冰片及其类似物对谷氨酸诱导神经元细胞损伤的保护作用

目的:探讨冰片及其类似物对谷氨酸诱导神经元细胞损伤的保护作用?方法:用谷氨酸刺激胎鼠原代神经元细胞,造成细胞损伤,导致乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放到细胞外,通过测定药物抑制LDH的漏出率评价药物对神经元细胞的保护作用?结果:冰片(1)?冰片基甲酸(3)?2-冰片基乙醇(4)?2-冰片基乙酸(5)?2-羧甲基异冰片(6)?2,6-二异丙基苯甲酸(8)?2-(2’,6’-二异丙基)苯乙醇(9)?2-(2’,6’-二异丙基苯基)乙酸(10)都显示对神经元细胞的保护作用,冰片胺(2)?薄荷酸(7)则表现为神经损伤作用?结论:冰片及多数类似物对谷氨酸诱导的神经元损伤具有保护作用,其中,2,6-二异丙基苯甲酸(8)在1 × 10-5~1 × 10-7 mol/L浓度范围内都显示较好的神经保护作用,值得深入研究?     

自噬小体的超微结构分析

目的 :分析研究自噬小体的超微结构。方法 :应用透射电镜技术整理分析本中心收到的用于自噬研究的细胞标本,发现自噬小体的特征结构,并对细胞内易与自噬小体混淆的其他细胞结构进行分析。结果:自噬小体具有双层或多层膜的特征,并且其内包含细胞器和胞浆成分,可以与细胞内其他易于混淆的细胞结构相区分。结论:双层或多层膜的球状结构,内含胞浆成分,如线粒体、内质网、核糖体等,是自噬小体的结构特征。     

江苏省农村地区孕产妇梅毒感染者特征的调查分析

目的：调查了解江苏农村地区梅毒感染孕产妇情况,分析其特征,为阻断梅毒母婴传播提供改进依据。方法：依据江苏省预防梅毒母婴传播项目的梅毒感染孕产妇登记卡设计问卷,调查2013—2017年江苏全省农村地区妇幼保健机构所有登记在案的妊娠梅毒患者,进行现况分析。结果：梅毒感染孕产妇平均年龄为27.86岁,以汉族为主（占97%）,职业以家务及待业为主（占54.1%）,初婚者为主（占83%）。以隐性梅毒为主（占64.1%）,分期不详者占28.1%,孕期确诊的占77.3%,不清楚自己是如何被感染的比例高达67.8%。结论：农村地区预防梅毒母婴传播项目工作的诊断能力有待加强、健康教育存在薄弱环节。     

粪菌移植在艰难梭菌感染治疗中的应用

粪菌移植（Fecal microbiota transplantation, FMT)已被美国医学指南、欧洲专家共识推荐用于成人复发性艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection, CDI）。本文主要就FMT治疗CDI的适应证、临床流程、安全性、伦理与监管等的研究进展及中国医生的治疗选择进行综述。     

基于岗位胜任力的中医住院医师规范化培训师承教育模式探索

目的 对中医住院医师规范化培训中使用的师承教育模式进行不断完善和创新,旨在持续提升住院中医师的岗位胜任力。方法 采用半结构化访谈方法,紧密围绕师承教育中的收获所得、问题缺陷、改进建议三个层次对江苏省中西医结合医院住院中医师进行随机抽样访谈。结果 综合访谈资料并结合笔者临床管理经验,提出提高中医师岗位胜任力应当形式多样,创新师承方式;改革方法,优化评估模式;继承创新,注重多元发展。传统的中医住院医师规范化培训师承教育制度在实施中普遍存在跟师时间短,带教流于形式等问题。为缓解愈发严峻的医疗环境,完善和创新师承教育模式刻不容缓。国外临床医师在培训初级便以岗位胜任力基础目标,并在培训中取得了意想不到的好效果。结论 借鉴国外先进经验,将以岗位胜任力为基础的师承教育模式引入中医规范化培训十分必要。     

医学生夜宵情况调查

目的 了解医学生的夜宵行为情况,为培养健康饮食行为提供科学依据。方法 对南京市某高校971名医学生进行夜宵情况的问卷调查。结果 调查的学生中吃夜宵的占73%,男女生之间差异无统计学意义,夜宵摄入频率随着年级的增高有所降低;吃夜宵主要原因为饥饿;夜宵食用前3位食物类别为水果、奶制品和米面谷薯类;86%的学生认为夜宵会增加体质量。结论 南京市某高校医学生夜宵情况较为普遍,食物选择比较健康,仍应注意摄入量和食物加工烹调方式。     

穹窿主体蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨穹窿主体蛋白(major vault protein,MVP)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响?方法:分离培养野生型小鼠VSMCs,用血小板源性生长因子(PDGF-BB)或15% 胎牛血清(FBS)刺激VSMCs增殖,Western blot检测VSMCs的MVP表达水平,同时检测特异性分化标记物α-SMA和SM22α表达水平?然后用PDGF-BB刺激人主动脉平滑肌细胞(HAoSMCs),检测MVP的表达差异?再分别分离培养野生型小鼠和MVP敲除型小鼠的VSMCs,通过CCK8细胞增殖实验检测两者的增殖能力;同时用siRNA干扰的方法,使HAoSMCs中MVP低表达,检测其增殖能力的变化?结果:用PDGF-BB或15% FBS刺激VSMCs后,MVP表达水平呈浓度和时间依赖性下降,α-SMA和SM22α表达水平也相应降低?MVP缺失或低表达情况下,VSMCs的增殖能力均下降?结论:MVP在VSMCs增殖中起了重要作用?     

CRISPR/Cas9介导的猪Six1和Six4基因敲除细胞系的建立

目的：利用干细胞囊胚互补技术再生同种或异种动物器官已得到验证,其重要的前提是需要构建出相应的器官缺失动物模型。本文拟通过CRISPR/Cas9基因编辑技术建立猪Six1单基因和Six1/Six4双基因敲除猪细胞系,为构建肾脏发育缺陷和缺失猪模型奠定重要的研究基础。方法：选取猪Six1基因和Six4基因第一外显子为敲除靶点,分别设计并合成单导向RNA（single guide RNA,sgRNA）,将其插入含有Cas9骨架的PX330质粒,分别构建Six1基因和Six4基因敲除打靶载体PX330?sgRNA1和PX330?sgRNA4;用T7EN1酶验证打靶载体敲除效率后,将高效打靶载体与含G418抗性的质粒（pCMV?tdTomato）共转染原代猪胎儿成纤维细胞（porcine fetal fibroblasts,PFFs）中,并通过药物筛选获得单克隆细胞群落,随后对单克隆细胞进行基因型鉴定。结果：分别成功构建Six1和Six4基因的Cas9/sgRNA表达载体。转染Six1基因打靶载体经药物筛选后,利用PCR方法鉴定所获得的Six1基因敲除单克隆细胞系48个,其中Six1-/-细胞系21个。通过同样方法同时转染Six1基因和Six4基因打靶载体,经药物筛选后共获得44个单克隆细胞系,其中Six1-/- Six4-/-细胞系为13个。结论：通过CRISPR/Cas9基因编辑技术可高效获得Six1单基因敲除细胞系和Six1/Six4双基因敲除细胞系,为构建肾脏发育缺陷猪动物模型提供了基础,并有助于研究Six1和Six4基因在猪肾脏发育中的功能。     

侵袭性分化型甲状腺癌外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值的临床意义

目的　检测侵袭性分化型甲状腺癌患者术前中性粒细胞与淋巴细胞比值（neutrophil-lymphocyte ratio，NLR），探讨用NLR指标评估局部晚期甲状腺癌的临床意 义。方法　采用1：1配对病例对照研究设计法，共收集侵袭性分化型甲状腺癌（侵袭组）和微小乳头状癌（非侵袭组）各40例患者，记录并计算术前NLR及C反应蛋白数值，比较侵袭组和非侵袭组之间的NLR和C反应蛋白的差异，以ROC曲线评价各指标对侵袭性分化型甲状腺癌的临床意义。结果　侵袭组NLR为2.61±1.15，显著高于非侵袭组1.76±0.84，两组之间比较差异有统计学意义（F =5.016，P =0.034），而两组之间C反应蛋白差异无统计学意义（F =2.136，P =0.158）。NLR对侵袭性分化型甲状腺癌患者诊断的曲线下面积为0.766，NLR诊断侵袭性分化型甲状腺癌的最佳临界值为1.95，敏感度为77.3%，特异度为69.1%。结论　NLR可以作为评价甲状腺癌患者局部侵袭的指标之一，NLR值越高，局部侵袭风险越大。