不同方法检测造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的研究

[目的]探讨造血干细胞移植后检测巨细胞病毒(CMV)感染的有效方法。[方法]分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法、荧光定量PCR(FQ-PCR)、间接免疫荧光法(IFA)检测11名干细胞移植受者,96份标本的血清IgM抗体、血浆DNA负荷量和外周血白细胞PP65抗原。[结果]ELISA、FQ-PCR和IFA的阳性检出率分别为15.63%、34.38%、36.46%。ELISA的阳性检出率明显低于FQ-PCR和IFA法。IFA与FQ-PCR两种检测方法对CMV感染的测定结果具有良好的一致性(kappa值为0.818)。[结论]IFA和FQ-PCR是检测造血干细胞移植受者CMV早期感染较为敏感的指标,具有良好的临床应用价值。     

3TMRI动态增强对钼靶检出乳腺可疑微钙化的诊断价值研究

目的：探讨3T核磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）动态增强对钼靶检出乳腺可疑微钙化的诊断价值。方法：30例钼靶发现可疑微钙化病例完成MRI动态增强检查后行活检或切除术,以术后病理诊断为标准,分析可疑微钙化病变MRI动态增强的强化特点。结果：可疑微钙化病灶总数30个,其中良性11个,恶性19个。良性病变早期强化率均值约为（69．4±22．2）％,恶性病变早期强化率均值约为（115．2±37．4）％,二者之间差异具有统计学意义。良性病变MRI强化曲线多表现为上升型（72．2％）,恶性病变MRI强化曲线多表现为流出型（73．7％）,二者之间差异具有统计学意义。MRI动态增强对可疑微钙化灶的特异度为91．7％,远高于钼靶对可疑微钙化灶的特异度45．5％。结论：3TMRI动态增强结合钼靶检查,将乳腺可疑微钙化病变的形态学与血流动力学综合起来,对乳腺良恶性病变的定性诊断提供有效帮助。     

肺炎克雷伯菌肺炎对大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨肺炎克雷伯菌肺炎对大鼠胸腺细胞凋亡的影响及可能的作用机制.方法 48只Sprague-Dawley大鼠随机(随机数字法)分为对照组和感染组,每组24只.采用气管穿刺注入感染法制作大鼠肺炎克雷伯菌肺炎模型.分别于接种后的第2,4,6天分批处死动物,分别采用TUNEL法检测大鼠胸腺细胞凋亡及免疫组化法检测凋亡相关基因Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Fas的表达.结果 与同时间点对照组相比,感染组胸腺细胞凋亡增加,凋亡指数和胸腺细胞Cleaved Caspase-3和Fas表达水平升高,Bcl-2表达水平下降.感染组随着接种时间的延长凋亡指数和胸腺细胞Cleaved Caspase-3表达水平持续增加,胸腺细胞Fas表达水平在第4天达到高峰,胸腺细胞Bcl-2表达水平持续下降,而对照组上述各指标无明显动态变化.结论 肺炎克雷伯菌肺炎可诱导胸腺细胞凋亡增加,其机制可能与Bcl-2表达减少和Fas表达增多有关.不同凋亡调控途径在肺炎不同时期对凋亡的影响亦有所不同,Fas的作用在肺炎第4天后开始减弱而Bel-2的作用继续增强.

Abstract：

Objective To study the effects of pneumonia caused by Klebsiella pneumoniae on apoptosis of thymocytes in rats and its possible mechanism. Methods A total of 48 Sprague Dawley rats were randomly (random number) divided into 2 groups, namely the control group (n =24) and the infection group ( n = 24). The pneumonia models of rats were made with 0.3 mL Klebsiella pneumoniae suspension administered intratracheally per animal. On the 2nd, 4th, and 6th day after intratracheal instillation of bacteria, 1/ 3 of the rats in each group were sacrificed and TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUN EL) method was used to assess the apoptosis of thymocytes. The expressions of cleaved Caspase-3, Bcl-2 and Fas in thympcytes of rats were detected with immunohistochemical staining. Results On each interval, apoptosis index of thymocytes, and the expressions of Cleaved Caspase-3 and Fas in the infection group were all higher than those in the control group (P < 0.01) , while the expressions of Bcl-2 lower than those in the control group (P<0.01). As more time consumed, the apoptotic index of thymocytes and the expressions of cleaved Caspase-3 in the infection group increased significantly (P<0.05). The expressions of Bcl-2 declined gradually (P < 0.05), but the expressions of Fas reached their peak 4th day after infection. There were no significant dynamic changes in all above mentioned variables in control group. Conclusions Pneumonia caused by Klebsiella Pneumoniae can lead to the increase in thymocyte apoptosis in rats. The mechanism may be associated with the decreased expression of Bcl-2 and the increased expression of Fas in thymocytes of rats with pneumonia caused by Klebsiella pneumoniae. The different apoptosis regulation pathways have different effects on different phase of pneumonia, that the effects of Fas decrease 4th day after pneumonia, while the effects of Bcl-2 increase further.     

“筋骨并重”理论指导下微创直接前方入路全髋关节置换术

[目的]探讨基于“筋骨并重”理论的微创直接前方入路(direct anterior approach,DAA)全髋关节置换术的临床疗效。[方法]回顾性分析2013年1月至2016年10月108例于浙江中医药大学附属第一医院行全髋关节置换术的患者资料,根据手术入路方式的不同分为2组,其中DAA组46例,在“筋骨并重”理论指导下,采用微创DAA全髋关节置换术;传统后侧入路组62例,采用传统后侧入路全髋关节置换术。比较两组患者的切口长度、手术时间、术中出血量、术后引流量、术中术后假体角度、术后首次下地时间、术后住院时间,术后各阶段髋关节Harris评分、并发症等。[结果]所有患者术后均获得随访,随访时间24～27个月,平均(25.5±3.2)个月。DAA组患者的切口长度、术中出血量、术后引流量均少于传统后侧入路组,患者术后首次下地时间早于传统后测入路组,术后住院时间短于传统后测入路组,差异均有统计学意义(P＜0.01),两组手术时间无统计学差异(P=0.081)。DAA组术中、术后髋臼前倾角、外展角对比无统计学差异(P=0.443,P=0.457);传统后侧入路术中、术后髋臼前倾角、外展角对比差异有统计学意义(P＜0.05)。DAA组患者术后1周、1个月、3个月Harris评分优于传统后侧入路组,差异均具有统计学意义(P＜0.01),两组患者术后6个月、1年、2年Harris评分对比差异无统计学意义(P＞0.05)。[结论]基于中医“筋骨并重”理论指导,微创DAA全髋关节置换术相较于传统后侧入路术式,能够避免对关节周围“筋”的损伤,具有减少软组织损伤和加快术后康复的优势,但远期康复疗效相同。     

玄参多糖对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及肝胰岛素信号通路的影响

目的探究玄参多糖对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及肝胰岛素信号通路的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)注射法制备糖尿病大鼠模型,随机分成5组,分别为模型组、阳性药二甲双胍(200 mg/kg)组及玄参多糖低、中、高剂量(80、160、320 mg/kg)组,另设同周龄普通饲料喂养大鼠为对照组;ig给药6周后监测各组大鼠体质量及生存状态、空腹血糖(FBG)、血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)]、肾功能[肌酐(CREA)、血尿素氮(BUN)]、糖化血红蛋白(GHb)、空腹血清胰岛素(FINS)、C-肽、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标的变化;HE染色和油红O染色评估大鼠肝脏病理学变化及脂肪变性;Western blotting法检测肝胰岛素信号通路相关蛋白表达。结果玄参多糖能回升2型糖尿病大鼠体质量,改善代谢功能,降低大鼠FBG、GHb、ALT、AST、CREA、BUN、TC、TG、LDL-C、MDA水平,升高HDL-C、FINS、C-肽、SOD、CAT、GSH-Px水平;Western blotting结果表明玄参多糖能活化IRS-2/PI3K/Akt信号通路,升高过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)表达水平。结论玄参多糖能够改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢,其机制可能跟调控肝胰岛素信号通路有关。     

伸直位骨性强直膝的全膝关节置换术

 目的 探讨伸直位骨性强直膝全膝关节置换术的手术方法与临床疗效。方法 2000 年6月至2007 年6 月, 对10 例伸直位骨性强直膝患者施行全膝关节置换术。男4 例, 女6 例;年龄29~63岁, 平均49 岁。双膝关节置换2 例, 单膝关节置换8 例。强直性脊柱炎3 例, 类风湿关节炎2 例, 血友病性关节炎1 例, 创伤性关节炎3 例, 化脓性关节炎1 例。膝关节均处于伸直位骨性强直畸形, 活动度0°, 美国特种外科医院(the Hospital for Special Surgery, HSS)膝关节评分(32.5±10.26)分。结果 全部病例随访3~10 年, 平均5.3 年。末次随访时HSS 膝关节评分提高至(87.75±6.45)分, 与术前比较差异有统计学意义(t=18.668, P=0.000)。关节活动度提高至97.08°±11.57°, 与术前比较差异有统计学意义(t=29.063, P=0.000)。术后发生皮肤坏死2 例、下肢深静脉栓塞1 例、假体周围骨折1 例、假体深部感染翻修1 例。术后X线复查未见假体松动。结论 采用髌旁内侧入路、股四头肌切开、二次截骨加软组织松解的全膝关节置换术可矫正伸直位骨性强直膝关节畸形, 配合正确的康复锻炼, 患者的膝关节功能和生活质量能得到明显提高。     

改良Kessler缝合法联合带线锚钉治疗新鲜闭合性跟腱断裂

跟腱损伤是骨伤科较常见的创伤。治疗以手术为主,其手术并发症有切口延期愈合、感染、皮肤坏死和跟腱再断裂等。自2007年6月至2008年6月,笔者对9例跟腱断裂患者采用改良Kessler缝合法联合带线锚钉进行治疗,疗效满意,现报告如下。     

经皮多根克氏针固定治疗桡骨远端骨折合并下尺桡关节脱位

下尺桡关节急性脱位和半脱位在腕部损伤中比较常见。它可单独发生,亦可并发于桡尺骨骨折及肘关节脱位等。桡骨远端骨折在临床上是一种常见损伤,特别是在年龄较大,有骨质疏松者更容易引起此种损伤。合并下尺桡关节损伤者经非手术治疗后部分病人遗留有活动时腕痛,前臂旋前-旋后受限,腕关节屈伸受限,下尺桡关节不稳定,甚至腕部畸形等,即下尺桡关节紊乱,给病人的生活及工作造成较严重的影响。     

塑型钛钢板内固定加植骨治疗跟骨关节内骨折

跟骨骨折是最常见的跗骨骨折,而累及关节的骨折约占75%.其处理相当棘手,治疗不当常遗留跟痛、创伤性关节炎、扁平足等后遗症,严重影响患肢功能,病废率高.     

右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死的研究

目的 观察右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死(avascular necrosis ofthe femoralhead,ANFH)的疗效及促进再血管化、再骨化的作用. 方法 取健康雄性成年毕格犬24只,体重(10.0±0.5)kg,随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(Mscs介入组)、D组(MSCs介入加右归饮组),每组6只.通过液氮冷冻法建立早期ANFH模型.分离、培养并以BrdU标记MSCs.造模3周后,C、D组动脉灌注标记后的浓度为(0.5～1.0)×106个/mL的MSCs l mL,B、D组每天予右归饮100 mL灌胃,A、C组以100 mL蒸馏水灌胃.连续治疗4周及8周后行股骨头大体观察,DSA和MRI观察股骨头供血血管的数量及直径的变化情况,行组织学及免疫组织化学染色观察VEGF、BrdU阳性表达情况,实时荧光定量RToPCR检测VEGF mRNA表达. 结果 治疗后4、8周,A组股骨头外形扁平,呈蘑菇状;B、C、D组股骨头外形基本正常.DSA观察示C、D组治疗后供血血管分支增粗、增多,原阻塞血管再通.治疗后4、8周,C、D组间血管数和血管直径比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组血管直径与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),D组血管数与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05).MRI检查示B、C、D组较A组明显改善,D组尤为明显,TIW略低信号,T2W略低信号,STIR略高信号.组织病理学及免疫组织化学染色示:B、C、D组较A组结构有明显改善,D组较其他各组的VEGF阳性表达率均明显增高(P<0.05),D组较C组的BrdU阳性率、阳性成骨细胞数、阳性血管数表达均明显增高(P<0.05).实时荧光定量RT-PCR检测示:D组较其他各组VEGF mRNA表达量增多(P<0.05),B、C、D组的VEGF表达均高于A组(P<0.05). 结论 右归饮联合MSCs介入治疗早期ANFH疗效显著,可改善坏死股骨头的血供、促进修复、预防塌陷.