脂质立方液晶设计制备与表征评价研究进展

目的：研究伊拉地平（ ISR ）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（ MPP＋）损伤的PC12细胞的保护作用及可能机制。方法MPP ＋处理PC12细胞建立帕金森病细胞模型;4-甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法检测细胞存活率;双氯荧光黄乙酸乙酯（ DCFH-DA）染色流式细胞术检测细胞内活性氧（ ROS）的生成;JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（ MMP）。结果1 mmol · L－1MPP＋处理PC12细胞24 h后能明显抑制细胞生长（P＜0．01）;降低线粒体膜电位;ROS含量增加。2μmol· L－1伊拉地平预处理后, PC12细胞存活率显著增加（ P＜0．01）;线粒体膜电位升高;ROS生成减少。结论伊拉地平对MPP＋损伤的PC12细胞具有保护作用,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,阻止线粒体氧化应激发生有关。     

细胞自噬在动脉粥样硬化发生发展中的作用

细胞自噬是生物体内清除功能异常的细胞器、错误折叠的蛋白质、被氧化的脂类等有害大分子物质的重要途径。在动脉粥样硬化中的作用具有双重性,不仅作为抵御环境变化对细胞造成损害的防御机制,又可以诱导细胞Ⅱ型程序性死亡,如何调控自噬在动脉粥样硬化的防治中至关重要。巨噬细胞、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的自噬参与动脉粥样硬化发生发展过程,在斑块的形成和破裂中发挥潜在作用。深入了解细胞自噬与动脉粥样硬化的关系,将有可能为动脉粥样硬化的药物防治提供新的治疗靶点。     

新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及其可能的分子机制。方法:采用MTT法检测新藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用;DAPI染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;FCM法检测细胞周期分布;蛋白质印迹法检测新藤黄酸对cyclin D1、cyclin E、P21、P27和多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]蛋白表达的影响。结果:新藤黄酸对HCT116细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。DAPI染色后荧光显微镜观察发现,新藤黄酸能明显诱导HCT116细胞凋亡。FCM法检测发现,新藤黄酸可以使HCT116细胞G0/G1期比例显著升高,S期比例相应降低,表明细胞周期阻滞于G0/G1期。蛋白质印迹法检测结果表明,新藤黄酸下调了细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E的表达,上调了P21和P27的蛋白表达,诱导了PARP蛋白的剪切。结论:新藤黄酸通过下调细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin E的表达和上调P21、P27的表达,使HCT116细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制HCT116细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

蜈蚣提取液对局灶性脑缺血再灌注大鼠血浆vWF和TPO的影响

目的:研究蜈蚣提取液对局灶性脑缺血再灌注大鼠血浆血管假血友病因子(vWF)和血小板生成素(TPO)的影响.方法:将雄性SD大鼠采用线栓法建立大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、蜈蚣提取液高、中、低剂量组(0.7,0.35,0.175 g·kg-1)和益气活血方组(8.54 g·kg-1),造模后连续ig给药14 d,采用ELASA法测定大鼠血浆vWF和TPO含量.结果:模型组大鼠血浆vWF和TPO含量明显高于假手术组,蜈蚣提取液高剂量组大鼠血浆vWF和TPO含量较模型组明显降低(P＜0.05或P＜0.01),益气活血方组大鼠血浆TPO含量较模型组明显降低(P＜0.01),益气活血方组大鼠血浆vWF较模型组降低但无显著性差异,蜈蚣提取液中、低剂量组大鼠血浆vWF和TPO含量较模型组降低,无显著性差异.结论:蜈蚣提取液能通过降低局灶性脑缺血再灌注大鼠血浆vWF和TPO的含量,改善脑缺血再灌注造成的损伤.     

电针对脑心综合征大鼠脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的观察电针对脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome,CCS)大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响。方法从70只健康SD大鼠中随机选择10只作为假手术组,其余60只用于CCS模型复制。选取造模成功的大鼠30只,分为模型组、电针组和电针非经非穴组,每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法造模,假手术组向大鼠尾状核注入等量0.9%氯化钠注射液。于造模第1天开始电针,电针组选取水沟、风府、内关和心俞穴,电针非经非穴组选取臀部非经非穴点4处,每次20min,每天1次,连续3天。假手术组和模型组仅每天抓空1次。分别采用TUNEL法和免疫组化法检测血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达。结果假手术组偶可见TUNEL细胞,Caspase-3少量表达;模型组血肿周围组织出现较多的TUNEL阳性细胞,Caspase-3大量表达;电针组TUNEL阳性细胞和Caspase-3表达均较模型组和电针非经非穴组明显减少(P<0.01)。结论电针可以抑制CCS大鼠脑组织细胞凋亡,其机制可能与下调血肿周围脑组织Caspase-3表达有关。     

丹酚酸B对谷氨酸诱导的 PC12 细胞兴奋毒保护作用的研究

目的:研究丹酚酸B对谷氨酸诱导PC12细胞兴奋毒的保护及作用机制。方法:以谷氨酸损伤PC12细胞24 h为模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率;LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率;AO/EB双染法荧光显微镜和PI单染流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞内活性氧的含量;Western blotting法检测细胞内Caspase-3蛋白的表达。结果:丹酚酸B可明显抑制谷氨酸诱导的PC12细胞的损伤,阻止细胞LDH的释放,在50～200μmol.L-1剂量呈一定的量效关系;同时,丹酚酸B明显降低谷氨酸诱导的活性Caspase-3蛋白的表达,抑制谷氨酸引起的ROS的累积,降低PC12细胞的凋亡率,在50～200μmol.L-1剂量呈量效相关性。结论:在一定剂量范围内,丹酚酸B对谷氨酸损伤的PC12细胞有保护作用,其保护的机制可能与丹酚酸B减少ROS的生成,阻止氧化损伤的发生,抑制Caspase-3途径依赖的凋亡相关。     

脑络欣通对局灶性脑缺血-再灌注大鼠血液流变学及相关调节因子的作用

目的观察脑络欣通对大脑中动脉闭塞缺血-再灌注(MCAO/R)大鼠血液流变学及相关调节因子的影响。方法将Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、通心络组、脑络欣通低剂量(40 mg/ml)组、中剂量(80 mg/ml)组及高剂量(100 mg/ml)组,每组各10只。采用线栓法制备大脑中动脉闭塞缺血-再灌注(MCAO/R)模型。采用全自动血液流变仪检测全血黏度、血浆黏度、红细胞比容(HCT);高性能血凝仪检测血浆纤维蛋白原(FIB)含量;运用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验,检测血小板生成素(TPO)、内皮素(ET)水平;运用激光多普勒仪,于造模后第14天监测各组大鼠的局部脑血流量(rCBF)。结果①假手术组、通心络组、脑络欣通3个剂量组大鼠的全血黏度各项、血浆黏度、HCT和FIB指标均低于模型组,差异有统计学意义,P<0.01。②通心络组、脑络欣通中剂量和高剂量组的HCT低于脑络欣通低剂量组,差异有统计学意义,P<0.01。③假手术组、通心络组及脑络欣通3个剂量组大鼠的TPO、ET水平均低于模型组,rCBF高于模型组,差异具有统计学意义,P<0.01或P<0.05。④脑络欣通中剂量组大鼠TPO水平低于脑络欣通低剂量组,rCBF高于脑络欣通低剂量组,差异具有统计学意义,P<0.05。结论脑络欣通可以改善MCAO/R模型大鼠的血液流变学指标,调节凝血纤溶系统相关因子,对缺血性脑血管病可能具有良好的作用。     

藁本内酯神经保护药理作用研究进展

藁本内酯在川芎、当归等伞形科植物中含量较高,是其主要活性成分之一,具有多种药理活性。藁本内酯在神经保护、舒张血管、镇痛消炎等方面的药理作用以及吸收、分布、代谢和排泄等药物代谢动力学特性已有较多报道。对近年来藁本内酯在神经保护方面的药理作用进行综述,为其临床应用于脑病的治疗提供参考依据。     

新藤黄酸温敏原位凝胶剂的设计与研究

目的制备注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂。方法运用星点设计-效应面优化法确定注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂的最佳处方,并采用高效液相法对其体外释放进行含量测定。结果最佳处方为0.2%新藤黄酸+18.26%泊洛沙姆407(F127)+7.4%泊洛沙姆188(F68)+0.5%苯甲醇,胶凝温度为35.4℃。新藤黄酸温敏原位凝胶的体外释放方程为Y=0.983 5X+4.028,R=0.999 3,符合零级释药。结论星点设计-效应面优化法能很好地优化该制剂处方,优化后处方的体外释药稳定,达到预期要求。     

MicroRNAs对动脉粥样硬化关键信号分子的影响

microRNAs是近年来发现的内源性非编码单链RNA小分子,在心血管系统中具有特异性的表达谱,通过降解mRNA或抑制蛋白质翻译调控转录后基因的表达。microR-NAs在动脉粥样硬化形成的病理过程中,参与血管内皮细胞的损伤与修复;细胞炎性因子、生长因子等信号分子的表达与释放和血管平滑肌细胞的增殖与迁移等环节,从而调控动脉粥样硬化的发生发展。