信号传导与激活因子2基因在食管癌中的表达

目的:筛选食管癌中特异表达的基因,进一步了解食管癌发生的分子机制。方法:利用荧光差异显示技术(DD-PCR)获得差异表达的片段,对这些片段进行克隆和序列分析。通过在基因库中同源性检索,查找差异片段相对应的同源基因。利用实时荧光定量PCR技术在食管癌临床标本中进行验证。结果:通过DD-PCR获得的差异片段中有一个片段对应于信号传导与激活因子2(stat2)基因,该基因的读码框长2556 bp,编码852个氨基酸,编码蛋白分子量约97.9 kD。应用实时荧光定量PCR方法进一步验证发现该基因在食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织(P<0.05,n=16)。结论:stat2基因在食管癌组织中呈高表达,推测其可能在食管癌的发生发展中起一定的作用。     

繁缕属植物抗病毒活性物质基础组分结构研究

繁缕属植物全世界约有120种,是重要的植物资源。近年来因其明确的抗菌、抗病毒活性逐渐成为科研领域的研究热点。繁缕属植物富含黄酮、环肽、酚酸、挥发油、皂苷等多种化学成分,研究表明繁缕多糖及其黄酮碳苷具有一定的抗病毒活性。然而,其抗病毒物质基础研究尚不完善,作用机制不明确,以致于临床应用受到一定限制。在总结繁缕属植物各种化学成分研究概况的基础上,通过分析繁缕属植物抗病毒作用与其化学成分的相关性,指出繁缕属植物抗病毒活性物质基础可能是由多种成分按照一定比例共同作用的结果,最终提出基于“组分结构理论”的繁缕属植物抗病毒活性物质基础的研究思路,为开发抗病毒新药奠定基础。     

H:z66抗体应激后伤寒沙门菌fliG基因缺陷株与野生株基因表达的差异

目的:观察伤寒沙门菌鞭毛转子蛋白基因fliG在H:z66抗体应激后对其他基因表达的影响。方法:利用自杀质粒介导的同源重组法制备伤寒沙门菌fliG基因缺陷变异株;利用伤寒沙门菌全基因组芯片分析技术,比较伤寒沙门菌野生株和fliG基因缺陷变异株在H:z66抗体应激后的基因表达谱差异,并选择部分表达有差异的基因进行实时定量PCR验证。结果:经PCR验证及序列比对,伤寒沙门菌fliG基因缺陷变异株制备成功;基因表达谱比较结果表明,与野生株相比,伤寒沙门菌fliG基因缺陷变异株在H:z66抗体应激后有21个基因表达上调,7个基因表达下调;实时定量PCR结果与芯片结果一致。结论:fliG基因在伤寒沙门菌受到H:z66抗体刺激后的基因表达调控中发挥一定作用。     

嗅鞘细胞上清液对抗过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的线粒体机制

目的： 研究嗅鞘细胞上清液（olfactory ensheathing cell conditioned medium, OECCM）对星形胶质细胞的保护作用及其线粒体机制。方法： 先用500 μmol/L H₂O₂ 损伤星形胶质细胞20 min;再以50%的OECCM继续培养细胞24 h。MTT法检测星形胶质细胞的活性,Hoechst 33342 染色法和蛋白质印迹法检测细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3的表达;用JC-1染色法检测线粒体的膜电位。结果： OECCM能减少H₂O₂诱导的细胞凋亡,减少caspase-3的表达,并且使线粒体膜电位增高。结论： OECCM可以对抗500 μmol/L H₂O₂诱导的星形胶质细胞凋亡,其机制可能与稳定线粒体膜电位有关。     

烫伤大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素动态变化的观察

目的: 动态观察烫伤大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素水平的变化,为临床治疗和预后提供理论依据. 方法: 将雄性SD大鼠60只随机分对照组、烫伤1组(造模1天)、烫伤2组(造模5天)、烫伤3组(造模10天)、烫伤4组(造模15天)和烫伤5组(造模20天)共6组.取血浆用于检测促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇和醛固酮.结果: 与对照组相比,烫伤模型1,2,3,4组血浆ACTH、皮质醇和醛固酮含量明显升高(P＜0.05),尤在10天左右达到最高峰,但到达15天已开始下降,而烫伤模型5组即造模后20天ACTH、皮质醇和醛固酮趋于正常水平,与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论: 大鼠烫伤早期下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素水平出现应激性的持续性上升,对机体具有重要的保护作用,而到烫伤后期由于肾上腺皮质功能的减退而开始下降,应引起高度重视.     

小鼠尾动脉介入法测量血压

在生物学实验中,实验动物的生命指标是基本的监测项目,其中血压是最为重要的观测指标之一.长期以来,对于血压测量,常采用的动物主要为:大鼠、兔、狗等.目前采用小鼠测量血压的报道甚少,但小鼠在研究中的应用十分广泛,本次实验着重探索一种小鼠血压的测量方法,在实验中我们采用经尾动脉插入头皮针,其头皮针与记录仪相连测量血压的方法(简称尾动脉介入法),可反复测量其尾动脉血压,结果显示本方法适用于长期慢性实验,操作简单,数值准确、稳定.     

有氧运动对心理应激衰老大鼠行为和氧自由基的影响

目的:研究有氧运动对心理应激衰老大鼠行为和外周血氧自由基的影响. 方法:健康雌性SD大鼠28只,随机分为对照组、运动组、心理应激组、运动 心理应激组,实验后测定大鼠的开场行为和外周血自由基的变化情况. 结果: :①开场行为:在穿越格数上运动组、心理应激组、运动 心理应激组与对照组相比较均有显著的增加(P＜0.05),在站立次数上心理应激组、运动 心理应激组与对照组及运动组相比较有显著减少(P＜0.01).②血清中SOD活性、H2O2含量:各组间均无明显差异性;MDA含量:运动组、运动 心理应激组与对照组及心理应激组相比较有明显的减少(P＜0.05);过氧化氢酶(CAT)活性:运动组的CAT活性明显高于心理应激组(P＜0.05);GSH-px活性:与对照组相比较,运动组、运动 心理应激组的活性明显增加(P＜0.05),心理应激组则明显降低(P＜0.05).结论:不适宜的心理应激可对动物的自发行为和探究行为产生影响,并可诱发机体内自由基量的增加而导致机体损伤,而通过有氧运动可减轻心理应激对机体产生的影响.     

MSCs联合雷帕霉素对异基因鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨体外骨髓间充质干细胞（MSCs）联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度。用EZ SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real time PCR测定T淋巴细胞IL 10 mRNA、IFN γ mRNA的表达水平。结果MSCs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著（P＜0.01）。MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独MSCs组抑制作用更加明显(P＜0.01)。MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN γ mRNA表达和协同抑制IL 10 mRNA表达的作用。单独MSCs或MSCs联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响。结论MSCs联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN γ mRNA、IL 10 mRNA表达有关。     

基于生物信息学分析miR-30a及相关炎症指标在脓毒症中的表达及临床意义

目的:探讨miR-30a及相关炎症指标在脓毒症中的表达并分析其临床意义。方法:运用GEO数据库检索筛选基因芯片并分析miR-30a表达情况,采用miRecords网站数据库的预测软件预测其靶基因,并对其进行KEGG通路富集分析。收集2019年1月至2021年1月江苏大学附属医院收治的脓毒症患者64例,根据病情轻重分为脓毒症非休克组和休克组,每组32例。根据28 d病情转归情况分为存活组(n=44)与死亡组(n=20)。另选10例健康体检者作为对照组。检测各组的白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和IL-6水平,并计算序贯器官衰竭评分(SOFA);RT-PCR检测外周血miR-30a表达,并分析与SOFA评分的相关性;应用ROC曲线评价miR-30a对脓毒症的诊断价值。结果:GEO数据库检索发现miR-30a在脓毒症组的表达高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,脓毒症组miR-30a、WBC、CRP、PCT、IL-6及SOFA评分均升高(P<0.05或<0.01);与脓毒症非休克组相比,休克组WBC及SOFA评分升高(P<0.05);与脓...