神安颗粒“区间指纹图谱”的构建

目的 对神安颗粒“区间指纹图谱”的建立进行初步探讨。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以五味子醇甲为参照物,C₁₈色谱柱,甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.00 ml/min,柱温室温,检测波长250 nm,进样10μl,记录时间60 min,以五味子醇甲的色谱峰(S峰)的保留时间和峰面积参照计算各峰相对保留时间和相对峰面积,并进行了方法学考察;采用中国国家药典委员会的“中药色谱指纹图谱相似性评价系统”进行相似度评价。结果 建立了神安颗粒中脂溶性成分的区间指纹图谱,标注神安颗粒中脂溶性成分8个共有指纹峰。各共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积基本一致,RSD<2%;10批样品的相似度均在0.80以上。结论 通过对神安颗粒中脂溶性成分指纹图谱的建立,为“区间指纹图谱”的建立提供了试验依据。     

靶向结直肠癌的小白菊内酯脂质体纳米颗粒诱导程序性坏死并改善T细胞耗竭

目的 研究小白菊内酯(PTL)诱导结直肠癌细胞程序性坏死,并通过调节T细胞耗竭抑制结直肠癌的发展的机制,并通过构建其靶向脂质体改进其临床应用。方法 通过CCK8实验检测不同结直肠肿瘤细胞经PTL处理后的增殖能力。利用ROS与LDH检测分析PTL诱导MC38细胞死亡的方式并进行蛋白免疫印迹分析。将24只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、低剂量PTL组(5 mg/kg)与高剂量PTL组(15 mg/kg),通过在小鼠腹股沟皮下注射MC38细胞构建皮下瘤模型,给药后检测各组小鼠皮下瘤的重量与CD8⁺T细胞的浸润情况,分析CD8⁺T细胞耗竭表型的变化。构建PTL脂质体并对其进行表征。通过在小鼠回盲部移植肿瘤构建结直肠癌原位移植瘤模型,将32只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、PTL处理组(100μg/mL)、低剂量靶向脂质体TCP-1-PTL-LNPs组(100μg/mL)和高剂量TCP-1-PTL-LNPs组(200μg/mL),尾静脉注射给药,通过免疫组化分析CD8在肿瘤中的表达情况。结果 多种结直肠癌细胞(SW480、DLD1、HCT116...     

黑白中药通过调节MC1R和RTKs的表达对黑色素代谢的影响研究

目的：探讨首乌、女贞子等七味黑色中药和白及、白芷等七味白色中药对豚鼠皮肤组织黑色素合成中黑皮质素1受体（Melanocortin 1 receptor,MC1R）、受体酪氨酸激酶（Receptor tyrosine kinase,RTKs）表达的影响。方法：采用水提法获得中药提取物,用灌胃的方法以14 d为周期等量灌胃豚鼠获得背部皮肤组织,采用免疫组化及免疫荧光法检测实验和对照组MC1R、RTKs蛋白的表达,用ImageJ软件统计分析结果,比较不同中药环境对豚鼠皮肤组织的黑色素合成的影响,分析MC1R、RTKs蛋白与黑素细胞代谢三者的变化关系。结果：对MC1R蛋白有抑制作用的白药有白芷、白茯苓、白蔹、白及、白僵蚕、白术,其中白芷、白僵蚕、白术的作用最为明显,对MC1R有明显抑制作用的黑药有乌梅、黑芝麻、丹参、鸡血藤,其中丹参的抑制作用最为明显。该结果显示上述10味中药对黑色素合成有抑制作用,其中白芷、白僵蚕、白术、丹参的抑制作用最为明显。其中对于RTKs蛋白有抑制作用的白药有白芷、白茯苓、白蔹、白及、白僵蚕,其中白茯苓、白蔹、白及的作用最为明显,具有明显作用的黑药有黑芝麻、丹参,其中丹...     

小儿腹泻外敷散对腹泻大鼠小肠Cajal细胞超微结构及血管活性肠肽受体1表达的影响

目的探讨小儿腹泻外敷散对腹泻大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)和血管活性肠肽受体1(VIP-R1)表达的影响。方法 30只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、药物组,每组10只。采用番泻叶水煎液灌胃(2ml/100g)的方法建立腹泻模型,药物组给予小儿腹泻外敷散贴敷。采用透射电镜观察药物对腹泻大鼠小肠ICC超微结构的影响,免疫组化法观察VIP-R1在腹泻大鼠小肠内的分布,RT-PCR和Western blotting测定VIP-R1 m RNA和蛋白表达水平。结果药物贴敷可使ICC形态和缝隙连接基本恢复正常。VIP-R1主要分布在小肠组织环形肌与纵形肌之间、小肠组织肌间神经丛处、结肠黏膜层上皮细胞及固有层细胞的周围。小儿腹泻外敷散可抑制VIP-R1分泌并下调VIP-R1 m RNA及蛋白表达。结论小儿腹泻外敷散可修复腹泻大鼠损伤的ICC细胞,同时可通过下调VIP-R1表达而治疗腹泻。     

五类栽培白芷与兴安白芷的挥发油成分及其化学亲缘关系

目的 测定5类栽培白芷及野生兴安白芷（根）的挥发油成分及含量并分析各类白芷间的化学亲缘关系。方法 水蒸气蒸馏法提取6类白芷挥发油,采用GC-MS法对其组分分离及鉴定,采用面积归一化法计算各组分相对含量,并对挥发油成分进行聚类分析和主成分分析。结果 5类栽培白芷（川白芷、杭白芷、祁白芷、禹白芷、毫白芷）和野生兴安白芷共鉴定出81种化合物,分别鉴定出27、34、24、32、28、34种。主要为烷烃类、烯烃类、酯类、有机酸类、醇类等五大类化合物。壬基环丙烷、环十二烷和正十六酸分别为各类白芷共有成分中相对含量最高的挥发油成分。化学聚类结果显示：兴安白芷与5类栽培白芷形成2个分支,栽培白芷又可分为2小类,即川白芷、禹白芷、杭白芷聚为1小类,祁白芷和亳白芷聚为另1小类。主成分分析结果与聚类结果基本一致。结论 六类白芷的挥发油组份及其含量存在一定差异,壬基环丙烷、环十二烷和正十六酸在各类白芷中含量较高。六类白芷总体上分为野生与栽培2大类。     

鼻咽癌放射敏感性与MDR1基因多态性的关系

目的 探讨多药耐药基因(MDR1)多态性(21外显子G2677T和26外显子C3435T)与鼻咽癌放射敏感性差异的相关性.方法 对59例行根治性放疗的鼻咽癌病人,采用DNA限制性片断长度多态性法测定其MDR1 G2677T、C3435T和两者的单体型,并用基因测序法验证.结果 C3435T CC基因型放射敏感性显著高于CT和TT基因型(p=0.026);G2677T GG基因型行根治性放疗的疗效优于GT和TT基因型,但差异无显著性;携带有2677G-3435C单体型的病人放射敏感性显著强于其他单体型携带者(P=0.017).结论 MDR1 G2677T和C3435T多态性可能是鼻咽癌根治性放疗疗效的影响因素之一.     

天麻镇眩颗粒毒理学实验研究

[目的]观察动物天麻镇眩颗粒的急性毒性和长期毒性。[方法]以最大可灌浓度、最大体积的天麻镇眩颗粒溶液1d内灌服小鼠1次,测定最大耐受量,并推算出相当临床人用量的倍数。以高、中、低剂量的天麻镇眩颗粒溶液经胃灌服大鼠,连续12周。观察大鼠的生长发育、血液学、生化学、心肝肾功能、脏器系数、组织病理变化及停药2周后,上述指标的变化。[结果]小鼠1d内1次经胃灌服受试物的最大耐受量>140g/kg。长期毒性试验高剂量组雌性大鼠用药第5周出现脱毛,2周后恢复。高剂量组大鼠给药后24h血小板、白细胞、淋巴细胞高于对照组,统计结果有显著性差异,停药后2周以上三项恢复,与对照组比较未见显著性差异。[结论]天麻镇眩颗粒对血液学的影响是可逆的,连续口服给药较安全。     

复方颠倒散药膜对实验性兔耳痤疮的影响研究

目的观察中药制剂复方颠倒散药膜对实验性兔耳痤疮的疗效。方法将16只新西兰白兔随机分为实验组和对照组2组,采用涂抹油酸的方式建立兔耳实验性痤疮动物模型。实验组涂抹复方颠倒散药膜,2ml/次,1次/d,30min后洗去,连续2周;对照组涂抹维A酸乳膏,1ml/次,1次/d。对两组白兔的兔耳分别进行肉眼及组织学检查。结果实验组肉眼见:兔耳皮肤变薄变软,局部毛囊角栓减少,部分角栓脱落后遗留点状凹陷的毛囊,有轻微脱屑,丘疹变平减少;组织学检查见:表皮增厚明显减轻,毛囊口轻度扩张,少量角化物质充填。对照组肉眼可见兔耳皮肤变薄变软,兔耳毛囊角栓较少,丘疹减轻或变平;组织学检查见:表皮轻微角化过度,真皮内可见少量的炎症细胞浸润,毛囊口及漏斗部少量角化物质充填。实验组用药前、后间差异有统计学意义(P=0.01);对照组用药前、后间差异有统计学意义(P=0.01)。实验组和对照组治疗前后差值间差异无统计学意义(P=1)。结论复方颠倒散药膜对实验性兔耳痤疮具有改善毛囊角化异常的作用。     

清脂软胶囊对实验性高脂模型大鼠脂肪肝变性程度及对血脂水平的影响

目的 观察清脂软胶囊对高脂模型大鼠脂肪肝的病变程度及对血脂水平的影响.方法 SD大鼠灌胃高胆固醇脂肪乳剂以制备大鼠高血脂模型,以清脂软胶囊为治疗组,血脂康为阳性对照组,观察实验动物治疗3周后血清总胆固醇、总甘油三酯、高、低密度脂蛋白水平及动脉粥样硬化指数,同时显微镜下观察肝脏脂肪变性程度,进行统计学分析.结果 与模型对照组比较,清脂软胶囊二个剂量组(150、75 mg/kg)对高脂模型大鼠血清总胆固醇、总甘油三酯水平具有显著的降低作用(P＜0.05);对高密度脂蛋白有一定的升高作用,但无显著性差异(P＞0.05);大剂量组有降低低密度脂蛋白的作用;同时,清脂软胶囊组动脉硬化指数显著低于模型对照组(P＜0.01).肝脏病理结果显示,清脂软胶囊可以减轻高脂模型大鼠肝脏脂肪病变的程度.结论 清脂软胶囊可以调节高脂模型大鼠血脂水平,降低动脉硬化指数,减轻模型大鼠脂肪肝的病变程度.