火器多发伤后肠源性感染的实验猪模型

在多发伤时 ,细菌移位是否更容易发生 ,及其在多发伤后病理机制中起何种作用 ,目前尚缺乏实验研究的证据。为探讨多发伤时肠道细菌及内毒素移位问题 ,笔者设计了一种新的动物模型。现介绍如下。一、材料与方法1.实验动物 :成年 [(15± 5 )个月 ]小型香猪 (北京农业大学畜牧研究所提供 ) ,体重 (2 5± 5 )ｋｇ。2 .模型制作 :术前准备 :术前禁食 1ｄ ,氯胺酮肌肉注射麻醉 (10ｍｇ ｋｇ)后 ,将动物仰卧固定 ,备皮 ,常规消毒 ,铺无菌巾。静脉注射质量浓度为 2 0ｇ Ｌ的戊巴比妥钠维持麻醉 (15～ 2 0ｍｇ ｋｇ)。经颈静脉插入Ｓｗａｎ -Ｇａｎｚ…     

气管内注入脂多糖法建立大鼠慢性支气管炎模型

慢性支气管炎（慢支）是呼吸系统常见病,其防治研究已受到国内外普遍重视。为探索一种简便可靠的制作慢支动物模型的方法,我们参考Li等[1]在1996年欧洲呼吸协会年会上报告的气管内注入脂多糖（LPS）,以观察杯状细胞转化的方法并加以改进,摸索制作大鼠慢性支气管炎和阻塞性肺气肿模型。材料与方法大鼠慢支模型的制备：雄性SD大鼠料只（军事医学科学院实验动物中心提供）,体重lop－250g,鼠龄12周,,随机分为：（l）慢支模型组（模型组,7只）：用1％戊巴比受纳（50仰少物腹腔注射麻醉,仰卧位固定于操作台,暴露声门,以静脉套管外…     

不同细胞刺激剂对小鼠调节性T细胞功能活化的影响

目的研究体外实验中不同细胞刺激剂对小鼠调节性T细胞(Treg)表面T淋巴细胞毒性相关抗原-4(CTLA-4)及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)表达的影响,并对不同细胞刺激剂在Treg抑制活性发挥中的作用进行比较。方法免疫磁珠法分离健康清洁级BALB/c小鼠脾脏CD4 CD25 Treg。采用植物凝集素(PHA,20 mg/L)、刀豆蛋白A(ConA,5 g/L)及固相包被抗CD3(1 mg/L)刺激Treg,观察刺激后24、48和72 h CTLA-4及Foxp3表达的时间-效应关系。结果PHA刺激对小鼠Treg细胞表面CTLA-4及Foxp3表达均无显著影响(P均>0.05);而ConA表现出一过性的Treg活化作用,24 h CTLA-4表达明显上调(P<0.01),但随刺激时间延长作用减弱,48 h和72 h后其表达已接近未刺激前的范围,同时ConA未能明显诱导Foxp3表达(P>0.05);抗CD3可有效刺激Treg活化,在24、48和72 h CTLA-4及Foxp3表达均明显上调(P<0.05或P<0.01),其中以作用24 h和48 h表达上调尤为显著(P均<0.01)。结论抗CD3在体外实验中能明显刺激Treg活化并诱导其抑制性相关分子CTLA-4及Foxp3的表达,为进一步探讨CD4 CD25 Treg的免疫调节效应提供了可能。     

基因表达谱芯片分析肠缺血-再灌注大鼠肝脏多基因表达的变化

目的：分析正常和肠缺血-再灌注大鼠肝脏多基因表达谱的差异。方法：用cDNA Microarray技术分析1176个巳知基因在正常和肠缺血-再灌注大鼠肝脏表达的变化，并找出差异表达基因。结果：cDNAMicroarray分析数据显示；肠缺血-再灌注大鼠肝脏表达量变化5倍以上的基因有111个，包括上调基因64个，下调基因47个，其中一些基因尚未见与缺血-再灌注损伤相关研究报道。结论：肠缺血-再灌注能引起肝脏多种结构和功能基因表达变化，这种变化可影响全身炎症反应综合征和多器官功能障碍综合征发生和发展过程。     

CD+14单核细胞人类白细胞抗原-DR预测脓毒症预后及指导免疫调理治疗的初步临床研究

目的：验证CD14^ 单核细胞人类白细胞抗原－DR（HLA－DR）对于评估严重脓毒症患者免疫功能的作用；探讨胸腺5肽（TP－5）治疗免疫抑制的有效性。方法：符合严重脓毒症标准，CD14^ 单核细胞HLA－DR＜30％的患者被定义为脓毒症免疫抑制和代偿性抗炎症反应综合征（CARS）者纳入本研究，并接受1mg TP-5肌肉注射，1次／d，直至CD14^ 单核细胞HLA－DR＞50％或死亡。在TP－5治疗前及结束治疗时分别测量CD14^ 单核细胞HLA－DR和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白介素－6（IL－6）、IL－10和IL－13。结果：15例患者存活，5例死亡。经TP－5治疗后所有患者的CD14^ 单核细胞HLA－DR均有不同程度提高，但仅存活者有显著差异。所有患者细胞因子均高于健康对照，治疗后存活患者的TNF－α、IL－6明显下降；死亡者各种细胞因子变化不明显。结论：用CD14^ 单核细胞HLA－DR鉴别脓毒症免疫抑制并指导免疫刺激治疗是安全可靠的，且对评估预后有重要价值；TP－55可能对逆转免疫抑制有效，但需要严格的对照治疗研究确认；脓毒症的免疫抑制发生和逆转与促炎／抗炎细胞因子平衡无关，确切机制有待深入探讨。     

烫伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡诱导肠道内毒素和细菌移位

目的 :探讨烫伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡对肠道内毒素和细菌移位的影响。方法 :Wistar大鼠 110只 ,30 %总体表面积 ( STBA) 度烫伤 ,立即或伤后 6 h进行复苏。观察伤后肠上皮细胞凋亡率 ( ap% )变化 ,并测定了门静脉和体循环内毒素及肠系膜淋巴结 ( ML N)细菌移位率和移位量变化。结果 :电泳、原位末端标记( TU NEL )法和电镜均观察到伤后肠上皮凋亡梯形带和凋亡阳性细胞增多。延迟复苏组肠上皮细胞凋亡发生早且更严重 ;其门静脉内毒素水平及 ML N细菌移位量均显著高于立即复苏组 ( P<0 .0 1) ;门静脉内毒素变化与肠黏膜 ap%成显著正相关 (烫伤后立即复苏组 r=0 .936 ,P<0 .0 1;烫伤后延迟复苏组 r=0 .899,P<0 .0 5 )。结论 :烫伤后延迟复苏使肠黏膜上皮发生病理性凋亡 ,可能导致肠道细菌和内毒素移位增加。     

成纤维细胞生长因子-10对3种与修复有关内源性生长因子表达的调控作用

目的：观察成纤维细胞生长因子(FGF-10)对人角朊细胞表达转化生长因子-α(TGF-α)、血小板源性生长因子-AB(PDGF—AB)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法FGF-10工作浓度为4、16、125和500μg／L，不含EGF和含EGF的无血清角朊细胞培养液分别作为阴性和阳性对照。细胞接种密度为2500和375000细胞／cm^2，24、48和72h进行培养上清中的细胞计数，TGF—α、PDGF—AB和VEGF的含量用酶联免疫吸附法(ELISA)测定。结果:①低接种密度、细胞处于未融合生长状态时，各组24h培养上清中TGF—α含量均较低，48h的16μg／L以上组及72h各浓度组培养上清中TGF—α的分泌量均显著高于阴性对照组单个细胞的TGF—α分泌量。高接种密度、细胞处于融合生长状态时，24h的培养上清中未检测到PDGF-AB；48和72h的培养上清中，125和500μg／L的FGF-10组PDGF-AB浓度及每10^6细胞的分泌量显著高于阴性对照组，且PDGF—AB的分泌呈FGF-10剂量依赖性。②低接种密度时，FGF-10各组VEGF浓度及每10^6细胞VEGF分泌量在各时间点均与阴性对照组无明显差异，而阳性对照EGF组VEGF分泌显著高于其它各组。结论FGF-10上调角朊细胞分泌PDGF—AB、TNF—α可能与FGF-10间接作用于成纤维细胞、血管内皮细胞进而促进肉芽组织的形成有关。     

增生性瘢痕形成和成熟过程中TGF-β1、TGF-β3及其受体的基因表达变化

TGF β1 是一种多功能的细胞因子,与皮肤创面愈合后形成增生性瘢痕密切相关,而TGF β3的生物功能相反,使用该生长因子能够抑制瘢痕的发生[1 ] 。TGF β1 和TGF β3都能够与细胞膜上Ⅱ 型受体(transforminggrowthfactor betareceptorⅡ,TBRⅡ)结合后,磷酸化Ⅰ型受体(TBRⅠ)上的丝氨酸 苏氨酸,将胞外信号传递到细胞内,引起细胞核内特异性的基因表达[2 ] 。目前,关于不同发生阶段的增生性瘢痕中TGF β1 ,TGF β3,TBR Ⅰ和TBR Ⅱ基因表达变化特征的研究还少有报道,对这一规律的揭示,有利于深入了解调控增生性瘢痕发生和成熟的分子机…     

增生瘢痕中转化生长因子基因的表达

目的　探讨转化生长因子 (TGF) β1和转录因子Smad 2 ,Smad 3三种基因影响增生性瘢痕形成和皮肤伤口无瘢痕愈合的调节机制。方法　 3 2份被检测标本中包括增生性瘢痕 8份 ,其自体正常皮肤组织 8份 ,胎儿和成人皮肤组织各 8份。用逆转录 多聚酶链反应方法 (RT PCR)检测上述基因在不同的组织细胞内的表达变化规律。结果　TGF β1、Smad 2和Smad 3基因在增生性瘢痕、胎儿和成人皮肤组织细胞内都有表达。在所检测 8对增生性瘢痕和其对应正常皮肤细胞中 ,这 3种不同基因在增生性瘢痕细胞中的表达量高于正常皮肤细胞的组数分别为 :TGF β1基因有 5对 ,Smad 2基因有8对 ,Smad 3基因有 5对。在胎儿皮肤细胞内 ,TGF β1的mRNA含量明显低于成人皮肤细胞 (t =2 2 0 4 ,P <0 0 5 ) ,差异有显著意义 ;Smad 3基因表达也呈相似的变化规律 ,mRNA含量显著低于成人皮肤细胞 (t=4 2 69,P <0 0 1) ,差异有非常显著意义 ;而Smad 2基因的mRNA含量却明显高于成人皮肤细胞 (t=6 685 ,P <0 0 1) ,差异亦有非常显著意义。结论　TGF β1和它的下游信号分子Smad2 ,Smad 3可能与增生性瘢痕形成密切相关。在增生性瘢痕细胞内 ,这 3种基因高表达可诱导胞外基质大量沉积 ,加速成纤维细胞增殖 ,促进组织纤维化。TGF β1和Smad 3基     

严重烫伤大鼠延迟复苏后多器官损伤机制中的氧自由基作用

将66只悉生大鼠分为伤前对照组、早期复苏组、延迟复苏组和治疗组,采用ESR技术结合传统间接检测手段,观察了伤后8、24、48及72 h心、肝、肾及肺组织中的氧自由基(OFR)含量变化,同时还对脏器病理形态、动脉血气和血清肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氧酶(LDH)、ALT(曾用GPT)、AST(曾用GOT)、BUN和肌酐(Cr)含量进行了观察。结果表明,早期复苏组和延迟复苏组各脏器均有OFR含量增加,同时均发生了病理形态学改变和动脉血气、血清学指标的异常,且延迟组的上述改变明显重于早期组,经抗氧化剂治疗后改善。提示延迟复苏是脏器OFR产生的重要促进因素。