DNA甲基化参与PXR介导的CYP3A4的表达

目的 DNA甲基化作为表观遗传学的关键组成部分,在基因的表达调控中发挥重要作用。本实验旨在研究DNA甲基化对PXR(孕烷X受体)介导的CYP3A4基因表达的影响。方法以HepG2细胞为研究对象,(1)用甲基转移酶抑制剂5-Aza-2-d C处理细胞,并过表达PXR质粒,检测处理前后CYP3A4和PXR mRNA的表达;(2)构建pCpGLCYP3A4-启动子(P)和pCpGL-CYP3A4-启动子&增强子(EP)质粒,进行体外甲基化,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性;(3) EP甲基化和未甲基化质粒转染细胞,用ChIP-q PCR技术检测CYP3A4启动子区PXR的富集;(4) EP甲基化和未甲基化质粒转染细胞,24 h后加入10μmol·L~(-1)利福平诱导,48 h检测CYP3A4 mRNA的表达。结果 (1) 5-Aza-2-d C能够显著促进CYP3A4和PXR mRNA的表达(P<0.05),呈浓度和时间依赖性;过表达PXR质粒同时暴露5-Aza-2-d C,CYP3A4 mRNA表达水平分别是过表达PXR质粒组和5-Aza-2-d C组的1.77倍和1.85倍(P<0.05);(2) EP未甲基化质粒+PSG5-PXR表达质粒组荧光素酶活性是对照组的1.88倍,而EP甲基化质粒+PSG5-PXR表达质粒组是对照组的1.05倍,两者有显著性差异(P<0.05);(3) EP未甲基化组PXR在CYP3A4启动子远端、中间和近端的富集分别为甲基化组的5.8,5.5和8.9倍;(4)利福平诱导后,EP未甲基化组CYP3A4 m RNA的表达量是对照组的2.4倍(P<0.05),而EP甲基化组CYP3A4 mRNA表达量无显著变化。结论 CYP3A4增强子区甲基化能够抑制PXR介导的CYP3A4的表达,且不受利福平诱导。     

某院1665张门急诊不合理用药处方原因分析及其对策

目的:分析医院门急诊处方质量存在的问题及不合格用药处方的原因及其解决对策。方法:抽取医院2017年6月-2019年5月期间门急诊处方14 400张进行点评,分析其不合格处方科室的分布及不合格用药类型的分布,总结门急诊处方点评中存在的问题,寻找提高门急诊处方质量的方法。结果:14 400张不合格处方中,其中1 665张用药处方不合格(占11.56%),科室分布以儿科、内分泌科、肿瘤科处方不合格率分别为22.60%、20.72%和16.74%;不合格类型中不规范处方238张(占14.29%)、不适宜处方1 412张(占84.80%)和超常处方15张(占0.90%);给药剂量不足(占43.36%)是存在的主要问题。结论:门急诊处方点评是提高门急诊处方质量、推动临床合理用药、保障患者用药安全的有效方法;通过处方点评加强了医院门急诊医疗质量管理(处方合格率达88.44%),促进了合理用药。     

LC-MS/MS法检测中原汉族心房颤动患者达比加群血药浓度个体差异的研究

目的通过高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）法考察中原汉族心房颤动患者达比加群稳态血药浓度个体差异。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,色谱柱为UItimate XB-C₈（3.0 mm×250 mm）,以0.1%甲酸水（A）,0.1%甲酸乙腈溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1,柱温为30℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 472.2（母离子）→m/z 289.0/324.1 （达比加群）,m/z 436.0（母离子）→m/z 145.1/230.9 （内标利伐沙班）。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中达比加群的标准曲线方程为y=0.26x+1.76×10^-2（R²=0.992 3,w=1/x²）,在2～500ng·m L^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L^-1;定量下限准确度范围在86...     

替罗非班调节SIRT1/VEGF信号通路对急性脑梗死大鼠神经元损伤的影响

目的 探讨替罗非班（tirofiban）通过沉默信息调节因子2相关酶/血管内皮生长因子（SIRT1/VEGF）通路对急性脑梗死（ACI）大鼠神经元损伤的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、替罗非班组（60 μg/kg）、抑制剂组（5 mg/kg SIRT1特异性抑制剂EX-527）、替罗非班+抑制剂组,每组15只,除假手术组外,其它各组构建ACI模型。实验结束后,对各组大鼠进行神经功能评分;2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测大鼠脑梗死体积所占百分数;试剂盒检测大鼠血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性;苏木精-伊红（HE）染色检测大鼠脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠神经元细胞凋亡;Western Blot检测大鼠脑组织中SIRT1、VEGF蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区病理损伤严重,神经功能评分、脑梗死体积百分数、MDA含量、神经元细胞凋亡率显著升高,GSH-Px、SOD活性及SIRT1、VEGF蛋白显著降低（P<0.05）;与模型组比较,替罗非班组、替罗非班+抑制剂组大鼠脑组织海马区病理损伤减轻,神经功能评分、脑梗死体积百分数、MDA含量、神经元细胞凋亡率显著降低,GSH-Px、SOD活性及SIRT1、VEGF蛋白显著升高,而抑制剂组大鼠对应指标变化呈相反趋势（P<0.05）;抑制剂EX-527可减弱替罗非班对ACI大鼠的保护作用（P<0.05）。结论 替罗非班可能通过激活SIRT1/VEGF通路,抑制氧化应激反应和神经元细胞凋亡,进而减轻ACI大鼠神经元损伤。     

神经节苷脂联合盐酸多奈哌齐片治疗帕金森病的临床效果分析

目的：分析神经节苷脂联合盐酸多奈哌齐片改善帕金森病疗效的价值。方法：选取2016年7月—2018年5月在郑州市第七人民医院诊断并首诊治疗的帕金森病患者144例,根据治疗方案分为两组,盐酸多奈哌齐片治疗为对照组,盐酸多奈哌齐片联合神经节苷脂治疗为观察组,各72例。比较两组治疗前后蒙特利尔认知量表(the Montreal cognitive assessment, MoCA)、简易智力状况检查法(mini-mental state examination, MMSE)、Webster量表评分、统一帕金森病评定量表(unified Parkinson disease rating scale, UPDRS)、39项帕金森病调查问卷中文版(the 39-item Parkinson''s disease questionnaire, PDQ-39)变化。结果：治疗后,观察组患者MMSE评分、MoCA评分显著高于对照组,UPDRS评分、PDQ-39评分、Webster症状评分显著低于对照组(均P<0.05);观察组和对照组均无严重药物不良反应(P>0.05)。结论：神经节苷脂联合盐酸多奈哌齐片能提高帕金森病认知能力,减轻病情程度,改善生活质量,提升帕金森病临床治疗效果。     

益心舒胶囊联合艾司洛尔治疗快速性心律失常的疗效观察

目的观察益心舒胶囊联合艾司洛尔治疗快速性室性心律失常的效果,分析益心舒胶囊辅助治疗快速性室性心律失常的价值。方法选取2017年1月至2018年6月本院收治的159例心律失常患者作为研究对象,所有患者在电复律或电除颤治疗同时服用药物,根据用药情况分为对照组(81例,采用单纯艾司洛尔治疗)和观察组(78例,采用益心舒胶囊联合艾司洛尔治疗)。比较两组患者主要证候积分、心电图、近期疗效以及不良反应发生情况。结果治疗后两组患者心率、PR间期、QT间期明显优于治疗前,且观察组患者心率、PR间期、QT间期改善幅度大于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后两组患者心悸、胸痛、神疲乏力、气短证候积分明显降低,且观察组患者心悸、胸痛、神疲乏力、气短证候积分降低幅度大于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组患者临床总有效率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);随访期间两组患者总体不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论益心舒胶囊联合艾司洛尔治疗能有效抑制快速性室性心律失常发作,减轻临床症状,改善心电图,增强临床疗效。     

灵芝三萜通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 灵芝三萜通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 灵芝三萜(10、50、100 μg/mL)作用HepG2人肝癌细胞24、48、72 h,MTT和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡.100 μg/mL灵芝三萜作用HepG2细胞24、48、72 h,Western blot检测c-myc、cyclinD1、caspase-3、caspase-8、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达.分别以20 μmol/L XAV-939、20 mmol/L LiCl及100 μg/mL灵芝三萜联合20 mmol/L LiCl干预HepG2细胞,MTT和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡.结果 灵芝三萜(10、50、100 μg/mL)抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),诱导细胞凋亡(P<0.05).100 μg/mL灵芝三萜作用HepG2细胞24、48、72 h,细胞caspase-3、caspase-8蛋白表达上调(P<0.05),而c-myc、cyclinD1、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达下调(P<0.05).20 μmol/L XAV-939干预能抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡(P<0.05),20 mmol/L LiCl则能在一定程度上减弱灵芝三萜对HepG2细胞增殖的抑制和细胞凋亡的诱导作用(P<0.05).结论 灵芝三萜能够通过Wnt/[β-catenin信号通路调节c-myc、cyclinD1、caspase-3、caspase-8蛋白表达,抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

丹红注射液联合瑞舒伐他汀对冠心病合并高脂血症患者MFG-E8、Klotho蛋白表达及血脂水平的影响

目的 探究丹红注射液联合瑞舒伐他汀对老年冠心病合并高脂血症患者血清乳脂肪球表皮生长因子-8(MFG-E8)、Klotho蛋白表达及血脂水平的影响.方法 选取冠心病合并高脂血症老年患者86例,根据就诊顺序编号,以随机数字表法分为观察组与对照组,各43例.对照组予以瑞舒伐他汀治疗,观察组予以瑞舒伐他汀+丹红注射液治疗,两组均连续治疗4周.观察统计两组治疗效果、不良反应情况,并比较治疗前后两组血清MFG-E8、Klotho蛋白表达、炎性因子[超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]及血脂[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]水平.结果 (1)两组治疗后血脂相关指标水平均较治疗前改善,且观察组LDL-C(3.25±0.70)mmol·L-1、TG(1.70±0.99)mmol·L-1、TC(4.85±0.98)mmol·L-1均低于对照组(3.89±0.92)mmol·L-1、(2.45±1.05)mmol·L-1、(5.56±1.19)mmol·L-1,差异有统计学意义(P<0.05);(2)两组治疗后炎性因子水平均较治疗前改善,且观察组Hs-CRP(4.12±0.94)mg·L-1、TNF-α(0.39±0.25)μg·L-1、IL-6(9.15±2.48)ng·L-1均低于对照组(8.52±2.31)mg·L-1、(0.68±0.34)μg·L-1、(14.32±2.95)ng·L-1,差异有统计学意义(P<0.05);(3)两组治疗后Klotho、MFG-E8蛋白表达水平均较治疗前升高,且观察组Klotho蛋白表达水平(43.25±1.74)ng·L-1、MFG-E8蛋白表达水平(512.38±19.58)mg·L-1均高于对照组(34.85±1.87)ng·L-1、(325.47±12.94)mg·L-1,差异有统计学意义(P<.05);(4)观察组治疗总有效率95.35％(41/43)高于对照组74.42％(32/43),差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应率20.93％(9/43)与对照组16.28％(7/43)相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 对冠心病合并高脂血症老年患者予以瑞舒伐他汀联合丹红注射液治疗,可有效降低血清Klotho、MFG-E8蛋白表达、血清炎性因子及调节血脂水平,疗效较为显著,且安全性较高.     

临床药师参与1例尿路感染合并肾功能衰竭患者的药物治疗

目的:探讨临床药师在特殊人群抗感染治疗中的作用.方法:临床药师参与1例复杂性尿路感染合并肾功能衰竭患者抗感染治疗,针对病原菌进行分析,并在抗菌药物的选择、剂量、疗程等方面提出合理建议.结果:患者住院用药期间无相关不良反应发生,尿路感染得到有效控制.结论:临床药师参与药物治疗可促进抗菌药物临床合理应用,能提高临床药物治疗的疗效和安全性.