路功能的异常可通过DTI、MRS、fMRI及其它脑功能成像技术得到证实。     

“卫生统计学”教学改革新尝试

卫生统计学原理抽象、公式繁多以及大量的数字运算,这些容易使学生学习产生畏难情绪.本文通过注入式教学和讨论式教学相结合、集体教学和个体教学相结合、社会医学教学和统计教学相结合、"三下乡活动"和统计教学相结合、学生反馈和教学相结合,从而有效地提高了教学质量,实现了教学目的 .