黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的基因表达谱

目的：从基因水平了解黄芪在诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用途径。 方法：实验于2002-09／2005-06在广州医学院病理生理学教研室和解剖教研室完成。①间充质干细胞的定向诱导分化：实验组加入预诱导液（20mL／L天麻注射液含体积分数为0．1的胎牛血清的L-DMEM），对照组只换液不加天麻。24h后吸去预诱导液，实验组加入诱导液（100mL／L黄芪注射液不含胎牛血清的I广DMEM），诱导细胞分化1h，对照组换液为不含胎牛血清的L-DMEM。②细胞总RNA的提取。③间充质干细胞诱导分化过程中差异表达基因的筛选。 结果：①骨髓间充质干细胞及其诱导分化细胞：培养5～10代的细胞在黄芪诱导液中诱导1h后分化为神经元样细胞，免疫组织化学染色显、示巢蛋白阳性，神经元特异性烯醇酶阳性，胶质纤维酸性蛋白阴性。②两组细胞的总RNA：紫外分光光度检查其吸光度（A值），A60/A280为1．8～2．0；甲醛变性凝胶电泳显示28S，18S，5S3条带。③在9052个基因中，与对照组相比，实验组检测到有379个基因表达下调，其中下调倍数大于2倍的有19个；表达上调的基因共有151个，其中有7个基因的上调倍数大于2，包括bHLH，epiregulin，fibroblaatgrowthfactor9等基因。 结论：黄芪可有效地诱导骨髓间充质干细胞分化神经元，其作用过程涉及多种基因。     

三七总皂苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其线粒体机制

目的:观察三七总皂苷(血栓通注射液的药物成分)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,分析其可能的线粒体机制。方法:实验于2006-01/09在广州医学院病理生理学实验室完成。实验分组:取108只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、三七总皂苷组,每组36只。实验干预:①假手术组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾暴露40min后取下。②缺血再灌注模型组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾动脉夹闭缺血45min后再灌注1h。③三七总皂苷组:实验前1h腹腔注射血栓通注射液70mg/kg,其余方法同缺血再灌注模型组。实验评估:①再灌注后1h取肾组织匀浆检测肾组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。②测血浆肌酐、尿素氮、血清降钙素基因相关肽含量。③电镜观察肾组织线粒体超微结构的改变。④检测线粒体细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性,Ca2 含量。结果:108只大鼠均进入结果分析。①三七总皂苷组肾组织超氧化物歧化酶活性高于缺血再灌注模型组;丙二醛含量低于缺血再灌注模型组。②三七总皂苷组血浆肌酐、尿素氮含量低于缺血再灌注模型组;降钙素基因相关肽水平高于缺血再灌注模型组。③电镜观察三七总皂苷组线粒体结构有明显的改善,嵴数目减少不多,且排列较整齐,没有线粒体崩解的情况。④三七总皂苷组肾组织线粒体中细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性高于缺血再灌注模型组;Ca2 含量低于缺血再灌注模型组。结论:三七总皂苷对肾缺血再灌注损伤有明显保护作用,其保护作用机制与直接清除自由基,提高琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性、升高血清降钙素基因相关肽水平,降低钙超载,从而减轻线粒体损伤有关。     

辛伐他汀对大鼠局灶性脑缺血的线粒体保护作用

目的：探讨辛伐他汀对局部脑缺血损伤大鼠的保护作用及其线粒体机制。方法：96只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和辛伐他汀处理组，每组32只。建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，观察大鼠神经功能、梗死体积、脑组织线粒体超微结构的改变；检测线粒体细胞色素c氧化酶（COX）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性，Ca^2＋含量，以及血清降钙素基因相关肽（CGRP）含量。结果：与假手术组相比较，缺血再灌注组各项指标均有显著改变；与缺血再灌注组比较，辛伐他汀能明显提高脑缺血大鼠的神经功能评分（P〈0．01），缩小梗死体积（P〈0．01），改善脑组织线粒体结构，并提高脑组织线粒体SDH活性（P〈0．05），提高COX活性（P〈0．01），降低脑组织线粒体Ca^2＋的含量（P〈0．01），提高血清CGRP水平（P〈0．05）。结论：辛伐他汀可能通过其抗氧化效应，提高脑组织线粒体SDH、COX活性及血清CGRP水平，减轻钙超载，缩小梗死体积，改善神经功能，从而对大鼠局灶性脑缺血起保护作用。     

蝎毒和蝎毒多肽对家兔血小板聚集的影响

目的观察蝎毒多肽(PSV)和蝎毒(SV)对家兔血小板聚集的影响。方法麻醉家兔,颈动脉取血制备富含血小板血浆,分别加入PSV和SV,用CHRON0-IDG 540VS双通道血小板聚集仪测定二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集作用。结果PSV对血小板聚集具有明显的抑制作用,且呈明显的量效关系,当PSV的浓度在10．0～15．0mg／ml时,血小板聚集受抑制最为显著;SV对血小板聚集受其剂量及作用时间影响很大,但总的趋势为较低浓度时促进血小板聚集,较高浓度时则抑制血小板聚集。结论PSV对血小板聚集起抑制作用,且呈明显的量效关系;SV对血小板聚集的影响在高浓度和低浓度时产生的效应相反,推测由于SV成分较为复杂,各成分之间互相作用机制还需深入研究。     

蝎毒对放疗后小鼠骨髓造血功能保护作用的实验研究

目的探讨蝎毒对放疗后小鼠骨髓保护的效应及其机制。方法将小鼠分为对照、治疗和预防组,观察比较放疗后外周血WBC数、骨髓有核细胞数、脾重指数等造血功能指标。结果蝎毒多肽、蝎毒对放疗后小鼠外周血WBC均有明显促进作用,低剂量蝎毒多肽对放疗后小鼠外周血WBC及骨髓造血细胞具有明显促进作用;高剂量蝎毒多肽对放疗后小鼠外周血WBC具有明显促进作用。低剂量蝎毒对小鼠骨髓造血细胞具有明显促进作用。低剂量蝎毒多肽对小鼠外周血WBC及骨髓造血细胞促进作用最为明显。蝎毒多肽、蝎毒预防和治疗对放疗后小鼠脾重指数的恢复均有显著的促进作用。结论蝎毒多肽、蝎毒对放疗后小鼠骨髓造血功能具有保护作用。     

天麻对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究中药天麻对肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,腹腔注射天麻,测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO),以及血清尿素氮(BUN)。结果肾缺血40min再灌注6h、24h后肾组织SOD活性降低、MDA升高,血清BUN含量升高。应用天麻后肾组织的SOD活性升高(P<0.05)、MDA下降(P<0.01),血清BUN含量下降(P<0.01)。结论天麻能减轻肾缺血再灌注损伤,机制可能与提高SOD活性、清除自由基、减轻脂质过氧化反应有关。     

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用.方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Western blot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化.结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用.漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡.两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割.结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关.     

蝎毒和蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的作用研究

目的对比观察蝎毒、蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的影响.方法健康昆明种小鼠70只,随机分为5组:①空白对照组;②蝎毒低剂量组;③蝎毒高剂量组;④蛇毒低剂量组;⑤蛇毒高剂量组.小鼠腹腔注射,每天1次,连续给药5d.每组分别在24h、8d、15d取4只小鼠股骨骨髓进行骨髓象检查分析及骨髓有核细胞计数.结果高剂量蛇毒后,骨髓有核细胞数明显增多(p<0.01),蝎毒高剂量组比蛇毒高剂量组增多更显著(p<0.01);两低剂量组有核细胞数明显增多(p<0.05).注射蝎毒和蛇毒后均可使小鼠骨髓有核细胞中单个核细胞比例先增高后下降,而分叶核细胞比例随之升高,但蝎毒的作用更明显.结论蝎毒、蛇毒均具有促进骨髓细胞增殖、分化和成熟的作用,蝎毒的促进作用更明显.     

蝎毒多肽对辐射损伤小鼠骨髓造血干细胞及祖细胞的作用

目的 探讨不同蝎毒多肽(scorpion venom peptide,SVP)组分对辐射后机体造血干细胞及祖细胞恢复的作用.方法 6.0 Gy X射线一次性全身照射,制作辐射损伤小鼠模型.内源性脾结节法观察照射后第10天脾集落形成单位(CFU-S)的变化.用甲基纤维素半固体培养基培养骨髓混合集落生成单位(CFU-Mix),观察体内外给药方法及照射后不同时间对CFU-Mix生成的影响.结果 (1)体内实验:SVPⅣ组分处理后的CFU-S数明显高于照射对照组(P＜0.05);SVPV组分CFU-S数量与照射对照组差异无统计学意义.照射后各SVP组CFU-Mix的数量均高于照射对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)体外实验:与照射对照组相比,体外分别单独加入SVPⅣ、Ⅴ组分以及细胞因子(IL-6和SCF)均能够促进CFU-Mix的增殖;而SVPⅣ、Ⅴ组分分别与细胞因子联合应用对CFU-Mix生成的促进作用更为明显,其中Ⅳ组分效果更强,与照射对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SVP具有保护辐射损伤小鼠造血干细胞及祖细胞,加速其增殖能力恢复的作用.     

原发性高血压患者淋巴细胞亚群和活性标志变化的临床观察

采用流式细胞技术分析了１６例原发性高血压患者外周血淋巴细胞亚群和活性标志的变化。原发性高血压病人外周血淋巴细胞ＣＤ＾＋４ＨＬＡ－ＤＲ＾＋，ＣＤ＾＋１９及ＣＤ＾＋１９ＨＬＡ－ＤＲ＾＋百分率明显高于正常健康对组，外周血ＣＤ＾－３，ＣＤ＾＋１６细胞百分率亦明显增加，而ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋３ＣＤ＾＋８及ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋３ＣＤ＾＋８无明显变化。