椎间盘细胞老化信号通路及检测方法的研究进展

细胞老化现象广泛存在于退变的椎间盘内，其在椎间盘退变中的机制主要分为两种类型：一类是由p53-p21-pRB信号介导的复制性老化，另一类是由p16-pRB信号介导的应激诱导的过早老化。目前认为，细胞老化的两条通路之间存在广泛的信号交通和协同效应。此外，细胞老化基本特征的检测方法多种多样，但目前尚缺乏特异性检测指标来判定细胞老化。作者就椎间盘细胞老化的信号通路及细胞老化的检测方法等相关研究进展作一综述。     

后路短节段椎弓根钉固定治疗胸腰椎爆裂骨折围手术期的护理

目的：探讨胸腰椎爆裂骨折患者行后路短节段椎弓根钉固定术尽早最大限度的恢复功能、减轻疼痛的围手术期护理要点。方法：对我院2009年6月至2011年12月48例胸腰椎爆裂骨折行短节段椎弓根钉固定术的患者围手术期采用整体化护理模式,并对临床观察和心理护理、出院指导等方法进行系统回顾总结。结果：手术成功与围手术期的高质量护理是密不可分的,48例均在术后1~2周出院,无任何并发症发生。结论：正确的围手术期护理和康复锻炼能有效减少并发症的发生,远期效果良好,从而提高患者的生活质量。     

骨髓间充质干细胞对肌腱移植物在骨隧道内愈合效果及示踪的实验研究

[目的]观察骨髓间充质干细胞对肌腱移植物在骨隧道内愈合的影响,并为干细胞的标记示踪提供实验依据.[方法]采用贴壁分离筛选法获取大鼠的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),用超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)和DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)对其标记.39只8周龄雄性SD大鼠随机分为两组,实验组21只,对照组18只.实验组在骨隧道内腱-骨结合面注入含双标的BMSCs和Pluronic F-127载体,对照组只注入载体,术后2、4、8周进行生物力学评估愈合效果,实验组2、4、8周组织冰冻切片荧光显微镜和手术后即刻、3、7 d行7.0 T MR示踪移植的BMSCs.[结果]SPIO、DiI能有效标记干细胞.实验组2、4、8周荧光显微镜观察在腱骨界面有DiI标记的阳性细胞存在.7.0 T MR未能在实验组腱骨界面观察到明显信号改变.生物力学最大拔出载荷实验组和对照组在术后2周无统计学差异,在4、8周实验组显著高于对照组(P<0.05).[结论]移植的骨髓间充质干细胞可以促进骨隧道内腱骨结合部的早期愈合,DiI能有效标记示踪干细胞,SHO能有效标记干细胞,但在该实验模型中7.0T MR可能不能活体示踪磁粒子标记的干细胞.     

伊班膦酸钠对钛颗粒诱导的骨溶解作用

[目的]通过建立钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解动物模型,研究伊班膦酸钠对骨溶解的影响,并探讨其作用机制.[方法]24只昆明系小鼠随机分成4组,每组6只,建立钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解模型.空白对照组进行假手术;钛颗粒组在小鼠颅顶植入30 mg钛颗粒;1单位伊班膦酸钠组和10单位伊班膦酸钠组分别于植入钛颗粒第2 d腹腔注射伊班膦酸钠10 mg、100 mg.手术后第10 d,取出颅骨进行病理学分析.[结果]空白对照组骨溶解面积为(0.070±0.009)mm2,没有发生明显骨溶解.钛颗粒组骨溶解面积为(0.369±0.050)mm2,和空白对照组相比发生了更大面积的骨溶解(P<0.05).1单位伊班膦酸钠组和10单位伊班膦酸钠组骨溶解面积分别为(0.164±0.018)mm2、(0.018±0.075)mm2,均小于钛颗粒组骨溶解面积(P<0.05).而且10单位伊班膦酸钠组比1单位伊班膦酸钠组骨溶解面积更小(P<0.05).骨溶解区域破骨细胞数量各组比较结果和骨溶解面积结果类似.[结论]伊班膦酸钠能够有效抑制钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解.     

经表面修饰的-TCP对BMSCs细胞增殖及分化作用的研究

目的研究三种材料,材料一：β-磷酸三钙支架（β—TCP）;材料二：明胶／1氐结晶度羟基磷灰石涂层-磷酸三钙支架（gel／lc—HA．β-TCP）;材料三：明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙（gel／he-HA-β-TCP）。三种材料的细胞毒性及兔骨髓基质细胞（BMSCs）与材料共培养增殖的情况。方法取兔股骨骨髓腔细胞,进行贴壁培养BMSCs。在成骨诱导液中诱导BMSCs。将诱导后的BMSCs与三种支架材料在培养板内共培养1、3、5、7、9d。采用形态学观察、MTT法及ALP检测试剂盒等方法检测材料的BMSCs细胞毒性及BMSCs细胞在材料表面的增殖和分化能力。结果光镜及电镜下观察各组无显著差异。细胞毒性在0-1级。与细胞共培养,β-TCP组在第7．9天与阴性对照组差异有统计学意义。ALP检测,β-TCP组在第7、9天与阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．05）,gel／lc—HA-β-TCP在第9天与阴性对照组差异有统计学意义（p〈0．05）。结论新型明胶／高结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架和明胶／低结晶度羟基磷灰石涂层-β-磷酸三钙支架与BMSCs生物相容性好,适合作为支架材料负载BMSCs构建组织工程骨。     

IL-1β诱导大鼠肝细胞NO产生增多及线粒体膜电位降低

目的: 观察体外培养的大鼠肝细胞在促炎细胞因子IL-1β刺激下一氧化氮(NO)的产生和线粒体膜电位的变化,探讨两者之间的关系.方法: 原位胶原酶灌注法分离和培养原代大鼠肝细胞后,分别用生理盐水、脂多糖(LPS)(10 mg·L-1)、IL-1β(1 nmol·L-1)及LPS(10 mg·L-1)联合IL-1β(1 nmol·L-1)刺激肝细胞,并分别在刺激后6、12、24、48 h留取细胞和上清液,采用分光光度法测定上清液NO的含量,采用荧光探针JC-1结合流式细胞仪检测肝细胞线粒体膜电位的变化.结果: IL-1β刺激后肝细胞产生NO增加而线粒体膜电位降低,两者均呈时间依赖性,并在24 h达峰值;LPS对肝细胞NO的合成没有直接诱导作用,与IL-1β联合刺激也没有协同作用.结论: IL-1β诱导肝细胞过度产生NO从而抑制线粒体呼吸功能可能是炎症应激下肝损伤的潜在机制之一.     

甲泼尼龙和神经节苷脂对大鼠损伤脊髓CD95表达的影响

目的：研究甲泼尼龙（MP）加神经节苷脂（GM1）对大鼠脊髓损伤（SCI）的疗效.方法：采用Allen＇s法制备SCI大鼠模型.将模型大鼠随机分为4组,A组为生理盐水对照组,B组为MP治疗组,C组为GM1治疗组,D组为MP加GM1联合治疗组.大鼠存活不同时间后分别行行为学观察再处死,取伤段脊髓作石蜡切片,行HE染色和CD95单克隆抗体免疫组化检测.结果：HE染色显示脊髓组织病理学改变B、C、D组明显轻于A组,而D组较B、C组轻.伤后2周行为学指标优差依次为D-C-B-A（P＜0.05）.免疫组化检测表明,A组脊髓灰质CD95免疫染色阳性细胞数在8 h达到高峰,在白质中48 h时达到高峰,而D组虽有高峰,但明显少于A组（P＜0.01）,D组也少于B、C组（P＜0.01）.结论：MP与GM1联合应用可阻断神经细胞的凋亡,对损伤的脊髓组织有良好的保护作用并可促进神经功能的恢复.     

米诺环素治疗脊髓损伤的研究进展

米诺环素（minocycline）,化学名为二甲胺四环素,是第2代半合成四环素类药物的衍生物,具有相对分子质量小（为495 000）、亲脂性高、可通过血-脑屏障、口服易吸收的特点.其作为抗生素已成功应用于临床痤疮、泌尿系感染等的治疗.后来发现,米诺环素具有良好的抑制炎症反应作用,完全不同于其抗感染的作用机理,临床上应用于类风湿性关节炎等严重的人类炎症性疾病的治疗.临床实践证明,长期口服米诺环素无明显不良反应且安全有效.最近几年,人们通过研究其对卒中、肌萎缩性侧索硬化症（ALS）、Huntington病、颅脑创伤和脊髓损伤（SCI）的治疗作用发现,米诺环素还是一种安全有效的神经保护剂.     

后路脊柱内窥镜下髓核摘除术治疗椎间盘钙化的腰椎间盘突出症

目的 探讨后路脊柱内窥镜下髓核摘除术（MED）治疗椎间盘钙化的腰椎间盘突出症的手术方法及其效果。方法 用MED治疗椎间盘钙化的腰椎间盘突出症67例，术中摘除髓核并同时扩大侧隐窝和神经根管。结果 术后随访50例，平均随访时间1年3个月。参照Nakano标准评定手术效果。优：37例，良：9例，可：4例。结论 MED治疗椎间盘钙化的腰椎间盘突出症，创口小，出血量少，手术时间短，只要掌握好手术适应证和熟练的手术技巧，便能达到满意的效果。     

退变腰椎终板MRI表现与其TNF-α的表达及临床疗效的相关性研究

目的 探讨退变腰椎终板MRI表现与其TNF-α表达及临床治疗效果是否具有相关性.方法 选取因腰椎退变行椎体间融合术的19例患者,其中MRI检查无改变者7例,ModicⅠ型6例,ModicⅡ型6例.退变终板先行HE染色,光镜下观察软骨形态学变化以确定实验标本,然后用免疫组织化学法检测标本中TNF-α的含量,临床疗效依据手术前后Oswestry功能障碍指数评定.结果 在出现Modic改变的腰椎终板中,TNF-α表达比无Modic改变者明显升高(P<0.05),ModicⅠ型TNF-α表达明显高于ModicⅡ型(P<0.05).ModicⅠ型Oswestry功能障碍指数改善55.28%,ModicⅡ型改善34.27%,无Modic改变者改善48.13%.ModicⅠ型手术效果优于ModicⅡ型.结论 退变腰椎终板的MRI改变与TNF-α表达有关,终板中TNF-α的异常表达可能是下腰痛的原因之一,临床疗效与Modic分型有关.