LPS对乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化的诱导作用及其对β-catenin表达的影响

目的：探讨脂多糖（LPS）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中上皮间质转化（EMT）标志物及β-连环素（β-catenin）表达的影响,阐明其可能机制。方法：人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为对照组和不同浓度（5、10、20和40 mg·L^-1）LPS组,倒置显微镜观察各组MDA-MB-231细胞的形态表现,免疫荧光实验检测各组MDA-MB-231细胞中β-catenin表达及定位,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测各组MDA-MB-231细胞中EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和β-catenin mRNA及蛋白表达水平。结果：对照组MDA-MB-231细胞形态表现为上皮细胞表型,不同浓度LPS组MDA-MB-231细胞形态表现为间质细胞表型。免疫荧光实验,β-catenin表达定位主要在细胞核。与对照组比较,不同浓度LPS组细胞中Vimentin和β-catenin mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,以20 mg·L^-1LPS组升高最为明显;与对照组比较,不同浓度LPS组细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,以20 mg·L^-1 LPS组降低最为明显。结论：LPS通过下调E-cadherin表达、上调Vimentin表达促进乳腺癌MDA-MB-231细胞发生EMT、侵袭和转移,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。     

王净净教授中西医结合治疗小儿癫痫临床经验

小儿癫痫为临床常见的儿科疾病,王净净教授对其研究多年并提出"毒邪致痫""痰瘀毒互结"等学说,强调分期而治、标本同治、病证结合辨证施治,坚持儿童用药"能中不西"的原则,对于"海马波谱"异常的患儿适当加入补肾类中药,并创立了"愈痫灵方"经验方,形成系统、成熟且独特有效的中西医结合诊疗方法,值得临床推广借鉴。     

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和颞叶皮质多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp表达的影响

目的：探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和皮质中多药耐药相关蛋白 MRP1、P-gp表达的影响。方法（1）造模：大鼠海马区注射红藻氨酸（KA）,经过点燃和再次亚惊厥剂量点燃造模,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：普通线组（PTX组）与药线组（YX组）,先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位。拉莫三嗪组（LTG组）按照人用拉莫三嗪剂量换算灌胃大鼠,每日2次;空白对照组（Normal组）和模型组（Model组）给予灌胃同等体积的蒸馏水,均灌胃30 d。（3）采用VEEG-1518K型数字化视频脑电监测分析系统检测脑波基本节律的波幅与频率变化。（4）标本处理与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp在海马与颞叶皮层不同部位的表达。结果各组治疗前比较差异无统计学意义（P＞0.05）;各组治疗后,YX组、LTG 组分别与Model 组、PTX组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,YX组与LTG组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;与Model组相比,LTG组和YX组干预后能降低致痫鼠EEG 痫波放电持续时间与发放频率以及海马区和颞叶皮质区多药耐药蛋白 MRP1、P-gp 的表达水平（P<0.05或P<0.01）;YX组与PTG组比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论（1）埋药线使KA致痫鼠EEG痫波放电持续时间缩短,发放频率减少。（2）KA点燃难治性癫痫模型大鼠大脑海马区存在多药耐药蛋白MRP1、P-gp的表达较皮质区明显升高。（3）埋药线逆转与降低致痫鼠海马区多药耐药蛋白MRP1、P-gp的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

润肤保湿软膏对血虚风燥证银屑病皮肤屏障功能干预作用及机制的研究

目的：探寻润肤保湿软膏对银屑病血虚风燥型皮肤屏障功能的影响及作用机制。方法60例血虚风燥型银屑病患者随机分为两组,治疗组30例使用润肤保湿软膏治疗,对照组30例使用尿素软膏治疗,4周后依据 PASI 评分法判定疗效;使用Soft5.5皮肤六参数测试仪,对用药前后患者皮损角质层含水量、皮肤中油脂水平及 pH 值进行测定,通过薄层层析、BIO-RAD Ge1Doc 凝胶成像系统、Quantity One 软件分析及 RT-PCR、 Western blot 的方法检测分析治疗前、后皮损神经酰胺（ Cer ）、水通道蛋白（ AQP-3）的含量;比较分析两组间及组内的临床疗效及各项指标变化,探寻润肤保湿软膏对血虚风燥型银屑病皮肤屏障功能的干预作用及机制。结果两组治疗后均有一定临床疗效,治疗组明显优于对照组（P<0.05）;两组治疗后皮脂含量、角质层含水量均高于治疗前（P<0.05）,而 pH 值治疗组明显低于治疗前（P<0.05）,对照组 pH 值无明显改变（P>0.05）;治疗后两组水通道蛋白（AQP-3）、神经酰胺（Cer）的含量高于治疗前（P<0.05）;治疗组治疗后皮脂含量、pH 值、AQP-3、Cer 较对照组治疗后改善显著,差异有统计学意义（ P<0.05）。结论润肤保湿软膏对血虚风燥型银屑病患者皮肤的屏障功能有显著调节及修复作用,有可能是通过神经酰胺和水通道蛋白对皮肤屏障功能进行修复。     

基于“冲任失调、伏邪致病”探讨女性复发性生殖器疱疹的辨治

基于"冲任失调、伏邪致病"理论探讨女性复发性生殖器疱疹的中医病因病机及治疗,因房事不洁而使外在毒邪藏于体内损伤气血阴阳,日久则冲任失调,其发病具有一定的特殊性和规律性,随月经气血阴阳周期性变化。治疗上,经前期以疏肝清热为主,月经期以行气通经为要,经后期治以益气养血为宜,使冲任调和,机体阴阳气血平衡,为冲任失调所致的皮肤性病诊治提供一定的借鉴意义。     

RGD环肽修饰的姜黄素/黄芩苷靶向共递送纳米脂质体的制备工艺优化及表征

目的 优化RGD环肽修饰的姜黄素（curcumin,Cur）/黄芩苷（baicalin,Bai）共递送靶向纳米脂质体（RGD-Cur/Bai-Lip）的制备工艺并进行表征评价。方法 采用乙醇注入法制备RGD-Cur/Bai-Lip,首先通过Plackett-Burman筛选实验确定超声时间、胆脂比、水合温度作为制备RGD-Cur/Bai-Lip的关键因素,然后采用Box-Behnken响应面法进行工艺优化,以姜黄素包封率、黄芩苷包封率、总载药量为考察指标,采用AHP-复相关系数法-拉开档次法进行多指标组合赋权以确定各指标权重系数并计算综合评分,从而确定RGD-Cur/Bai-Lip的最优处方及关键工艺参数。最后对其形态、粒径电位、稳定性、体外释放度及溶血性等进行表征评价。结果 优选得到的最佳工艺为胆脂比1：12,水合温度60℃,探头超声时间为10 min。RGD-Cur/Bai-Lip外观澄清透明,呈亮黄色,对光可视淡蓝色乳光,透射电子显微镜下观察形态圆整、分散均匀。平均粒径为（101.10±0.62）nm,多分散系数（PDI）为0.191 0±0.014 3,Zeta电位为（1.59±0.07）mV,姜黄素包封率为（94.28±4.51）%,黄芩苷包封率为（76.93±1.35）%,总载药量为（2.27±0.09）%。7 d内稳定性良好,无溶血性,并具有一定的缓释作用。结论 优化处方后制备的RGD-Cur/Bai-Lip包封率高,粒径分布均匀,7 d内较稳定,无溶血性,并具有一定的缓释作用,为RGD-Cur/Bai-Lip的后续抗肝纤维化体内外研究提供了制剂基础。     

补阳还五汤对PFNA术后患者髋关节功能恢复的影响

目的:观察补阳还五汤对股骨近端防旋髓内钉(PFNA)术后患者髋关节功能恢复的影响.方法:将股骨粗隆间骨折并准备行PFNA内固定植入术的患者60例随机分为治疗组和对照组,每组各30例.2组均由同一组医师进行PFNA手术,对照组术后均给予镇痛、抗感染、抗凝、补液,配合下肢无负重功能锻炼等西医常规治疗,治疗组术后在对照组的基础上加用补阳还五汤治疗,疗程均为28 d.比较2组骨折临床愈合时间、术后开始下地部分负重时间,采用Harris评分评估2组术后1个月、3个月的髋关节功能.结果:2组骨折临床愈合时间、术后开始部分负重时间组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).术后1个月治疗组Harris评分较对照组高(P＜0.01);术后3个月,2组Harris评分均较术后1个月升高(P＜0.01).结论:补阳还五汤能够较好地改善PFNA术后患者髋关节的活动功能,缩短骨折临床愈合时间和下地负重时间.