重组FoxP3腺相关病毒转染小鼠CD4+CD25 -T细胞的实验研究

目的：研究FoxP3（Forkhead Box P3）基因在小鼠T细胞的表达情况，以及重组FoxP3腺相关病毒（adeno-associatedvirus，AAV）对小鼠CD4^＋CD25^-T细胞功能的影响。方法：采用实时定量PCR检测CD4^＋CD25^-T细胞和CD4^＋CD25^-T细胞FoxP3 mRNA表达情况，利用基因重组技术构建FoxP3腺相关病毒载体，体外转染CD4^＋CD25^-T细胞，通过细胞增殖试验观察转染CD4^＋CD25^-T细胞功能变化。结果：CD4^＋CD25^-T细胞较CD4^＋CD25^-T相比高水平表达FoxP3基因mRNA，重组FoxP3腺相关病毒转染后的CD4^＋CD25^-T细胞对CD3单抗的刺激呈低反应性，并且能抑制新鲜分离CD4^＋CD25^-T细胞的增殖。结论：FoxP3基因转染的CD4^＋CD25^-T细胞在体外具有抑制T细胞活化增殖的功能。     

人λ-干扰素在BHK-21中的表达及生物学活性的研究

目的:研究HuIFN-λ1和HuIFN-λ2真核细胞重组表达及其生物学活性.方法:用水疱性口炎病毒(VSV)刺激人宫颈癌HeLa细胞, 用RT-PCR克隆HuIFN-λ1和HuIFN-λ2基因, 与PCAGG-EGFP真核表达载体连接, 构建重组体PCAGG-HuIFN-λ1和PCAGG-HuIFN-λ2并进行鉴定, 后在BHK-21细胞进行表达, 采用VSV*GFP于人肺腺癌A549上进行表达产物抗病毒活性测定;并通过已构建的MDBK-Mxp-Luc细胞系对HuIFN-λ1和HuIFN-λ2诱导MxA抗病毒蛋白产生的特性进行研究.结果:HuIFN-λ1-PMD18-T Vector和HuIFN-λ2-PMD18-T Vector的SacⅠ、XhoⅠ和SacⅠ和SalⅠ双酶切鉴定, 均出现610 bp大小的带, 测序示与GenBank上报道的序列完全一致.PCAGG-HuIFN-λ1活性104 IU/mL, PCAGG-HuIFN-λ2活性为102 IU/mL, 且PCAGG-HuIFN-λ1诱导Mx抗病毒蛋白的表达一定时间内随时间延长表达不断增强, 9～12 h达高峰, 24 h后消失(P＜0.05).结论:成功构建了PCAGG-HuIFN-λ1PCAGG-HuIFN-λ2 的真核表达载体并在BHK-21细胞中得到表达, 其抗病毒活性与诱导Mx抗病毒蛋白密切相关.     

老年性白内障后房型人工晶体植入术并发症探讨

白内障是国内外居首位的致盲性眼病 ,以手术治疗为主。由于眼科显微手术的普及 ,高质量人工晶体的问世 ,可做现代白内障囊外摘除术及人工晶体植入术 ,使无晶体眼得到合理的屈光矫正 ,术后可迅速恢复视力 ,建立双眼单视和立体视觉。但手术并发症仍屡见不鲜 ,为进一步减少并发症 ,改善预后 ,现就作者于2 0 0 0年 6月～ 2 0 0 1年 3月所参加的 98例 (10 0眼 )老年性白内障后房型人工晶体植入术的并发症进行分析。1　资料与方法1.1　临床资料　 98例 (10 0眼中 ) ,男 5 7例 (5 9眼 ) ,女4 1例 (41眼 )。年龄 5 2～ 89岁 ,平均 6 8岁。1.2　手术…     

ICAM-1单克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤作用的研究

目的探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法48只7 d龄SD大鼠随机分为缺血缺氧组(A组)、ICAM-1单抗治疗组(B组)、生理盐水组(C组)和正常对照组(D组)。其中A组观察到再给氧后2 h,24 h,48 h,72 h和168 h处死,B,C,D组观察到再给氧后48 h处死。应用免疫组织化学法和HE染色观察1CAM-1在不同时间脑组织的表达和脑组织中性粒细胞浸润情况。结果A组再给氧2 h,脑微血管内皮细胞ICAM-1微弱表达,24 h后表达开始增加,48 h达到高峰,同时受损脑组织中性粒细胞浸润也随之增加。B组再给氧48 h后,ICAM-1表达强度及中性粒细胞浸润比同时间点缺氧缺血组明显降低。结论HIBD时ICAM-1的表达与中性粒细胞浸润密切相关,ICAM-1单抗对新生大鼠HIBD具有一定保护作用。     

布洛芬3种晶型的制备及其溶解度测定

近年来国外有关药物多晶型方面的论文较多 ,国内亦有这方面的综述。药物的多晶型则有着不同的理化性质 ,特别是差异很大的溶解速率 ,使其在制剂中具有明显的重要性[1 3 ] ,对它的研究 ,关乎提高药物的疗效及生物利用度 ,减轻药物的毒副作用。布洛芬是较早开发的非甾体消炎镇痛药 ,临床上用于风湿性、类风湿性关节炎和骨节炎的治疗等。其结构式为 :C—CH3CH3C H2HC—COOHHCH3布洛芬在水中几乎不溶 ,易溶于乙醇、乙二醇(DEG)、丙二醇 (PG)和乙醚 (ET)等有机溶剂。我们采用了在不同溶媒中用冷却析晶法、热溶液冷却法和溶媒析晶法 ,…     

高效毛细管电泳测定血管紧张素转化酶抑制剂captopril的活性

目的建立高效毛细管电泳测定血管紧张素转化酶抑制剂captopril抑制活性的方法。方法用紫外分光光度计确定了马尿酸的特征吸收波长为228 nm。高效毛细管电泳的条件：熔融石英毛细柱，电泳缓冲液为pH 8.3的50 mmol·L^-1磷酸缓冲液，进样压力4.8 kPa，进样时间3 s，分离电压20 kV，检测波长228 nm。结果在7 min内使反应物和生成物完全分离，标定了captopril的IC₅₀值为0.019　μmol·L^-1，经过酶反应动力学判断captopril为竞争性抑制剂。结论该方法准确、简便、快速，可用于captopril抑制活性的分析。     

鸢尾中鸢尾酮的鉴定及含量测定

目的 建立鸢尾中鸢尾酮的鉴定和分析方法。方法 采用气相色谱-质谱法鉴定了鸢尾酮的3种异构体，并采用气相色谱法测定了鸢尾浸膏中鸢尾酮的含量。结果 根据质谱裂解规律鉴定了3种鸢尾酮的异构体：α-、β-、γ-鸢尾酮，并且鸢尾浸膏中主要含γ-鸢尾酮。两批鸢尾中鸢尾酮的质量分数分别为687、238μg/g(n=6)，质量分数差异较大。结论 采用气相色谱一质谱法和气相色谱法分析鸢尾中鸢尾酮，方法高效、准确，分析时间适中。     

桑叶多糖的提取纯化及其含量测定

目的：纯化桑叶多糖并测定其含量。方法：采用10％三氯乙酸、大孔树脂初步纯化桑叶多糖，采用硫酸-蒽酮法对其含量进行测定。结果：用三氯乙酸除蛋白的方法是可行的；桑叶中多糖的平均含量为2．62％，平均回收率为98．81％，RSD为2．08％。结论：该法可作为桑叶中多糖的含量测定方法。     

无花果残渣中抗肿瘤成分的超临界CO2萃取和抑瘤试验

目的:研究无花果残渣中抗肿瘤功效成分的超临界CO₂萃取技术及萃取物的体内外抗肿瘤效果。方法:采用MTT法检测萃取物质的体外抗肿瘤活性,研究残渣中抗肿瘤功效成分的最佳萃取条件;采用MTT法研究萃取物质对U937细胞、95D细胞和AGS细胞3株肿瘤细胞株的体外抑制作用;以小鼠移植性肝癌Heps为对象,研究萃取物对体内肿瘤的抑制作用。结果:超临界CO₂提取的最佳工艺条件为:粉碎度100目,萃取压强30MPa,萃取温度45℃,萃取时间6h,气体流量12L.h^-1,萃取得率为25.3g.kg^-1,得到的萃取物在体外对U937细胞、95D细胞和AGS细胞具有一定的抑制作用,IC₅₀分别为70.125,127.957,116.000μg.mL^-1。萃取物对小鼠移植性肝癌Heps在25mg.kg^-1的剂量时抑瘤率为49.3%。结论:本萃取工艺合理、稳定。可以为无花果残渣和无花果中抗肿瘤功效成分的提取提供参考。     

寻租活动对医疗服务价格影响的分析

在完全垄断、垄断竞争或政府干预的市场中,寻租活动是一种普遍的经济现象。分析了我国医疗服务体系中多方寻租的原因,租的来源,参与医疗服务体系寻租活动的各种主体的寻租行为,寻租活动对医疗服务价格的直接和间接影响等,提出了解决这一问题的基本思路。