江苏省某戒毒所丙型肝炎病毒感染情况及影响因素分析

目的：了解江苏省某地区强制戒毒人员丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）的感染情况并探讨其危险因素,为该人群的行为干预和疾病病因探索提供参考依据。方法：采用现况研究的方法,于2018年7月对江苏省某地区强制戒毒所内790例接受强制戒毒的人员进行问卷调查,收集该人群的一般人口学和行为学资料,并采集静脉血对HCV抗体等相关指标进行检测。结果：790例强制戒毒人员中HCV抗体阳性率为20.0%（158/790）,其中HCV RNA的阳性率为58.2%（92/158）,注射吸毒者的HCV抗体阳性率为72.9%（114/136）。HCV慢性感染者中以HCV 3b亚型（41%）和HCV 6a亚型（22%）多见。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄较大（OR=1.81,95%CI：1.21~2.70）和具有注射吸毒行为（OR=60.28,95%CI：29.65~122.58）是该人群感染HCV的主要危险因素。结论：该吸毒人群的HCV感染情况依然较为严峻,尤其是既往有注射吸毒行为的吸毒人群,应重点监测;该吸毒人员HCV感染率高,与注射吸毒和年龄增长有关。     

常染色体显性遗传性听神经病家系全外显子组测序分析

目的：在多年围绕1个常染色体显性遗传性非综合征型听神经病家系开展系统分子遗传学研究的基础上,进一步探讨该家系耳聋的致病机制,以期发现新的听神经病致病基因和突变位点。方法：对3例耳聋患者和1例配偶进行全外显子组测序,初步筛选出与家系耳聋相关的候选致病基因。采用PCR-Sanger测序法,检测上述候选基因变异是否与家系表型共分离。最后,以50例与研究家系无关的听力正常人为对照,检测候选致病突变在正常群体中的突变频率和SNPs遗传多态性。结果：全外显子测序分析得到41个候选致病基因突变;用PCR-Sanger测序法对核心家系的9名成员和2名家系外听力正常人进行验证,仅发现1个基因突变（ALOX15B 7942797 C>T）与家系耳聋表型共分离。选取50例家系外正常对照的DNA样本对ALOX15B基因进行PCR扩增和序列分析,结果显示有2例听力正常人也检测到该基因的同一变异,提示该变异为SNPs遗传多态性。结论：对核心家系成员的全外显子组测序分析和Sanger测序法验证未发现有意义的突变位点,排除了该家系耳聋由基因编码区突变及Indels致病的可能性。     

COL6A2基因3′-UTR区域功能单核苷酸多态性位点rs1044598参与miR-4252调节中国汉族人群先天性房间隔缺损

目的:探讨COL6A2基因3′非翻译区(3′-UTR)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点对先天性房间隔缺损(congenital atrial septal defect,ASD)发病风险的影响及其可能的作用机制?方法:搜索PubMed及Hapmap数据库获得COL6A2基因3′-UTR区域中国汉族人群最小等位基因频率>0.05的SNP位点,随后通过miRNA-SNP功能网站预测SNP位点的功能情况并与本课题组前期ASD全基因组关联研究数据库比对,研究SNP位点与ASD的发病关联,最后对可能的功能位点进行功能学研究?结果:rs1044598位点AA基因型较野生TT基因型显著减少了36%的患病风险?HEK293T细胞?H9C2细胞以及SD乳鼠原代心肌细胞荧光素酶报告基因转染实验证实,miR-4252与COL6A2基因rs1044598不同基因型表达质粒共转染后,荧光强度在3个细胞系中均有显著差异 (P < 0.05)?结论:COL6A2基因rs1044598位点的变异可能与ASD的发病风险相关?miR-4252可通过与COL6A2的3′-UTR区域发生有效结合而下调基因的表达,而rs1044598位点的变异参与这一机制并减少ASD的发生?     

江苏省两县柯萨奇病毒A组16型流行病学特征分析

目的:探讨柯萨奇病毒A组16型(CVA16)的流行病学特征,以期为手足口病的综合防治和CVA16疫苗研制提供流行病学依据?方法:基于在江苏建立的肠道病毒所致疾病监测系统,通过主动与被动报告相结合的方式对东海县2 875人?宝应县2 080人进行监测;使用统一调查表格对病例进行个案调查,并采集咽?肛拭子进行实时荧光定量PCR法快速检测?结果:截至2013年2月,东海?宝应两县CVA16感染所致发病率分别为16.73%(481/2 875)和9.28%(193/2 080), 整个监测期间均只出现1个发病高峰,均在2012年5月中下旬;两县病例均覆盖所有乡镇,但不同乡镇间发病率存在地区差异;两县所发现病例年龄范围为9~42月龄,男?女性别比分别为1.59∶1和1.47∶1,不同性别发病率无统计学差异?结论:2012年3月~2013年2月江苏省东海和宝应两县肠道病毒流行以CVA16为主,病毒流行具有明显的季节性以及地区差异性?     

转基因Tomoregulin⁃1低表达加速扩张型心肌病小鼠的病理进程

目的：探究Tomoregulin?1对扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy,DCM）小鼠病理进程的影响。方法：Western blot方法检测Tomoregulin?1在cTnTR141W DCM小鼠模型心脏组织中的表达水平;于2、4和6月龄对同窝阴性（non?transgenic littermates,NTG）小鼠、心脏组织特异Tomoregulin?1低表达小鼠、cTnTR141W DCM小鼠和心脏组织特异Tomoregulin?1低表达×cTnTR141W双转基因（double transgenic,DTG）小鼠进行M型超声心动图和病理组织学表型分析。结果：Tomoregulin?1在cTnTR141W DCM小鼠模型心脏组织中表达显著增高;M型超声心动图显示,与NTG小鼠相比,心脏组织特异Tomoregulin?1低表达小鼠在2、4和6月龄时心脏均呈现显著的室壁变薄、心腔增大和心收缩功能减退的表型;与cTnTR141W DCM模型小鼠相比,DTG小鼠在2、4和6月龄时心脏均呈现显著的室壁变薄的表型,亦呈现心腔增大和心收缩功能减退的趋势;病理组织学显示,与NTG小鼠相比,心脏组织特异Tomoregulin?1低表达小鼠心肌细胞排列紊乱并出现间质纤维化的表型;与cTnTR141W DCM模型小鼠相比,DTG小鼠的心肌细胞排列紊乱和间质纤维化程度更加严重。结论：转基因低表达Tomoregulin?1加速了cTnTR141W DCM小鼠的病理进程,Tomoregulin?1可能是DCM调节的重要修饰基因。     

HRD1在oxLDL刺激的人脐静脉血管内皮细胞中的表达及意义

目的:观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(HMG-CoA reductase degradation protein 1,HRD1)在人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内的表达情况,探讨HRD1对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)引起的血管内皮细胞凋亡及细胞内脂质沉积的影响?方法:免疫荧光检测HRD1在动脉粥样硬化患者血管组织中的表达?同时体外传代培养HUVEC,oxLDL刺激细胞后Western blot法观察HRD1的表达情况?Ad-HRD1感染oxLDL刺激后的HUVEC,Western blot法观察HRD1对细胞凋亡的影响,油红O染色法观察HRD1对细胞内脂滴生成的影响?结果:HRD1表达于动脉粥样硬化患者血管组织中;也表达于oxLDL刺激后的HUVEC中;Ad-HRD1感染oxLDL刺激后的HUVEC,Cleaved PARP和Cleaved Caspase 3表达降低并且细胞内脂滴形成减少?结论:HRD1可抑制oxLDL导致的内皮细胞凋亡和细胞内脂质沉积?     

PFOS对BV-2细胞的炎性损伤及机制研究

目的：探讨环境内分泌干扰物全氟辛磺酸(perfluorooctane suifonate,PFOS)对小鼠小胶质瘤细胞BV-2的损伤作用及其炎性反应。方法：利用体外培养的小胶质细胞,给予不同浓度和作用时间的PFOS进行染毒,通过MTT法检测BV-2细胞活力;实时定量PCR的方法观察诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthesis,iNOS）、白介素（interleukin,IL）-6 和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α mRNA的表达。ELISA法检测炎性因子IL-6,免疫蛋白印迹法检测核转录因子kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)等信号蛋白表达情况。结果：不同浓度PFOS对BV-2细胞染毒12、24 h后,细胞活力下降,引起明显的细胞损伤。ELISA结果显示, PFOS作用BV-2 24 h后,细胞炎性因子IL-6分泌增加。此外,PFOS还可引起iNOS、IL-6基因表达上调,而TNF-α表达有下降趋势。PFOS与细胞孵育后,炎性通路NF-κB明显激活,表现为磷酸化程度升高。且随染毒浓度的增加,p-NF-κB的表达有上升趋势;此外,随染毒时间的增加,p-NF-κB的表达亦有上升趋势。结论：PFOS可引起BV-2细胞活力降低,激活NF-κB通路,促进炎性因子的释放,该途径可为阐明PFOS引起的神经系统损伤的分子机制提供理论依据。     

胰岛β细胞中PP2ACα基因失活小鼠模型的建立及初步表型分析

目的 :建立胰岛β细胞特异性失活PPACα基因小鼠模型,对其表型进行初步观察。方法 :通过Ins2-Cre小鼠与PP2ACα^flox/flox小鼠交配,获得胰岛β细胞特异性失活PP2ACα基因小鼠(PP2ACα^flox/fIox:Ins2-Cre)。PCR和Western blot鉴定PP2ACα基因第二外显子敲除小鼠（KO）。4月龄时行腹腔注射葡萄糖耐量试验（IPGTT）,以PP2ACα^flox/flox小鼠为对照。结果 :1PP2ACα转录本在KO小鼠短于对照小鼠;2KO小鼠胰岛中PP2AC蛋白水平较对照小鼠显著下降（P<0.05）;3IPGTT结果显示:4月龄KO小鼠30、60、120 min时血糖明显高于对照小鼠（P<0.05）。结论:成功建立胰岛β细胞特异性失活PPACα基因小鼠模型,4月龄PP2ACα^flox/fIox:Ins2-Cre小鼠糖耐量受损。     

多学科干预对冠心病患者心理状态的影响研究

目的：探讨多学科团队合作健康教育对门诊冠心病（coronary heart disease,CHD）患者焦虑抑郁等心理状态的干预效果。方法：随机选择南京市某医院126例门诊冠心病患者,实施1年多学科合作健康教育。采用9条目患者健康问卷（PHQ-9）、广泛性焦虑自评量表（GAD-7）和躯体症状群量表（PHQ-15）进行干预前后患者心理状况的评定。结果：干预前患者焦虑、抑郁及躯体症状困扰的检出率均较高。经多学科合作教育后,重度和轻度患者心理障碍症状的检出率均明显降低（P<0.05）。干预后患者的冠心病知晓率（50.1%）、治疗率（38.9%）、血压达标率（9.1%）和血脂达标率（4.2%）均较基线水平有所提高。体重指数（BMI）、臀围、腰围和收缩压也都有明显改善（P＜0.05）。结论：多学科合作健康教育能在一定程度上改善CHD患者的多种危险因素,对缓解冠心病患者的焦虑抑郁、减少躯体症状困扰有积极作用。     

ETS1/2对非洲爪蛙胰腺发育的影响

目的：探讨ETS1/2对非洲爪蛙胚胎胰腺发育的影响。方法：设计并合成特异性抑制ETS1/2表达的反义吗啉代寡核苷酸(morpholino oligonueleitide,MO),通过显微注射的方法将MO转入爪蛙胚胎,利用整胚原位杂交和定量RT-PCR检测标志性基因的表达变化。结果：单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,共同敲降ETS1/2后会使爪蛙胚胎发育异常,胰腺标志基因表达上升,肠道标志基因表达下降,肝脏和胃标志基因无明显变化;胰腺标志基因ngn3、igf1、foxa1的启动子区存在ETS1/2的结合位点。结论：单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,敲降ETS1/2促进爪蛙胚胎胰腺发育,抑制肠道发育,对肝脏和胃的发育无明显影响。